പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ: വിട്രോ മയക്കുമരുന്ന് ഗവേഷണത്തിൽ ക്ലിനിക്കൽ ക്ലിനിക്കൽ ക്ലിനിക്കൽ മുന്നേറുന്നതിനുള്ള നിർണായക ഉപകരണം

പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ: വിട്രോ മയക്കുമരുന്ന് ഗവേഷണത്തിൽ ക്ലിനിക്കൽ ക്ലിനിക്കൽ ക്ലിനിക്കൽ മുന്നേറുന്നതിനുള്ള നിർണായക ഉപകരണം

മയക്കുമരുന്ന് എക്സ്പോഷറിനുള്ള പ്രാഥമിക അവയവമുള്ള കരൾ, മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങളിൽ നിർണായക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾക്ക് മെംബ്രൺ ഉൾപ്പെടെയുള്ള സെല്ലുലാർ സവിശേഷതകളും കോഫാക്ടറുകളും (മിശ്രോം പി 450 (മിനുസമാർന്ന പി 450 (മിനുസമാർന്ന പി 450 (മിനുസമാർന്ന എൻസൈസ് ഓക്സിഡേസ്), സൈറ്റോസോളിക് എസ്റ്റേരെസുകളും), സിറ്റോസോളിക് എസ്റ്റേജുകളായി), സിറ്റോസോളിക് എസ്റ്റേജസ് എന്നിവയും ഉണ്ട്. ഇക്കാരണത്താൽ, വിട്രോ കരൾ മോഡലുകളിൽ നിർമ്മിക്കുന്നതിനുള്ള സ്വർണ്ണ നിലവാരമായി പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ വ്യാപകമായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു, മയക്കുമരുന്ന് ഇടപെടൽ, മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങൾ, വിഷാംശം പഠനങ്ങൾ എന്നിവയുടെ അനുകൂലമാണ്. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള 2 ഡി, 3 ഡി കൾച്ചർ മോഡലുകളുടെ ഒരു അവലോകനം, മയക്കുമരുന്നിന്റെ വികസനത്തിലെ അപേക്ഷകൾ എന്നിവയുടെ ഒരു അവലോകനം ഈ ലേഖനം നൽകുന്നു.

കീവേഡുകൾ: പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ, 2 ഡി കൃഷി, 3D കൃഷി, ഓർഗനൈഡുകൾ, കോ - സംസ്കാരം.

1. 1. പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ ഒറ്റപ്പെടൽ

പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ ഒറ്റപ്പെടൽ, വിട്രോ കരൾ മോഡലുകൾ സ്ഥാപിക്കുന്നതിലെ ഒരു നിർണായക ഘട്ടമാണ്, രണ്ട് - ഘട്ടം കൊളാജനെസ് പെർഫ്യൂഷൻ രീതി ഏറ്റവും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നതാണ്. ചെറിയ മൃഗങ്ങളിൽ, പോർട്ടൽ സിര അല്ലെങ്കിൽ ഇൻഫീയർ വെന കാവ വഴി കരൾ പെർഫ്യൂഷൻ നടത്താം, അതേസമയം വലിയ മൃഗങ്ങൾക്ക് കരൾ ലോബുകൾ അല്ലെങ്കിൽ സെഗ്മെന്റുകളിലൂടെ ഡിഫ്യൂഷൻ ആവശ്യമാണ്. നിരവധി കീ ഘടകങ്ങൾ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ വിജയകരമായ ഒറ്റപ്പെടലിനെ സ്വാധീനിക്കുന്നു: ആദ്യം, കോളസെനെസ് അതല്ല, സൈറ്റോടോക്സിക് ആയിരിക്കണം. രണ്ടാമതായി, ദഹന സമയം നിർണായകമാണ്-രണ്ട് കീഴിലും - ദഹനവും മുകളിലും - ദഹനം ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് വിളവും പ്രവർത്തനക്ഷമതയും വിട്ടുകൊടുക്കാം. മൂന്നാമതായി, കരൾ അവസ്ഥ ഒപ്റ്റിമൽ ആയിരിക്കണം, കാരണം ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ ഇസ്കെമിക് കേടുപാടുകളോട് വളരെയധികം സെൻസിറ്റീവ് ആണ്. ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് തയ്യാറെടുപ്പിനായി ഉപയോഗിക്കുന്ന കരൾ അതിവേഗം തണുപ്പിക്കുകയും മെറ്റബോളിക് ഹൈപ്പോക്സിയയെയും തുടർന്നുള്ള ഇസ്കെമിയയെയും തടയുകയും വേണം.

