Кои се човечките PBMC и нивната улога во имунитетот?

Човечки PBMCS, или мононуклеарните клетки на периферните крв, се критична група на имунолошки клетки што циркулираат во вашиот крвоток. Овие клетки вклучуваат лимфоцити, моноцити и дендритични клетки, секоја игра единствена улога во одбраната на вашето тело. PBMC ве штитат со идентификување и неутрализирање на штетни патогени, како бактерии и вируси, истовремено одржувајќи имунолошки рамнотежа.

Истражувањата покажуваат дека PBMC остануваат стабилни со текот на времето, со одржливост на клетките над 85% кај повеќето примероци. Покрај тоа, нивниот генски израз може брзо да се прилагоди. На пример, изразот TNFα се зголемува за повеќе од три пати во рок од неколку часа. Ваквата разноврсност ја истакнува нивната важност во регулирањето на имунолошкиот одговор.

Состав на човечки PBMC

Лимфоцити: Т -клетки, Б -клетки и НК клетки

Лимфоцитите се клучна компонента на човечките PBMC. Тие вклучуваат Т -клетки, Б -клетки и природни убијци (НК) клетки, секоја со различни улоги во имунитетот. Т -клетките помагаат во регулирање на имунолошкиот одговор и директно ги напаѓаат заразените клетки. Б -клетките произведуваат антитела, кои ги неутрализираат штетните патогени. НК клетките, од друга страна, таргетираат и уништуваат абнормални клетки, како што се оние заразени од вируси или карцинозни клетки.

Интересно е што, некои лимфоцити кај човечки PBMC, идентификувани како CD3+ CD19+ клетки, покажуваат двојна функционалност. Овие клетки можат да дејствуваат како Т -клетки и Б -клетки. Тие реагираат на заканите преку сигналните патеки на рецепторот T - клетки (TCR) и B - клетки (BCR). Оваа двојна улога им овозможува да учествуваат и во хуморалните и во клеточните имунолошки реакции. На пример, тие ги врзуваат антигени поефикасно од конвенционалните Б -клетки и произведуваат интерферон - гама (IFN - γ) на нивоа слични на Т -клетките.

Моноцити и нивните имунолошки функции

Моноцитите се уште една клучна група во рамките на човечките PBMC. Овие клетки патролираат во вашиот крвоток, барајќи знаци на инфекција или оштетување на ткивата. Откако ќе детектираат проблем, тие мигрираат во погодената област и се претвораат во макрофаги или дендритични клетки. Макрофагите зафаќаат и варат патогени, додека дендричните клетки претставуваат антигени на други имунолошки клетки.

Моноцитите исто така ослободуваат цитокини, кои сигнализираат молекули кои помагаат во координирање на имунолошкиот одговор. Со тоа, тие осигуруваат дека вашето тело реагира ефикасно на инфекции или повреди.

Дендритичните клетки и нивната улога во презентацијата на антиген

Дендритичните клетки се професионални антиген - кои претставуваат клетки (АПЦ) во рамките на човечки PBMC. Тие играат клучна улога во активирањето на Т -клетките со презентирање на антигени на нивната површина. Истражувањата покажуваат дека дендритичните клетки се единствените АПЦ способни да ги активираат и CD4+ и CD8+ наивните Т -клетки. Нивната ефикасност доаѓа од нивната способност да го забават варењето на антигенот, што ја зголемува достапноста на пептиди за оптоварување на MHC.

Овие клетки обезбедуваат дека вашиот имунолошки систем ги препознава и реагира ефикасно на заканите, што ги прави неопходни во имунитетот.

Изолација на човечки PBMC

Извори на PBMC: Периферна крв и коскена срцевина

Човечките PBMC можат да бидат изолирани од два основни извори: периферна крв и коскена срцевина. Периферната крв е најчестиот извор заради неговата пристапност и минималната инвазивност. Коскената срцевина, од друга страна, обезбедува побогата околина за имуните клетки, но бара поинвазивна постапка.

Приносот и чистотата на PBMC може да варираат во зависност од методот на извор и изолација. На пример, студиите покажуваат дека стандардниот метод на Ficoll постигнува поголем принос и чистота во споредба со методите CPT (цевка за подготовка на клетки). Табелата подолу ги истакнува овие разлики:

Техника на преклопување на фикол за изолација на PBMC

Техниката на преклопување на фиколот е широко користен метод за изолирање на PBMC. Овој процес вклучува слоеви на крв над раствор на фикол - паке и центрифугирање на истиот на одделни клетки врз основа на густина. PBMCs формираат посебен слој помеѓу плазмата и фиколот, што ги прави лесни за собирање.

Студиите ја потенцираат важноста на правилното ракување во текот на овој процес за да се обезбедат постојани резултати. На пример, една студија открила дека користењето на Ficoll правилно може да постигне чистота до 97% со минимална варијабилност. Табелата подолу споредува различни методи на инкубација за изолација на PBMC:

Имуномагнетни методи за раздвојување

Имуномагнетното раздвојување е уште една напредна техника за изолирање на PBMC. Овој метод користи магнетски мониста обложени со антитела за да се насочат специфични типови на клетки. Позитивното сортирање ги изолира клетките со врзување на нив со монистра, додека негативното сортирање ги отстранува несаканите клетки, оставајќи ја посакуваната популација недопрена.

