Hempedu manusia & haiwan matriks biologi kosong untuk pembangunan kaedah bioanalytical dan pengesahan kaedah bioanalytical

1 produk iphase

2 Biomatrix kosong

Pelbagai jenisMatriks biologi, termasuk darah kosong, serum, plasma, hempedu, susu, air kencing, najis, kandungan usus, organ pendengaran, humor vitreous, humor berair, cecair cerebrospinal, dan lain -lain, yang dikumpulkan dari subjek yang sihat atau haiwan eksperimen yang sihat, secara kolektif dirujuk sebagai matriks biologi kosong.

3 Keperluan menggunakan matriks biologi kosong dalam kajian pramatang

In Penyelidikan Pramatik Dadah, matriks biologi kosong adalah asas untuk menubuhkan dan mengesahkanKaedah analisis biologi. Dengan menggunakan matriks kosong dari subjek yang sihat atau haiwan eksperimen, para penyelidik dapat menyediakan standard penentukuran dan sampel kawalan kualiti dengan tepat, menilai kekhususan, kepekaan, ketepatan, dan kesan matriks kaedah analisis, dan memastikan kebolehpercayaan hasil kuantiti kepekatan dadah.

4 Pengesahan Kaedah Biologi dan Penubuhan dan Penggunaan Matriks Biologi Kosong

Seperti yang dikehendaki oleh garis panduan FDA/EMA, dalam penubuhan dan pengesahan kaedah analisis matriks biologi, matriks biologi kosong perlu digunakan untuk memastikan ketepatan dan kebolehpercayaan kaedah analisis. Terutama dalam analisis LC - MS/MS, perbezaan komponen matriks dari sumber yang berbeza boleh menjejaskan kecekapan pengionan. Matriks kosong digunakan terutamanya untuk menyediakan piawaian penentukuran, menyediakan sampel kawalan kualiti untuk mengkaji kekhususan, selektiviti, ketepatan, ketepatan, kesan matriks, kadar pemulihan, kestabilan, lineariti pencairan, kesan gangguan, dan lain -lain kaedah analisis. Kesan selektiviti dan matriks kaedah pengesanan memerlukan keperluan yang lebih tinggi untuk matriks kosong.

5 senario aplikasi matriks kosong hempedu dalam pembangunan dadah

Matriks hempedu buatan (Matriks hempedu simulasi)adalah penyelesaian sintetik yang mensimulasikan komponen hempedu semulajadi dan digunakan untuk metabolisme dadah, toksikologi, dan penyelidikan analisis biologi.Matriks kosongMempunyai nilai aplikasi yang penting dalam senario pembangunan ubat berikut: kajian farmakokinetik (PK) mengenai ubat -ubatan sistem hepatobiliary, penyerapan dan kajian metabolisme lulus pertama mengenai ubat -ubatan lisan, kajian interaksi asid hempedu dadah, penilaian hepatotoksisiti dan kajian stasis hempedu, dan pembangunan kaedah analisis biologi (LC - MS/MS).

6 ubat sistem hepatobiliary

Dalam pembangunan ubat -ubatan untuk sistem hepatobiliary, matriks kosong empedu memainkan peranan yang tidak boleh digantikan sebagai sistem simulasi in vitro yang diseragamkan dalam farmakokinetik (PK), penyelidikan toksikologi, dan analisis biologi.

6.1 Menilai ciri -ciri perkumuhan hempedu ubat

Penyelidikan mengenai peredaran hepatointestinal: Hempedu adalah salah satu laluan penting untuk perkumuhan dadah dan metabolit mereka. Dengan menggunakan matriks hempedu buatan, perubahan kepekatan ubat dalam hempedu boleh disimulasikan untuk menilai sama ada ia diserap semula melalui peredaran usus hepatik.

Penentuan kadar pelepasan hempedu: Bagi ubat -ubatan yang secara aktif dikeluarkan melalui hempedu (seperti statin dan antibiotik tertentu), hempedu buatan (hempedu simulasi) dapat membantu mengukur kecekapan pelepasan mereka dan mengoptimumkan rejimen dos.

6.2 Kaji kesan asid hempedu pada penyerapan dadah

Kesan solubilisasi: Asid hempedu boleh menggalakkan pembubaran dan penyerapan usus ubat -ubatan lipofilik seperti vitamin D. Bil buatan boleh mensimulasikan komposisi asid hempedu yang berlainan dan menilai kesannya terhadap bioavailabiliti dadah.

Interaksi asid hempedu dadah: Sesetengah ubat (seperti liraglutide) boleh bersaing dengan pengangkut asid hempedu (seperti BSEP, MRP2), dan hempedu buatan boleh digunakan untuk mengkaji interaksi tersebut untuk mengelakkan potensi risiko stasis hempedu.