മയക്കുമരുന്ന് ഗവേഷണത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ മാനദണ്ഡങ്ങൾ ഇനിപ്പറയുന്നവയാണ്:

1. 2. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് 2 ഡി സംസ്കാരം

സസ്പെൻഷൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് മോഡൽ

അതിൽ പൂർണ്ണമായ മയക്കുമരുന്ന് അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു - എൻസൈമുകളും കോഫറ്ററുകളും മെറ്റബോളിസിംഗ് ചെയ്യുക, ഇത് വിവിധ ഉപാപചയ ക്ലിയറൻസ് പാതകൾ പഠിക്കാൻ അനുയോജ്യമാക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, സസ്പെൻഷൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെയും മരുന്നിന്റെയും പ്രവർത്തനത്തിന്റെ പ്രവർത്തനക്ഷമത - വിട്രോ ഇൻകുബേഷൻ സമയത്തിന്റെ സമയം വർദ്ധിക്കുന്നതിനാൽ ക്രമേണ കുറയുന്നു, ഇൻകുബേഷൻ സമയം പരമാവധി 4 മണിക്കൂറിലേക്ക് പരിമിതപ്പെടുത്തുന്നു. മിതമായ മുതൽ ഉയർന്ന ക്ലിയറൻസ് നിരക്കുകളുള്ള മരുന്നുകളുടെ ക്ലിയറൻസ് കണക്കാക്കാൻ ഈ മോഡൽ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. ക്ലിയറൻസ് നിരക്ക് 20% ൽ താഴെയുള്ളപ്പോൾ, കൃത്യമായ ക്ലിയറൻസ് മൂല്യങ്ങൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ കഴിയില്ല. പരമ്പരാഗത സസ്പെൻഷൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് - വിട്രോ മെറ്റബോളിസം മോഡലുകൾ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളത് മന്ദഗതിയിലുള്ള മെറ്റബോളിസം മോഡലുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നതിന് പര്യാപ്തമല്ല, അങ്ങനെ ഈ സംയുക്തങ്ങളുടെ ക്ലിയറൻസ് നിരക്കുകളും ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങളും പ്രവചിക്കാനുള്ള കഴിവ് പരിമിതപ്പെടുത്തുന്നു. ഇൻകുബേഷൻ സമയം 20 മണിക്കൂറോ അതിൽ കൂടുതൽ നീട്ടാൻ ഒരു സസ്പെൻഷൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് റിലേ രീതി (ചിത്രം 1) ഉപയോഗിക്കാം.

അപ്ലിക്കേഷൻ:ചെറിയ തന്മാത്ര മരുന്നുകൾക്ക് എൻസൈം പ്രവർത്തനവും മെറ്റബോളിക് സ്ഥിരത പഠനങ്ങളും.

ചിത്രം 1. സസ്പെൻഷൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് റിലേ വർക്വേ റിലേഷൻ പ്രക്രിയ

ഉറവിടം: മയക്കുമരുന്ന് മെറ്റാബ് ഡിസ്പോസ്, 2012,40 (9): 1860-1865

പ്ലാറ്റ് ചെയ്യാവുന്ന ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ മോഡൽ

കൊളാജനിൽ 2 ഡി സിസ്റ്റത്തിൽ പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ സംസ്ക്കരിക്കുന്നു - പൂശിയ ഗ്രാസ് പ്ലേറ്റുകൾ. സൂചിപ്പിച്ച് എൻഐപിത്തീലിയൽ റിമൈലിസ് എപ്പിത്തീലിയസ് പ്രകോപിംഗ് എക്സിബിറ്റ് ചെയ്യുന്നു, പലപ്പോഴും ന്യൂക്ലിയേറ്റ് ഫോമിൽ അവതരിപ്പിക്കുന്നു. സിംഗിൾ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് മോണോളയർ സംസ്കാരത്തിന്റെ പോരായ്മകളിൽ ഇവ ഉൾപ്പെടുന്നു: 1. സെൽ പോളാരിറ്റിയുടെയും ഫംഗ്ഷന്റെയും മാറ്റം 2. സാധാരണ ഫംഗ്ഷന് ആവശ്യമായ മറ്റ് പ്രസക്തമായ സെൽ തരങ്ങളുടെ അഭാവം (I.E., നോൺഡേറ്റ് സെല്ലുകൾ) .3 .3. അവയുടെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ നിർവ്വഹിക്കുന്നതിന് മതിയായ പോഷകങ്ങളും പാരക്രീനി ഘടകങ്ങളും നൽകാനുള്ള കഴിവില്ലായ്മ (ബില്ലോ ആസിഡ്, സെറം പ്രോട്ടീൻ ബയോസിന്തസിസ് പോലുള്ളവ).

അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

1). മരുന്നിന്റെ വിലയിരുത്തൽ - മയക്കുമരുന്ന് ഇടപെടലുകൾ:ഇതിൽ എൻസൈം ഇൻഡക്ഷൻ, എൻസൈം ഗർഭധാരണം, ട്രാൻസ്പോർട്ടർ പഠനങ്ങൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. ഒന്നാമതായി, ഒരു മരുന്ന് ഒരു മരുന്ന് പ്രവർത്തിക്കുമ്പോൾ, മയക്കുമരുന്ന് ആവിഷ്കാരപ്രകടനത്തിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം - എൻസൈമുകളെയും ഗതാഗതക്കാരെയും മെറ്റബോളിസിംഗ് ചെയ്യുന്നു. CYP2B6, CYP3A4, CYP3A4, CYP2C9, UGT, MRP2 പോലുള്ള നിരവധി ഗതാഗത പ്രോട്ടീൻ എന്നിവ പോലുള്ള ശക്തമായ ഇൻഡ്യൂസറുകൾക്ക് ഒരേസമയം ഒന്നിലവർഗൽ ജീനുകൾ നേതൃത്വം നേടാൻ കഴിയും. രണ്ടാമതായി, ജീവിവർഗങ്ങൾ ഉണ്ട് - ഉദാഹരണത്തിന്, റൈഫാംപിസിൻ മനുഷ്യന്റെയും മുയലിന്റെയും ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾക്കുള്ള ഫലപ്രദമായ ഉറ്റമാണ്, പക്ഷേ എലി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളിൽ ഇൻഡക്ഷൻ ഫലമില്ല. അവസാനമായി, പ്ലാറ്റ് ചെയ്യാവുന്ന ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ ഉപശീർഷ പ്ലേറ്റിറ്റി ഡെൻസിറ്റി പി 450 കളിലെ അടിസ്ഥാന ആവിഷ്കാരത്തെ കുറയ്ക്കുകയും ഇൻഡക്ഷൻ പ്രതികരണങ്ങൾ കൃത്രിമമായി വർദ്ധിക്കുകയും ചെയ്യും. ചിത്രം 3 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, കുറഞ്ഞ പ്ലേറ്റിംഗ് ഡെൻസിറ്റിയിലെ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ CYP1A2, CYYP2B6, CYP3A4 എന്നിവ കാണിക്കുന്നു, പക്ഷേ ശക്തമായ ഇൻഡക്ഷൻ പ്രതികരണങ്ങൾ. അതിനാൽ, ഫിസിയോളജിക്കൽ പ്രസക്തമായ ഡാറ്റ നേടുന്നതിന് ഉചിതമായ ഒരു പ്ലേറ്റിംഗ് ഡെൻസിറ്റിയിൽ ആരോഗ്യകരമായ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ ആവശ്യമാണ്.

ചിത്രം 2. ക്രപ്രൊപ്രേഡ് ഹ്യൂമൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ പ്രക്ഷോഭ സാന്ദ്രതയും എൻസൈം ഇൻഡക്ഷന്റെയും പ്ലേറ്റിംഗ് ഡെൻസിറ്റി തമ്മിലുള്ള ബന്ധം

ഉറവിടം: നിലവിലെ മയക്കുമരുന്ന് കണ്ടെത്തൽ സാങ്കേതികവിദ്യകൾ, 2010, 7: 188 - 198

2). ഹെപ്പറ്റോടോക്സിസിറ്റി വിലയിരുത്തൽ: സെൽ മോർഫോളജി, ശൂന്യത, ലിപിഡ് ഡ്രോപ്പ് അഗ്രഗേഷൻ, സെൽ അറ്റാച്ചുമെന്റ് / ഡിറ്റാച്ച്മെന്റ് എന്നിവ പോലുള്ള ഒരു ലൈറ്റ് മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിലുള്ളാർഗണർസം വരുമാനം. ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് നെക്രോസിസ് കണ്ടെത്തുന്നത് (അസ്പാർട്ടേറ്റ് അമിനട്രോജെനെസ്, ലാക്റ്റേറ്റ് ഡെഹൈഡ്രോജെനെയ്സ്, അലനിൻ അമിനട്രോൺ റൂട്ട്ഫെറേസ്), അങ്കനൈൻ അമിനട്രോൺസ്ഫറസ്), അങ്കനൈൻ അമിനട്രോസിസ്ഫെറസ്). സൈറ്റോക്കിൻ -

3). മന്ദഗതിയിലുള്ള ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങളും അതിന്റെ മെറ്റബോളിറ്റുകളും സ്ലോ മെറ്റബോളിസിംഗ് പഠിക്കുന്നതിനായി "റിലേ രീതി": മരുന്നിന്റെ പ്രവർത്തനം - പ്ലാറ്റ് ചെയ്യാവുന്ന ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളിൽ എൻസൈമുകൾ സ്മാനാബോൾ ചെയ്യുന്നത് 24 മണിക്കൂർ പ്ലേറ്റ് ചെയ്തതിനുശേഷം കുറയാൻ തുടങ്ങും. സെറം ഉപയോഗിച്ച് പ്ലാറ്റാക്കാവുന്ന ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തതിനുശേഷം - 24 മണിക്കൂർ പലിശ സംയുക്തത്തിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന സ്വതന്ത്ര മാധ്യമം, മീഡിയം ശേഖരിക്കുകയും മിശ്രിതപ്പെടുകയും കൂടുതൽ പഠനത്തിനായി പുതിയ പ്ലാറ്റബിൾ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളിലേക്ക് മാറ്റുന്നു (ചിത്രം 3).

