ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് എലി ലിവർ എസ് 9 ഭിന്നസംഖ്യ: വിട്രോ ജനിതക ഡയറ്റോക്സിസിറ്റി, മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകളിൽ എന്നിവയിൽ ഒരു ഉപാപചയ സജീവമാക്കൽ സംവിധാനം

കീവേഡുകൾ: ഒഇസിഡി 471, ഒഇസിഡി 473, ഒഇസിഡി 476, ഒഇസിഡി 487, മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റ്, ജെനോടോക്സിസിറ്റി, ഐഎംഇഎസ് ടെസ്റ്റ്, മിനി അമേസ് ടെസ്റ്റ്, മൈക്രോക്ലോക്വൽ / എച്ച്ജിപിആർടി അസ്, ടി കെ അസ്സെ

ഐഫേസ് ഉൽപ്പന്നം

പരിചയപ്പെടുത്തല്

പ്രേരിത ശൈലി കരൾ എസ് 9വിലയിരുത്തുന്നതിൽ ഒരു പ്രധാന ഘടകമാണ്ജനിതക വിഷാംര്യംരാസവസ്തുക്കളുടെ സാധ്യത, പ്രത്യേകിച്ച് റെഗുലേറ്ററി ടോക്സിക്കോളജിയിൽ. ഇതുപോലെയുള്ള വിട്രോ അവറ്റുകളുമായി ഇത് സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നുഅമേസ് പരിശോധന കൂടെമ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകൾ, സംയുക്തങ്ങളുടെ മ്യൂട്ടജെനിക് ഗുണങ്ങൾ വിലയിരുത്തുന്നതിന്. സൈറ്റോക്രോം പി 450 ൽ സമ്പന്നമായ എൻസൈമാറ്റിക് സിസ്റ്റം നൽകുന്നതിലൂടെ, കരളിൽ സംഭവിക്കുന്ന ഉപാപചയ പ്രക്രിയകളെ അനുകരിച്ച്, രാസവസ്തുക്കൾ ജനിതക മ്യൂട്ടലുകൾക്കോ ​​ക്യാൻസറോ ഉണ്ടാകുമോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ പ്രേരിപ്പിക്കുന്ന പങ്ക്.

പ്രേരിത ശൈലി കരൾ എസ് 9

കരൾ എസ് 9 ഉപസംഹാരം ഒരു പോസ്റ്റിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു - ഒരു സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ ഘട്ടങ്ങൾക്ക് ശേഷം എലി കരൾ ഹോമോജെനേറ്റുകളിൽ നിന്ന് നേടിയ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ അമാനുഷികം. "പ്രേരിപ്പിച്ച" എന്ന പദം കരൾ എൻസൈമുകളുടെ പ്രവർത്തനം മെച്ചപ്പെടുത്തുന്ന പ്രത്യേക സംയുക്തങ്ങൾ, പ്രത്യേകിച്ച് സിനോക്രോം പി 450 എൻസൈമുകൾ (സിപ്ലോക്രോം പി 450 എൻസൈമുകൾ) എന്നിവയെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

പ്രചോദനമായ എലി കരൾ എസ് 9 ഭിന്നസംഖ്യയിൽ പലതരം എൻസൈമുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അത് രാസവസ്തുക്കളുടെ രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ ഏർപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന പലതരം എൻസൈമുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. സൈറ്റോക്രോം പി 450 മോണാക്സിനസുകൾ പോലുള്ള എൻസൈമുകൾ ഇതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു, ഇത്, അതിൽ കെ.ഇ.വൈ.എസ്.

CYP450 പ്രവർത്തനം, ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങൾ

സൈറ്റോക്രോം പി 450 എൻസൈം കുടുംബം (സിപ് 450) നിരവധി ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽസ്, പാരിസ്ഥിതിക രാസവസ്തുക്കൾ, അർബുദങ്ങൾ, അർബുദങ്ങൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെ വിവിധതരം വസ്തുക്കളുടെ ഉപാപചയത്തിൽ ഒരു പ്രധാന കഥാപാത്രത്തെ അവതരിപ്പിക്കുന്നു. പ്രസക്തമായ എലി കരൾ എസ് 9 ഭിന്നസംഖ്യയിൽ ഈ എൻസൈമുകൾ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്, ഇത് ഉപാപചയ പ്രവർത്തനത്തിന് ശേഷം ജനിതകമാകാത്ത രാസവസ്തുക്കൾ വിലയിരുത്തുന്നതിന് അത്യാവശ്യമാണ്.