Истражувањата покажуваат дека негативното сортирање ја одржува одржливоста на клетките и не влијае на маркерите за активирање како IL - 2R (CD25). Спротивно на тоа, позитивното сортирање може да ја намали одржливоста и капацитетот за активирање, особено по стимулацијата. Табелата подолу ги сумира овие наоди:

Овој метод е особено корисен кога ви требаат многу специфични популации на клетки за истражување или терапевтски апликации.

Апликации на човечки PBMC во истражување и медицина

Улога во развој на терапија со клетки на Т -клетки

Човечките PBMC играат клучна улога во унапредувањето на терапијата со CAR - Т -клетки, третман на важен третман за одредени карциноми. Овие клетки служат како почетен материјал за генерирање на CAR - Т -клетки, кои се дизајнирани да ги таргетираат и уништуваат клетките на ракот. Можеби се прашувате колку се ефикасни PBMC во овој процес. Студиите откриваат импресивни резултати:

• По 11 дена култура, замрзнатите PBMC од 1 × 10^7 можат да произведат најмалку 1,48 × 10^9 мезокар - Т -клетки, со над 30% CAR+ клетки.

• Тестовите за цитотоксичност покажуваат мезокар - Т -клетки добиени од свежи и криопрезервирани PBMCs, на сличен начин настапуваат. На ефектор - до - цел на сооднос од 4: 1, нивната цитотоксичност се движи помеѓу 91,02%- 100,00%и 95,46%- 98,07%, соодветно.

• Дури и со помал однос од 2: 1, не се забележува значителна разлика во цитотоксичноста.

Овие наоди ја потенцираат веродостојноста на PBMC при производство на ефективни CAR - T -клетки, дури и по долго складирање на терминот.

Употреба во студии за тестирање на лекови и токсичност

PBMC се непроценливи во студиите за тестирање на лекови и токсичност. Тие обезбедуваат човечки - релевантен модел за да проценат како лековите комуницираат со имуните клетки. На пример, истражувачите ја тестирале кинакринот на лекови на PBMC за да ја проценат неговата токсичност. Табелата подолу ги сумира наодите:

Овие резултати покажуваат дека PBMC реагираат активно на кинакрин, дури и на ниско ниво на токсичност. Ова ги прави сигурна алатка за предвидување на имунолошкиот одговор на нови лекови.

Откривање на биомаркер и мониторинг на имунитет

PBMC се од суштинско значење за идентификување на биомаркерите и следење на имунолошкото здравје. Биомаркерите се мерливи показатели за биолошки процеси или болести. Со анализа на PBMC, можете да откриете биомаркери кои откриваат имунолошка активност, прогресија на болеста или ефикасност на третманот. На пример, истражувачите честопати го мерат нивото на цитокин во PBMC за да ги следат имуните реакции за време на инфекции или терапии. Овој пристап им помага на прилагодените третмани кон индивидуалните пациенти, подобрувајќи ги резултатите.

PBMC, исто така, овозможуваат долго - термин имунолошки мониторинг. Нивната стабилност и прилагодливост ги прават идеални за следење на промените во имунолошката функција со текот на времето. Ова е особено корисно кај хронични заболувања или за време на продолжени третмани.

Човечките PBMC се неопходни во разбирањето и унапредувањето на имунологијата. Нивниот разновиден состав - лимфоцити, моноцити и дендритични клетки - им овозможува на нив да вршат критични имунолошки функции. Изолационите техники како што се преклопот на фиколот и имуномагнетното раздвојување обезбедуваат да добиете високи - чистота PBMC за истражување или терапевтска употреба.

Нивните апликации опфаќаат широк спектар на полиња:

• Илјадници студии користеле PBMC во клинички истражувања во текот на изминатите 50 години.

• Тие се од витално значење за терапија со клетки на автомобили, развој на лекови и анализа на имунолошкиот одговор.

• PBMC придонесуваат за откривање на биомаркер, стратификација на пациентите и истражување на ретки болести.

Со искористување на PBMC, можете да отклучите нови можности во имунологијата и да развивате иновативни третмани кои ја трансформираат здравствената заштита.

Најчесто поставувани прашања

За што се користат PBMC во медицинските истражувања?

PBMC им помагаат на истражувачите да проучуваат имунолошки реакции, да тестираат нови лекови и да развиваат терапии како третмани со CAR - Т -клетки. Нивната прилагодливост и стабилност ги прават идеални за експерименти кои бараат човечки имунолошки клетки.

Како ги чувате PBMC за идна употреба?

Можете да ги чувате PBMC со криопрезирање на нив во течен азот. Овој метод ја одржува нивната одржливост и функционалност со години, овозможувајќи ви да ги користите во долги - термински студии или терапевтски апликации.

Дали PBMCs се исти како и белите крвни клетки?

Не точно. PBMC се подмножество на бели крвни клетки кои вклучуваат лимфоцити, моноцити и дендритични клетки. Тие ги исклучуваат гранулоцитите како неутрофили, кои исто така се дел од белите крвни клетки.

Може ли PBMC да се користат за проучување на автоимуни заболувања?

Да! PBMC се вредни за проучување на автоимуни заболувања. Тие ви помагаат да го анализирате однесувањето на имуните клетки, производството на цитокини и генетските маркери, обезбедувајќи увид во механизмите на болести и потенцијалните третмани.

Дали PBMC изолацијата е комплициран процес?

Не навистина. Техниките како методот на преклопување на фиколот или имуномагнетното раздвојување ја прават PBMC изолацијата директна. Со соодветна обука и опрема, можете да постигнете високи примероци од чистота за вашето истражување.