ചിത്രം 3. പ്ലാറ്റ് ചെയ്യാവുന്ന ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് റിലേ വർക്വേമെന്റ് പ്രക്രിയ

ഉറവിടം: മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയം കത്തുകൾ, 2016, 10: 3 - 15

3). സെല്ലുലാർ ഓവർകേൽ, എൻഡോസൈറ്റോസിസ്, എൻഡോസൊമൽ എസ്കേപ്പ്, ഹെപ്പറ്റോസൈടെയുടെ ടാർഗെറ്റ് ജീനിലെ നിശബ്ദത എന്നിവ വിലയിരുത്തുക - ചെറിയ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് മരുന്നുകൾ ടാർഗെറ്റുചെയ്തു.

സാൻഡ്വിച്ച് കൃഷി മോഡൽ

സാൻഡ്വിച്ച് കൃഷി എന്നറിയപ്പെടുന്ന വിവോ ഘടനയിൽ പുനർനിർമ്മിക്കാൻ കൊളാജൻ അല്ലെങ്കിൽ മാട്രിഗലിന്റെ രണ്ട് പാളികൾക്കിടയിൽ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ സംസ്ക്കരിക്കാനാകും. ജെല്ലിന്റെ രണ്ട് പാളികൾക്കിടയിൽ സംസ്ക്കരിച്ച ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ - കൊളാജൻ (സാൻഡ്വിച്ച് ഘടന) സെല്ലുകളുടെ ഓർമ്മയോളജിയും പ്രവർത്തനക്ഷമതയും മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും അവരുടെ പ്രവർത്തനം കൂടുതൽ കാലം നിലനിർത്തുകയും ചെയ്യും. കൂടാതെ, സാൻഡ്വിച്ച് സംസ്കാരത്തിലെ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾക്ക് ധ്രുവീകരണം പുന restore സ്ഥാപിക്കാൻ കഴിയും, ബാസോസലേഷൽ, കനാലിക് ട്രാൻസ്പോർട്ട്മാർക്ക് പ്രാദേശികവൽക്കരണം, അതുപോലെ തന്നെ ഫംഗ്ഷണൽ പിത്തരപത്രമായ നെറ്റ്വർക്കുകളുടെ രൂപീകരണവും (ചിത്രം 4).

ചിത്രം 4. ഹ്യൂമൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് സാൻഡ്വിച്ച് മോഡലിലെ പോളാറഡ് ട്രാൻസ്പോർട്ട് ഓഫ് ഹോപ്രഷൻ

ഉറവിടം: നിലവിലെ മയക്കുമരുന്ന് കണ്ടെത്തൽ സാങ്കേതികവിദ്യകൾ, 2010, 7, 188 - 198

അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

1. 1). സംയുക്തങ്ങളുടെ ബിലിയറി വിസർജ്ജനം കണക്കാക്കുന്നു.
2. 2). എൻഡോജെനസ്, എക്സോജെനസ് സംയുക്തങ്ങളുടെയും മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെയും ഷൗക്കത്തലിയും ബിലിയറി വിതരണവും വിലയിരുത്തുന്നു.
3. 3). മെറ്റബോളിസവും ഗതാഗതക്കാരും ഉപയോഗിച്ച് വ്യക്തമാക്കുന്ന ക്ലിയറൻസ്, ഫിസിയോളജി നിർമിക്കുന്നത് - അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഫാർമക്കോക്കിനെറ്റിക് മോഡലുകൾ.
4. 4). ഹെപ്പറ്റോടോക്സിസിറ്റി പഠിക്കുകയും ക്ലിനിക്കൽ മരുന്നിനായുള്ള സംവിധാനങ്ങൾ നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു - കരൾ പരിക്ക് സൂചിപ്പിക്കുന്നത്. മയക്കുമരുന്ന് പ്രവചിക്കാൻ ഡാറ്റംസ് ഫാർമക്കോളജി മോഡലുകളായി ഡാറ്റ സംയോജിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു - മനുഷ്യരിൽ കരൾ പരിക്ക്.
5.  
   1. 3. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് 3 ഡി സംസ്കാരം

