Човечка и животинска жолчка на празна биолошка матрица за развој на биоаналитички метод и валидација на биоаналитички метод

1 iphase производи

2 празна биоматрикс

Различни видови наБиолошки матрици, вклучувајќи празна цела крв, серум, плазма, жолчка, млеко, урина, измет, цревна содржина, висцерален орган, стаклестото тело хумор, воден хумор, цереброспинална течност, итн., Собрани од здрави субјекти или здрави експериментални животни, колективно се нарекуваат празни биолошки матрици.

3 потребата од употреба на празни биолошки матрици во претклинички студии

In Преклинички истражувања на лекови, празна биолошка матрица е камен -темелник за воспоставување и потврдувањеbiological analysis methods. Со употреба на празни матрици од здрави субјекти или експериментални животни, истражувачите можат точно да подготват стандарди за калибрација и примероци за контрола на квалитетот, да ја проценат специфичноста, чувствителноста, прецизноста и ефектите на матрицата на аналитичките методи и да обезбедат сигурност на резултатите од квантификацијата на концентрацијата на лековите.

4 Валидација на биолошки метод и воспоставување и примена на празна биолошка матрица

Како што се бара со упатствата на ФДА/ЕМА, во воспоставувањето и валидацијата на методите за анализа на биолошката матрица, треба да се користат празни биолошки матрици за да се обезбеди точност и сигурност на методот на анализа. Особено во анализата на LC - MS/MS, разликите во компонентите на матрицата од различни извори може значително да влијаат на ефикасноста на јонизацијата. Празната матрица главно се користи за подготовка на стандарди за калибрација, подготовка на примероци за контрола на квалитет за испитување на специфичноста, селективноста, прецизноста, точноста, ефектите на матрицата, стапката на обновување, стабилноста, линеарноста на разредувањето, ефектите од мешање, итн. На аналитички методи. Ефектот на селективноста и матрицата на методот на откривање бараат поголеми барања за празна матрица.

5 сценарија за примена на жолчна празна матрица во развој на лекови

Вештачка жолчна матрица (Симулирана жолчна матрица)is a synthetic solution that simulates natural bile components and is used for drug metabolism, toxicology, and biological analysis research.Blонска празна матрицаима важна вредност на примената во следниве сценарија за развој на лекови: фармакокинетички (PK) студии за лекови на хепатобилијарен систем, студии за апсорпција и прва пасус метаболизам на орални лекови, студии за интеракција со лекови на жолчката киселина, проценка на хепатотоксичност и студии за стаза на жолчката и развој на методи за биолошка анализа (LC - MS/MS).

6 лекови на хепатобилијарен систем

Во развојот на лекови за хепатобилијарниот систем, жолчката празна матрица игра незаменлива улога како стандардизиран ин витро симулациски систем во фармакокинетички (ПК), токсиколошки и истражувања за биолошка анализа.

6.1 Оценете ги карактеристиките на излачување на жолчката на лековите

Истражување за хепатоинтестинална циркулација: жолчката е една од важните патеки за излачување на лекови и нивните метаболити. Со употреба на вештачка жолчна матрица, промените во концентрацијата на лековите во жолчката може да се симулираат за да се процени дали тие се реапсорбираат преку хепаталната цревна циркулација.

Одредување на стапката на клиренс на жолчката: За лекови кои активно се излачуваат преку жолчката (како што се статини и одредени антибиотици), вештачката жолчка (симулирана жолчка) може да помогне во квантифицирање на нивната ефикасност на дозволата и да се оптимизира режимот на дозирање.

6.2 Проучете го ефектот на жолчните киселини врз апсорпцијата на лекови

Ефект на растворливост: жолчните киселини можат да промовираат растворање и апсорпција на цревата на липофилни лекови како што е витамин Д. вештачки жолчка може да симулира различни композиции на жолчна киселина и да го процени нивното влијание врз биорасположивоста на лекови.

Интеракции со лекови на жолчна киселина: Некои лекови (како што е лираглутид) може да се натпреваруваат со транспортери на жолчна киселина (како што се BSEP, MRP2) и вештачка жолчка може да се користат за проучување на вакви интеракции за да се избегнат потенцијалните ризици на жолчката стаза.

6.3 Проценка на ризик од хепатотоксичност и холестаза

Модел на холестаза предизвикана од лекови: вештачки жолчка може да симулира патолошки состојби како што се опструкција на жолчниот канал и хипербилирубинемија и се користи за да открие дали лековите се мешаат во проток на жолчката или ги оштетуваат клетките на жолчните канали.