6.3 Penilaian Risiko Hepatotoxicity dan Kolestasis

Model kolestasis yang disebabkan oleh ubat: hempedu buatan boleh mensimulasikan keadaan patologi seperti halangan saluran hempedu dan hyperbilirubinemia, dan digunakan untuk mengesan sama ada ubat -ubatan mengganggu aliran hempedu atau kerosakan sel -sel saluran hempedu.

Analisis Biomarker: Dengan menambah komponen tertentu seperti bilirubin, asid hempedu, dan faktor keradangan, kesan ubat pada komponen hempedu dapat dinilai dan keselamatan klinikal dapat diramalkan.

6.4 Kelebihan etika dan praktikal menggantikan hempedu semula jadi

Mengatasi isu kekurangan sampel: Hempedu semulajadi perlu diperoleh melalui kaedah invasif seperti catheterization saluran hempedu, sementara hempedu buatan dapat disediakan secara tak terhingga untuk mengelakkan batasan etika.

Konsistensi batch: Komposisi matriks buatan (matriks simulasi) dikawal, mengurangkan kesan perbezaan individu dalam hempedu semulajadi pada hasil eksperimen.

6.5 Menyokong pembangunan kaedah analisis biologi LC - MS/MS

Pembetulan Kesan Matriks: Komposisi kompleks hempedu semulajadi (garam hempedu tinggi, fosfolipid, pigmen) dengan mudah boleh membawa kepada penindasan ion atau peningkatan dalam analisis LC - MS/MS. Matriks hempedu buatan (matriks hempedu simulasi) dapat memberikan latar belakang yang stabil, mengoptimumkan kepekaan dan ketepatan kaedah.

Penyelidikan Spesies 7 Salib

Komposisi hempedu berbeza -beza di kalangan haiwan yang berbeza (tikus, anjing, monyet), dan hempedu buatan dapat menyeragamkan perbezaan spesies dan meningkatkan translatability data pramatang.

7.1 Cynomolgus Monkey Bile (NHP Bile)

Hempedu monyet cynomolgus sangat mirip dengan manusia dari segi komposisi (seperti profil asid hempedu) dan ekspresi pengangkut dadah (seperti BSEP, MRP2), menjadikannya model primata manusia bukan emas untuk menilai ekskresi hepatik dan interaksi asid hempedu.

7.2 Beagle Dog Bile

Kandungan fosfolipid dalam hempedu beagle agak tinggi, menjadikannya sesuai untuk mengkaji perkumuhan hempedu dan penyerapan garam hempedu yang bergantung kepada ubat lipofilik. Walau bagaimanapun, perbezaan komposisi asid hempedu antara beagle dan manusia memerlukan penentukuran melalui matriks buatan.

7.3 SD Rat Bile

Jumlah pengumpulan hempedu tikus SD agak besar (~ 1 mL/masa), yang digunakan secara meluas untuk peredaran usus hepatik dan kajian hepatotoksisitas dadah. Walau bagaimanapun, perlu diperhatikan bahawa asas bilirubin tinggi mereka boleh mengganggu analisis LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 hempedu tetikus

CD - 1 tetikus mempunyai jumlah hempedu kecil (50 - 200 μ L), menjadikannya sesuai untuk mengkaji mekanisme model pengubahsuaian gen (seperti laluan FXR/PXR), tetapi teknik kuantifikasi mikro diperlukan untuk penyesuaian.

7.5 C57BL/6 Hempedu Mouse

Tikus C57BL/6 biasanya digunakan dalam model penyakit metabolik, dan perubahan dalam komposisi hempedu mereka dapat mencerminkan keadaan patologi, yang memerlukan penggunaan matriks hempedu buatan untuk mensimulasikan patologi.

Model -model di atas perlu digabungkan dengan matriks hempedu buatan untuk mengawal perbezaan spesies dan mengoptimumkan spesies silang perbandingan kaedah LC - MS/MS.

Kesimpulan

Matriks hempedu buatan, sebagai alat utama untuk mensimulasikan fungsi hempedu semulajadi, memainkan peranan yang tidak dapat digantikan dalam pembangunan ubat hepatobiliary. Dengan menyeragamkan komposisi hempedu spesies yang berlainan (seperti monyet cynomolgus, anjing beagle, tikus SD, CD - 1 tikus, tikus C57BL/6), matriks hemped

Dengan pembangunan ubat ketepatan, matriks hempedu buatan akan terus menggabungkan komponen spesifik patologi dan teknologi mikrofluid untuk mensimulasikan persekitaran mikro dan pundi hempedu secara dinamik, memberikan sokongan yang lebih kuat untuk pembangunan dadah yang inovatif.

Kata kunci:Analisis biologi kosong, sampel matriks biologi, analisis biomatrix, hempedu manusia, hempedu haiwan, sampel hemped

Rujukan

Li T, Chiang JY. Asid hempedu isyarat dalam penyakit metabolik dan terapi dadah. Pharmacol Rev. 2014 Okt; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.