6. 3 ഡി കൾച്ചർ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ, ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ മൂന്ന് - ഡൈമൻഷണൽ മാട്രിക്സിൽ സംസ്ക്കരിക്കുന്നു, ഇത് 2 ഡി മോണോളയർ സംസ്കാരങ്ങളെ അപേക്ഷിച്ച് വിവോ ലൈവർ ആർക്കിടെക്ചറിനെ മികച്ച പ്രകടമാക്കുന്നു. ഈ സംവിധാനങ്ങൾ സെൽ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു - സെല്ലും സെല്ലിലും - മാട്രിക്സ് ഇടപെടലുകൾ, മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങൾ, പ്രോട്ടീൻ സ്രവേഷൻ, പിത്തരസം. പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് 3 ഡി സംസ്കാരങ്ങൾ ടു കൾച്ചർ ഉപയോഗിക്കാം - വിവോയിലെ നിർദ്ദിഷ്ട പ്രവർത്തനങ്ങൾ - പരിസ്ഥിതി പോലെ, മയക്കുമരുന്ന് പരിശോധന, വിഷ പരിശോധന, വിഷ പരിശോധന, വിഷമയം വിലയിരുത്തൽ, രോഗം മോഡലിംഗ് എന്നിവയ്ക്ക് ഗുണങ്ങൾ വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു.

   സ്ഫോറിയോഡ് മോഡൽ

അൾട്രാ - കുറഞ്ഞ അറ്റാച്ചുമെന്റ് സംസ്കാരം, തൂക്കിക്കൊല്ലൽ ഡ്രോപ്പ് സംസ്കാരം, മാഗ്നറ്റിക് സെൽ സംസ്കാരം (ചിത്രം 5), പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ, ബാഹ്യ മെട്രിക്സ് എന്നിവയിൽ വ്യാസമുള്ള സ്ഫെറോയിഡൽ അഗ്രഗീറ്റുകൾക്ക് 60 - 175 μm- ൽ വ്യാസമുള്ളതാണ്. സ്ഫെറോയ്ഡ് സംസ്കാരത്തിന്റെ ഒരു നേട്ടം ഓരോ സ്ഫെറോയിനും 1,330 - മാത്രം ആവശ്യമാണെന്നതാണ്, മറ്റ് 3D സംസ്ക്കരണ സാങ്കേതികതകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം ഗണ്യമായി കുറയ്ക്കുന്നു. പ്രാഥമിക ഹെപാറ്റോസൈറ്റ് സോറിയോയിഡ് സംസ്കാരങ്ങൾ 5 ആഴ്ച വരെ നിലനിർത്താൻ കഴിയുമെന്ന് സമീപകാല പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. എന്നിരുന്നാലും, കരൾ ഒരു സെല്ലിനേക്കാൾ സങ്കീർണ്ണമാണ്. ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ ബാസോസലേറ്റൽ വശം രക്തവുമായി സംവദിക്കുമ്പോൾ, മുപ്പതുകളിൽ നിന്ന് പുറത്തേക്ക് ഒഴുകുന്നു, ഇത് സങ്കീർണ്ണമായ കരൾ ലോബുൾ ഘടനയുടെ പ്രധാന സവിശേഷതയാണ്, ഇത് ഇതുവരെ സ്ഫെറോയിഡ് മോഡലിൽ ആവർത്തിക്കാൻ കഴിയില്ല.

അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

1. 1). സ്ലോ മെറ്റബോൾ ക്ലിയറൻസും അതിന്റെ മെറ്റബോളിറ്റുകളും സ്ലോ മെറ്റബോളിസിംഗ് പഠിക്കുക.
2. 2). ഹെപ്പറ്റോടോക്സിസിറ്റി റിസർച്ച്.
3. 3). സെല്ലുലാർ വേലയൂശം, എൻഡോസൈറ്റോസിസ്, എൻഡോസൊമൽ എസ്കേപ്പ്, ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റിലെ ടാർഗെറ്റ് ജെൻഡീസിലെ നിശബ്ദത എന്നിവയുടെ വിലയിരുത്തൽ - ചെറിയ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് മരുന്നുകൾ ടാർഗെറ്റുചെയ്തു.

ചിത്രം 5. സ്പാരോയ്ഡ് സംസ്കാരം രീതി

കരൾ ഓർവോയിഡുകൾ മോഡൽ

ഓർഗനൈവുകളുടെ സമവായ നിർവചനം: സ്റ്റെം സെല്ലുകൾ, പ്രോജെനിറ്റർ സെല്ലുകൾ അല്ലെങ്കിൽ വേർതിരിച്ച സെല്ലുകൾ എന്നിവയിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ 3D ഘടനകൾ, വിട്രോയിലെ നേറ്റീവ് ടിഷ്യുവിന്റെ ചില ഫംഗ്ഷനുകൾ, ഘടകങ്ങൾ എന്നിവ പുനർനിർമ്മിക്കാൻ കഴിവുണ്ട്, ഇത് വിട്രോ മൈക്രോൻവിട്രോണിന്റെയും ഘടനയും പുനർനിർമ്മിക്കാവുന്നതാണ്, ഇത് Vie മൈക്രോയിൻവിട്രോണിന്റെയും ഘടനയും പുനർനിർമ്മിച്ച്, - സെൽ ഇടപെടലുകൾ. മനുഷ്യ കരൾ ബയോളജി ഗവേഷണത്തിനുള്ള ഏറ്റവും നൂതന മോഡലാണെന്ന് കരൾ നാറോട്രോയിഡുകൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞിട്ടുണ്ട്.