പല സംയുക്തങ്ങളും തുടക്കത്തിൽ ഇതര രുചികരമാണ്, പക്ഷേ കരളിലെ മെറ്റബോളിസത്തിനുശേഷം വിഷലാകാൻ കഴിയും. ഈ പ്രോ - മ്യൂട്ടഗൻസ് (അത് മ്യൂതഗെനിക് ആകാൻ മെറ്റബോളിക് സജീവമാക്കൽ ആവശ്യപ്പെടുന്നു), ഒരു എസ് 9 മെറ്റബോളിക് ആക്റ്റിവേഷൻ സിസ്റ്റം ഉൾപ്പെടുന്ന മൃഗങ്ങളിലൂടെ മാത്രമേ അനുവദിക്കൂ. CYYP450 പോലുള്ള ഉപാപചയ of ർസൈമുകളുടെ ഇൻഡക്ഷൻ ഇല്ലാതെ, ഈ പദാർത്ഥങ്ങൾ സാധാരണ ജനിതാക്കളിൽ നിരുപദ്രവകരമാണെന്ന് തോന്നാം.

വിട്രോ അസീസിൽ ഇൻ എലി ലിവർ എസ് 9 ചേർക്കുന്നതിലൂടെ, സിപ് 450 എൻസൈമുകളുമായി ഒരു വസ്തു എങ്ങനെ തമ്മിൽ എങ്ങനെ സംവദിക്കുന്നുവെന്ന് ഗവേഷകർ വിലയിരുത്താൻ കഴിയും. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽസിന് ഇത് പ്രത്യേകിച്ചും പ്രധാനമാണ്, സിപ്മെ 450 എൻസൈമുകൾ മെറ്റബോളിസം എന്ന നിലയിൽ പല മരുന്നുകളുടെയും ഫാർമക്കോകിനറ്റിക്സിലിലെ നിർണായക ഘട്ടമാണ്.

ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് എലി കരൾ എസ് 9 ന്റെ ആപ്ലിക്കേഷനുകൾ

1. 1. അമേസ് ടെസ്റ്റ് (ഒഇസിഡി 471)

മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശത്ത് വിവരിച്ച അമേസ് പരിശോധനOcd 471, ഏറ്റവും നന്നായി - അറിഞ്ഞുകൊണ്ട് അറിയപ്പെടുന്നതും വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്നതുമായ രീതികൾ. ബാക്ടീരിയയെ ഒരു ഹിസ്റ്റിഡിനായി പഴയപടിയാക്കാൻ കാരണമാകുന്ന മ്യൂട്ടേഷനുകളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്ന ഒരു ടെസ്റ്റ് രാസവസ്തുവിലേക്ക് സാൽമൊണെല്ല ബാക്ടീരിയയുടെ സമ്മർദ്ദം ഇതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു - സ്വതന്ത്ര രാഷ്ട്രം.

മനുഷ്യന്റെ ഉപാപചയ പ്രക്രിയയെ അനുകരിക്കാൻ, ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് എലി ലിവർ എസ് 9 പലപ്പോഴും ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റത്തിൽ ചേർക്കുന്നു. സി.9 ഭിന്നസംഖ്യ സിപ് 450 ഉൾപ്പെടെ ആവശ്യമായ എൻസൈമുകൾ നൽകുന്നു, ഇത് ബാക്ടീരിയ ഡിഎൻഎയിൽ മ്യൂട്ടലുകൾക്ക് കാരണമായേക്കാവുന്ന കൂടുതൽ പ്രതിപ്രവർത്തന രൂപമാക്കി മാറ്റാം. എസ് 9 ന്റെ എസ് 9 ന്റെ ഈ കോമ്പിനേഷൻ നേരിട്ടുള്ളതും ഉപാപദാർത്ഥത്തിന്റെ സജീവവുമായ മ്യൂട്ടഗെനിക് സംവിധാനങ്ങൾ അനുകരിക്കാൻ മ്യൂട്ടഗോനിക്ക സാധ്യതകളെക്കുറിച്ച് കൂടുതൽ സമഗ്രമായ വിലയിരുത്തൽ അനുവദിക്കുന്നു.