Анализа на биомаркер: Со додавање на специфични компоненти како што се билирубин, жолчни киселини и воспалителни фактори, може да се процени влијанието на лековите врз компонентите на жолчката и може да се предвиди клиничка безбедност.

6.4 Етички и практични предности на замена на природната жолчка

Обраќајќи се на прашањето на недостигот на примероци: Природната жолчка треба да се добие преку инвазивни методи како што е катетеризација на жолчниот канал, додека вештачката жолчка може да биде бесконечно подготвена за да се избегнат етички ограничувања.

Конзистентност на серијата: Составот на вештачката матрица (симулирана матрица) е контролиран, намалувајќи го влијанието на индивидуалните разлики во природната жолчка врз експерименталните резултати.

6.5 Support the Development of LC-MS/MS Biological Analysis Methods

Корекција на ефектот на матрицата: Комплексниот состав на природна жолчка (високи жолчни соли, фосфолипиди, пигменти) лесно може да доведе до јонска сузбивање или подобрување во анализата на LC - MS/MS. Вештачката матрица на жолчката (симулирана жолчна матрица) може да обезбеди стабилна позадина, да ја оптимизира чувствителноста и точноста на методот.

7 Истражување на вкрстени видови

Составот на жолчката варира во голема мерка кај различните животни (стаорци, кучиња, мајмуни) и вештачки жолчка може да ги стандардизира разликите во видовите и да ја подобри преводот на претклиничките податоци.

7.1 Циномолгус Мајмун жолчка (жолчка NHP)

Bолчката на циномолгус мајмун е многу сличен на оној на луѓето во однос на составот (како што е профилот на жолчката киселина) и изразот на транспортерот на лекови (како што се BSEP, MRP2), што го прави златен стандарден не - човечки примарен модел за проценка на хепатална билијарна екскреција и интеракции со лекови на жолчката киселина.

7.2 Beагл куче жолчка

Содржината на фосфолипид во жолчката Beagle е релативно висока, што ја прави погодна за проучување на екскрецијата на жолчката и апсорпцијата на жолчката сол зависна од липофилните лекови. Како и да е, разликите во составот на жолчката киселина помеѓу Бигл и луѓето бараат калибрација преку вештачки матрици.

7.3 SD жолчка стаорци

Обемот на собирање на жолчката на SD стаорци е релативно голем (~ 1 ml/време), што е широко користено за хепатална цревна циркулација и студии за лекови на хепатотоксичност. Сепак, треба да се напомене дека нивната висока основа на билирубин може да се меша во анализата на LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 жолчка на глувчето

Cd - 1 глушец има мал волумен на жолчката (50 - 200 μ L), што ги прави погодни за проучување на механизмите на моделите за модификација на гени (како што е патеката FXR/PXR), но техниките за микро квантификација се потребни за адаптација.

7.5 C57BL/6 жолчка на глувчето

Глувчето C57BL/6 најчесто се користат во моделите на метаболички заболувања, а промените во нивниот состав на жолчката можат да ги одразуваат патолошките состојби, што бара употреба на вештачка жолчна матрица за симулирање на патологијата.

Горенаведените модели треба да се комбинираат со вештачка жолчна матрица за да се контролираат разликите во видовите и да се оптимизира компарабилноста на вкрстените видови на методите LC - MS/MS.

Заклучок

Вештачката жолчна матрица, како клучна алатка за симулирање на функцијата на природна жолчка, игра незаменлива улога во развојот на хепатобилијарни лекови. Со стандардизирање на жолчката композиција на различни видови (како што се циномолгус мајмуни, кучиња Beagle, SD стаорци, Cd - 1 стаорци, стаорци C57BL/6), вештачката жолчна матрица ефикасно се однесува на основните предизвици, како што се етички ограничувања, индивидуални разлики и патолошка состојба на симулација на природни примероци, значително ја подобруваат сигурната и преводната вредност на лекот.

Со развој на прецизна медицина, вештачката жолчна матрица дополнително ќе комбинира патолошки специфични компоненти и микрофлуидна технологија за динамично симулирање на микроекологијата на црниот дроб и жолчното кесе, обезбедувајќи посилна поддршка за иновативен развој на лекови.

Клучни зборови:blank biological analysis, biological matrix sample, biomatrix analysis, human bile, animal bile, bile sample, artificial bile, simulated bile, NHP bile, Cynomolgus monkey bile, Rhesus Monkey bile, Beagle Dog bile, Rat bile, Mouse bile, LC-MS/MS, Bioanalytical Method Development, Bioanalytical method validation

Референца

Ли Т, Чианг Ји. Сигнализација на жолчката киселина кај метаболички заболувања и терапија со лекови. Pharmacol Rev. 2014 OCT; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.