കരൾ ഓർവോയിഡ് നിർമ്മാണത്തിനുള്ള സെൽ ഉറവിടങ്ങൾ:

① പ്ലൂറിബോട്ടന്റ് സ്റ്റെം സെല്ലുകൾ (പിഎസ്സി):

ഭ്രൂണ സ്റ്റെം സെല്ലുകൾ (ESCS), ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് പ്ലൗറിബോട്ടന്റ് സ്റ്റെം സെല്ലുകൾ (ഐപിഎസ്സി) ഉയർന്ന പ്യൂറിപ്പൻസി, പ്ലാസ്റ്റിക്ക്, പരിധിയില്ലാത്ത വൻതോതിൽ ശേഷിക്കുന്നു. നിർദ്ദിഷ്ട സിഗ്നലിംഗ് ഘടകങ്ങളുടെ സ്വാധീനത്തിൽ, അവ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റിലേക്ക് തിരിച്ചുവിടുന്നു - പ്രവർത്തനവും പ്രവർത്തനവും ഉള്ള സെല്ലുകൾ പോലെ. എന്നിരുന്നാലും, പിഎസ്സികളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ കരൾ ഓർഗനൈഡുകൾക്ക് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ സമയത്ത് ക്രോമസോമാൽ അനിയുപ്ലോയിഡിയിൽ പ്രദർശിപ്പിക്കും.

അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

1. 1). ജനിതക കരൾ രോഗ മോഡലുകൾ
2. 2). പകർച്ചവ്യാധി കരൾ രോഗ മോഡലുകൾ
3. 3). മയക്കുമരുന്ന് സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റി പരിശോധന

② കരൾ ടിഷ്യു - ഉരുത്തിരിഞ്ഞ സെല്ലുകൾ: ഇതിൽ ചോളാംഗൈയോസൈറ്റുകൾ, ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. പക്വതയുള്ള ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ പ്രത്യേക പരിതസ്ഥിതികളിൽ സ്റ്റെം സെൽ സാധ്യതയും വ്യാപകമായ കഴിവും നിലനിർത്തുന്നു. പിഎസ്സിയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, പ്രാഥമിക ടിഷ്യുവിൽ നിന്ന് ലഭിച്ച നാവോരുക്കങ്ങൾ കൂടുതൽ പക്വതയുള്ളവരാണ്, കൂടുതൽ സ്ഥിരതയുള്ള ജീനോമുകൾ, ഒപ്പം ഫിനോട്ടിപ്പിക്, ജനിതക സ്ഥിരത നിലനിർത്തുക എന്നിവയാണ്. എന്നിരുന്നാലും, നീളമുള്ള - പക്വതയുള്ള മനുഷ്യന്റെ ദൈർഘ്യമേറിയ താൽക്കാലിക ശേഷി ഗര്ഭപിണ്ഡത്തിന്റെ ഹ്യൂമൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ അല്ലെങ്കിൽ മുതിർന്ന മ mouse സ് പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ എന്നിവയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു. കൾച്ചർ മുതിർന്നവർക്കുള്ള ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് ഓർഗനൈറ്റുകൾ വെല്ലുവിളിയായി തുടരുന്നു.

സംസ്കാര രീതി (ചിത്രം 6): കരൾ ടിഷ്യു ഒരൊറ്റ സെല്ലുകളിലേക്ക് ആഗിരണം ചെയ്യുന്നു, മാട്രിഗലിന്റെയും സെല്ലുകളുടെയും മിശ്രിതം ഒരു 24 ൽ വിത്തുണ്ട് - ആകൃതിയിലുള്ള ഘടനകൾ. ഒരു സെൽ കൾച്ചർ ഇൻകുബേറ്ററിൽ (37 ° C) 15 മിനിറ്റ് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുക. ദൃ sol നിശ്ചയത്തിനുശേഷം, നിർദ്ദിഷ്ട സംസ്കാര മാധ്യമം ചേർക്കുക. ഏകദേശം 14 ദിവസത്തിനുശേഷം കടന്നുപോകുന്നു. യഥാർത്ഥ മാധ്യമം 7 - 10 ദിവസത്തിനുശേഷം വ്യത്യാസപ്പെടുത്തൽ മാധ്യമം ഉപയോഗിച്ച് മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുക.

അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

1. 1). ഹെപ്പറ്റോടോക്സിസിറ്റി മോഡലുകൾ
2. 2). വിട്രോ മെറ്റബോളിസം ഡിസോർഡർ പഠനങ്ങളിൽ
3. 3). ഇതര ഫാറ്റി കരൾ രോഗം
4. 4). മാരകമായ കരൾ രോഗങ്ങൾക്കും മയക്കുമരുന്ന് വികസനം

ചിത്രം 6. ടിഷ്യുവിന്റെ സംസ്കാരവും പാസേജോ പ്രക്രിയ - കരൾ ഓർഗനൈഡുകൾ ഉരുത്തിരിഞ്ഞതാണ്

ഉറവിടം: സെൽ & ബയോസ്നസ് (2023) 13: 197

സ്ഫെറോയ്ഡ് സംസ്കാരത്തിന്റെയും ഓർവോയ്ഡി സംസ്കാരത്തിന്റെയും താരതമ്യം

4. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് കോ - കൾച്ചർ മോഡൽ

1. 1. 2 ഡി പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് കോ - കൾച്ചർ മോഡൽ
      

      2 ഡി പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് കോ - കൾച്ചർ മോഡൽ, രണ്ടോ അതിലധികമോ വ്യത്യസ്ത സെൽ തരങ്ങൾ രണ്ട് - ഡൈമൻഷണൽ പരിതസ്ഥിതിയിൽ കലർത്തി സംസ്ക്കരിക്കുന്നു. വ്യത്യസ്ത സെൽ തരങ്ങളും സെല്ലുകളും എക്സ്ട്രാസെല്ലുലാർ മാട്രിക്സും സൈറ്റോക്കിനുകൾ, കെമിക്കൽ കമ്മ്യൂണിക്കേഷൻസ് എന്നിവ തമ്മിലുള്ള നേരിട്ടുള്ള ഇടപെടലാണ് ഈ മോഡലിന്റെ പ്രധാന ഇടപെടൽ. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് ഫംഗ്ഷനുകൾ, ആൽബുമിൻ ഉൽപാദനവും മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങളും മൂന്ന് ആഴ്ച വരെ നിലനിർത്താൻ കഴിയും.

      അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

      1. 1). പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ കോ - ഫൈബ്രോബ്രുക്കളുമായി സംസ്ക്കരിക്കുന്നു: ഈ മോഡൽ സ്ലോ റൺസ് പഠിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു - മെറ്റബോളിംഗ് സംയുക്തങ്ങളും അവയുടെ മെറ്റബോളിറ്റുകളും പഠിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.
      2. 2). പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ കോ - പാരഞ്ചൈമൽ കരൾ സെല്ലുകൾ ഉപയോഗിച്ച് സംസ്ക്കരിച്ചത് (ഉദാ.
      3. 3). പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ കോ - ടി സെല്ലുകളുള്ള സംസ്കരിച്ചത്: കരൾ മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഈ മോഡൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു - നിർദ്ദിഷ്ട ടി സെൽ പ്രതികരണങ്ങൾ.
      4. 4). ഐഫെസിന്റെ ഹെപ്പറ്റോമാക്സ്കോ - കൾച്ചർ സിസ്റ്റം: ഐഫേസ് ഒരു കോ - ഹെപ്പറ്റോമാക്സ് എന്നറിയപ്പെടുന്ന വിവിധ ഇനങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾക്കൊപ്പം കൾച്ചർ സിസ്റ്റം വികസിപ്പിച്ചെടുത്തുഅതാത്തനമായത്. കോ - സ്ട്രോംഗ് സെല്ലുകളുള്ള ഹ്യൂമൻ പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നതിലൂടെ, നല്ല മരുന്ന് നിലനിർത്താൻ കഴിയും - 3 ആഴ്ച വരെ മനുഷ്യന്റെ പ്രവർത്തനം എൻസൈം പ്രവർത്തനം സ്മാനിംഗ് ചെയ്യുന്നു. ഈ സിസ്റ്റം മന്ദഗതിയിലാക്കുന്നതിന് അനുയോജ്യമാണ് - സംയുക്ത ക്ലിയറൻസ് നിരക്കുകളും അവയുടെ മെറ്റബോളിറ്റുകളും മെറ്റബോളിസിംഗ് ചെയ്യുന്നു.

      ഈ കോ - മയക്കുമരുന്ന് മെറ്റബോളിസം, വിഷാംശം, വിഷാംശം എന്നിവ വിലയിരുത്തുന്നതിന് കൂടുതൽ ശാരീരികമായി പ്രസക്തമായ പ്ലാറ്റ്ഫോം - അനുബന്ധ രോഗപ്രതികരണ പ്രോസസ്സ്, വ്യത്യസ്ത സെൽ തരങ്ങൾ കരൾ പ്രവർത്തനത്തിനും രോഗത്തിനും കാരണമാകുന്നു എന്നതിലേക്ക്.
      