2. 2.മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകൾ (ക്രോമസോമാൽ ടെസ്റ്റ്, മൈക്രോക്യുക്ലിയസ് ടെസ്റ്റ്, കൂടാതെ വിട്രോ അയേഴ്സ്)

അമേസ് ടെസ്റ്റിന് പുറമേ, രാസവസ്തുക്കളുടെ ജനിതക സാധ്യതകൾ വിലയിരുത്താൻ മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകൾ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. ക്രോമോസോമൽ മ്യൂട്ടലുകൾ, ജീൻ മ്യൂട്ടലുകൾ, മൈക്രോസുക്ലിയസ് രൂപീകരിക്കുന്നതിന് നിരവധി ജനിതക നാശനഷ്ടങ്ങൾ വിലയിരുത്തുന്നതിൽ ഈ പരിശോധനകൾ വളരെ സമഗ്രമാണ്. ഇനിപ്പറയുന്ന കാരണങ്ങളാൽ മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകളിൽ ഇൻഡന്റ്സ് ലിവർ എസ് 9 ഉപയോഗപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു:

മൈക്രോ ന്യൂക്ലിയസ് ടെസ്റ്റ് (ഒഇസിഡി 487)

സെൽ ഡിവിഷൻ സമയത്ത് ന്യൂക്ലിയസിൽ ഉൾപ്പെടുത്തിയിട്ടില്ലാത്ത ക്രോമസോമുകളുടെയോ മുഴുവൻ ക്രോമസോമുകളുടെയും ശകലങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന സെല്ലുകളിൽ മൈക്രോസുക്ലിയയുടെ രൂപവത്കരണത്തെ ഈ പരിശോധന കണ്ടെത്തുന്നു. ദി മൈക്രോ ന്യൂക്ലിയസ് ടെസ്റ്റ്ക്ലോജനിക് കണ്ടെത്താനാകും (ക്രോമസോം - ബ്രേക്കിംഗ്), അനീഗനിക് (ക്രോമസോം നമ്പർ ബാധിക്കുന്നു) ഇഫക്റ്റുകൾ. ചില രാസവസ്തുക്കൾ കരൾ എൻസൈമുകൾ മെറ്റബോളിസ് ചെയ്തുകഴിഞ്ഞാൽ ക്രോമസോം തകരാറിലാകുന്നതിനാൽ പരീക്ഷണ പദാർത്ഥം സജീവമായി നടത്താൻ പ്രേരിപ്പിച്ച എലി ലിവർ എസ് 9 ഇവിടെ ഉപയോഗിക്കുന്നു. വിവോയിൽ ഉണ്ടാകാനിടയുള്ള ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങൾ അനുകരിച്ച് എസ് 9 ഭിന്നസംഖ്യയുടെ സംവേദനക്ഷമത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു.

ക്രോമസോമാൽ ആബർറേഷൻ ടെസ്റ്റ് (ഒഇസിഡി 473)

ഇടവേളകൾ, ഇല്ലാതാക്കൽ, ആലോചിക്കൽ, മറ്റ് തരത്തിലുള്ള വ്യതിചലനം എന്നിവ ഏൽപ്പിച്ച് ഒരു പദാർത്ഥത്തിന് ക്രോമസോമുകൾക്ക് ഘടനാപരമായ നാശനഷ്ടമുണ്ടാക്കാൻ കഴിയുമോ എന്ന് വിലയിരുത്തുന്നു. മൈക്രോ ന്യൂക്ലിയസ് ടെസ്റ്റ് പോലെ,ക്രോമസോമാൽ നിസ്സഹകരണ പരിശോധനഉപാപചയ പ്രവർത്തനവ്യവസ്ഥയിലോ ഇല്ലാതെയോ പ്രയോഗിക്കാൻ കഴിയും. കരളിലെ ഉപാപചയ പ്രക്രിയകളെ അനുകരിക്കുന്നതിനായി പ്രസസ്തിയിലുള്ള എലി കരൾ എസ് 9 ൽ ചേർത്തു, ഇത് അവരുടെ യഥാർത്ഥ രൂപത്തിൽ ക്രോമസോം മെറ്റബോളിസത്തിന് കാരണമായെങ്കിലും അത് ചെയ്യാൻ കഴിഞ്ഞു.