      

      3D പ്രൈമറി ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് കോ - കൾച്ചർ മോഡൽ

      ഡയറക്ട് 3 ഡി കോ - സംസ്കാരം: ഈ മോഡലിൽ രണ്ടോ അതിലധികമോ ലൈവർ സെല്ലുകൾ കലർത്തുന്നു (ഉദാ. പ്രഥ്യ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ, ശിലോയിഡൽ സ്റ്റെല്ലാറ്റ് സെല്ലുകൾ, കുപ്സിറ്റിക് സ്റ്റെല്ലേറ്റ് കോശങ്ങൾ) ഡയറക്റ്റ് 3 ഡി കോ - സെൽ പോലുള്ള സംവിധാനങ്ങളിലൂടെ വ്യത്യസ്ത കരൾ കോശങ്ങൾ തമ്മിലുള്ള ആശയവിനിമയം, ലയിക്കുന്ന സൈറ്റോകൈനുകൾ വഴിയുള്ള വ്യത്യസ്ത ഇടപെടൽ, എക്സ്ട്രാസെല്ലുലാർ മാട്രിക്സ് അഡെഷൻ,

      അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:

      1. 1). കരൾ ഫൈബ്രോസിസ് മോഡൽ: കരൾ ഫൈബ്രോസിസിന്റെ സംവിധാനങ്ങളും പുരോഗതിയും പഠിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.
      2. 2). മയക്കുമരുന്ന് - ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് കരൾ പരിക്ക് (ഡിലി) മോഡൽ: മയക്കുമരുന്ന് മൂലമുണ്ടാകുന്ന കരൾ തകരാറുണ്ടാക്കുകയും വിലയിരുത്തുകയും ചെയ്യുന്നു.
      3. 3). മയക്കുമരുന്ന് ഇടപെടലുകൾ, മയക്കുമരുന്ന് ഉപാപചയം, എൻസൈം ഇൻഡക്ഷൻ: വ്യത്യസ്ത മരുന്നുകൾ എങ്ങനെ ബാധിക്കുന്നുവെന്നത് വിലയിരുത്തുന്നു, അവ എങ്ങനെ മെറ്റബോളിസ് ചെയ്യുന്നു, അവർ ലിവർ എൻസൈമുകൾ എങ്ങനെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു.

      പരോക്ഷ 3 ഡി കോ - സംസ്കാരം: രണ്ടോ അതിലധികമോ കോശങ്ങൾ (എൻഐഎച്ച് / 3 ടി 3 സെല്ലുകൾ അല്ലെങ്കിൽ സൈനുസോയിഡൽ സെല്ലുകൾ) സംസ്കാരം നടത്താൻ ഈ രീതി ഒരു ഫിസിക്കൽ വേർതിരിക്കൽ സംവിധാനം (ഉദാ. ലയിക്കുന്ന സൈറ്റോകൈൻസ് വഴി സെല്ലുകൾ തമ്മിലുള്ള ആശയവിനിമയം സംഭവിക്കുന്നു.

      അപ്ലിക്കേഷനുകൾ:
      ശരീരത്തിലെ കരൾ കോശങ്ങൾക്കിടയിൽ ആശയവിനിമയവുമായി ബന്ധപ്പെടാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

      
      സംഗ്രഹത്തിൽ, വിട്രോ ബയോളജിക്കൽ ഗവേഷണ ഗവേഷണ ഗവേഷണത്തിലെ ഒരു നേതാവെന്ന നിലയിൽ ഐഫേസ്, ക്ലിനിക്കൽ മയക്കുമരുന്ന് പരിശോധനയ്ക്ക് സമഗ്ര പരിഹാരങ്ങൾ നൽകുന്നു. പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെ ഒറ്റപ്പെടൽ മുതൽ നിർദ്ദിഷ്ട ആപ്ലിക്കേഷനുകൾ അല്ലെങ്കിൽ മൾട്ടികൾക്കായി സാംസ്കാരിക മാധ്യമങ്ങൾ എന്നിവയുടെ വികാസത്തിൽ നിന്ന് - സമന്വയിപ്പിച്ച പ്ലേറ്റുകൾ, മയക്കുമരുന്ന് കണ്ടെത്തലിനായി ഏറ്റവും മികച്ചത് വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നതിനായി ഐഫേസ് സമർപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വ്യവസായത്തിലെ ക്ലയന്റുകൾക്കായുള്ള വിശ്വസനീയമായ പങ്കാളിയാണ് ഞങ്ങൾ, കട്ടിംഗ് - ക്ലിനിക്കൽ ഗവേഷണത്തിനുള്ള എഡ്ജ് സൊല്യൂഷനുകൾ.