പട്ടിക 1. മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകളുടെ താരതമ്യ പരിഗണന

HPRT / HGPRT ASEA (OECD 476)

... ൽHPRT / HGPRTSE, ചൈനീസ് എലിച്ചക്രം (ചോദിക്കുക ഒരു ഹ്രസ്വ ചികിത്സയ്ക്കും ഏഴ് ദിവസത്തെ പദപ്രയോഗം, സെല്ലുകൾ 6-തിയോഗ്വാനിൻ ഉപയോഗിച്ച് വെല്ലുവിളിക്കുന്നു; ഹൈപ്പോക്നീൻ-ഗ്വാനീൻ ഫോസ്ഫോറിബോസിൽ ട്രാൻട്രാൻസ്ഫെറൻസ് ജീനിലെ ക്ലോണുകൾ വഹിക്കുന്ന ക്ലോണുകൾ മാത്രം നിലനിൽക്കുന്നു. മ്യൂട്ടന്റ് കോളനി താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിലൂടെ മൊത്തത്തിലുള്ള പ്രവർത്തനക്ഷമതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഗവേഷകർ ഒരു മ്യൂട്ടേഷൻ ആവൃത്തി നിർണ്ണയിക്കുന്നു, ഇത് ഒരേതും ചരിത്രപരമായതുമായ നിയന്ത്രണങ്ങൾ പുനരുജ്ജീവിപ്പിക്കുന്നുവെങ്കിൽ, ജനിതകവും ചരിത്രപരവുമായ സാധ്യതകളെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

ടി കെ അസീസ് (ഒഇസിഡി 490 & 476)

ദിടി.കെ. ഒന്നുകിൽ l5178y മൗസ് ലിംഫോമ സെല്ലുകൾ (ഒഇസിഡി 490) അല്ലെങ്കിൽ ചോ സെല്ലുകൾ (Ocd 476) കാനിഡിൻകിൻ കൈനാസ് ലോക്കസിൽ എഞ്ചിനീയറിംഗ് ഹെറോസായിഗസ്. കെമിക്കൽ എക്സ്പോഷർ ± S9 മിക്സ്, സെല്ലുകൾ വീണ്ടെടുക്കുന്നു, ഒപ്പം ട്രിഫ്ലുറോത്തിമിഡിൻ അടങ്ങിയ മാധ്യമത്തിൽ പൂശുന്നു, അത് ടികെ-പ്രൊഫസിനേക്കാണ്. പോയിന്റ് മ്യൂട്ടേഷനുകളെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്ന ക്രോമസോമാൽ ഇവന്റുകളെയും വലിയ കോളനി മൃഗങ്ങളെയും പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്ന ചെറിയ ശേഖര പരാമർശങ്ങൾക്കൊപ്പം 10-14 ദിവസത്തിനിടെ അതിജീവിക്കുന്ന ടി കെ അറ്റൻറ് കോളനികൾ രൂപപ്പെടുന്നു. എച്ച്പിആർടി / എച്ച്ജിപിആർടി അസ്യിലെന്നപോലെ, കർശനമായ സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റി നിയന്ത്രണങ്ങളും പോസിറ്റീവ് മ്യൂഗർമാർക്കുകളും മ്യൂട്ടേഷൻ ആവൃത്തിയിൽ വർദ്ധനവ് നിരീക്ഷിച്ചുവെന്ന് ഉറപ്പാക്കുന്നു.

4. 4. കാൻസർ റിസ്ക് വിലയിരുത്തൽ

ക്യാൻസർ വിലയിരുത്തുന്നതിനുള്ള ലക്ഷ്യമിട്ട പഠനങ്ങളിൽ ഇൻഡീഷ്യസ് റേസ് ലിവർ എസ് 9 ഉപയോഗിക്കുന്നു - പദാർത്ഥങ്ങളുടെ സാധ്യതകൾ ഉണ്ടാക്കുന്നു. മനുഷ്യ കരളിൽ സംഭവിക്കുന്ന ഉപാപചയ പ്രക്രിയകളെ അനുകരിക്കാൻ എസ് 9 ഭിന്നസംഖ്യയെ തിരിച്ചറിയാൻ സഹായിക്കും, അത് ഡിഎൻഎയിലേക്ക് ബന്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിവുള്ള റിയാക്ടീവ് മെറ്റബോളിറ്റുകൾ രൂപപ്പെടുന്നതിനും ക്യാൻസറിന് കാരണമാകുന്ന മ്യൂട്ടേഷനുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നതിനും സഹായിക്കാനാകും.

ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് എലിംസ്റ്റർ കരൾ എസ് 9 ഉപയോഗിച്ച് മെച്ചപ്പെടുത്തിയ അമേസ് ടെസ്റ്റ്

യൂറോപ്യൻ മെഡിസിനുകൾ ഏജൻസി (ഇഎംഎ) നൽകുന്ന ഏറ്റവും പുതിയ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച്, നിശ്ചിത n ന്റെ മ്യൂട്ടഗെനിക് സാധ്യതകൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന് വേണ്ടത്ര സെൻസിറ്റീവ് ആയിരിക്കില്ല. അതിനാൽ, യുഎസ് ഡോളറിന്റെ ഭക്ഷ്യ, മയക്കുമരുന്ന് ഭരണം (എഫ്ഡിഎ) ഡിവിഷനുള്ള ദേശീയ കേന്ദ്രം (എൻസിടിആർ) വികസിപ്പിച്ചെടുത്ത മെച്ചപ്പെടുത്തിയ അമേസ് ടെസ്റ്റ് കൂടുതൽ വിശ്വസനീയമായ ബദലായി ശുപാർശ ചെയ്തിട്ടുണ്ട്. മെച്ചപ്പെടുത്തിയ അമേസ് ടെസ്റ്റ് അവതരിപ്പിച്ചു, ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് ഹാംസ്റ്റർ ലിവർ എസ് 9 ചേർന്ന് ചേർത്തു, ഇത് 30% എലി കരൾ എസ് 9, 30% ഹാംസ്റ്റർ ലിവർ എസ് 9 എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. സൈറ്റോക്രോം പി 450 എൻസൈം ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുന്ന എലിയിൽ നിന്നും എലിപ്പഴക്കൽ ഡെസ്മോസോമൽ സൂപ്പർ മേൻ മേൻ കാറ്റന്റുകളിൽ (എസ് 9) തയ്യാറാക്കണം - പദാർത്ഥങ്ങളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു. ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് എലിസ്റ്റർ ലിവർ എസ് 9 ഉപയോഗിക്കുന്നതിലൂടെ, ഈ മെച്ചപ്പെടുത്തിയ പരിശോധന മനുഷ്യന്റെ മെറ്റബോളിസത്തെ അനുകരിച്ച് ഫലങ്ങളുടെ വിശ്വാസ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു.

തീരുമാനം

പ്രചോദനമായ എലി കരൾ എസ് 9 ഡിബോട്ടോക്സിറ്റി പരിശോധനയിലെ ഒരു നിർണായക ഉപകരണമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു, മ്യൂട്ടജെനിക്, കെമിക്കൈനുകൾ വിലയിരുത്താൻ ഗവേഷകരെയും റെഗുലേറ്ററി ഏജൻസികളെയും സഹായിക്കുന്നു. ഒരു ഉപാപചയ സജീവമാക്കൽ സംവിധാനം നൽകുന്നതിലൂടെ, ജെനോടോക്സിക് ആകാൻ മെറ്റബോളിക് ആക്റ്റിവേഷൻ ആവശ്യമുള്ള പദാർത്ഥങ്ങൾ ആവശ്യമുള്ള ഇസീസ് ടെസ്റ്റ്, മ്യൂട്ടേഷൻ ടെസ്റ്റുകൾ, CYP450 ആക്റ്റിവിറ്റി സ്റ്റഡീസ് എന്നിവ അത് മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു. പുതിയ മരുന്നുകളുടെയും രാസവസ്തുക്കളുടെയും ഉപഭോക്തൃ ഉൽപന്നങ്ങളുടെയും സുരക്ഷ ഉറപ്പുവരുത്തേണ്ടതിന്റെ അപേക്ഷ ആവശ്യമാണ്. മനുഷ്യ കരൾ മെറ്റബോളിസം അനുകരിക്കുന്നതിൽ അതിന്റെ പങ്കുണ്ടായി, ഇൻഡൻറ് ടോക്സിക്കോളജി, റെഗുലേറ്ററി സേഫ്ലികളുടെ വിലയിരുത്തലുകളുടെ ഒഴിച്ചുകൂടാനാവാത്ത ഒരു ഭാഗമായി തുടരുന്നു.