CGT Terapija Innovattiva - Lentivirus - Ippakkjar tal-Karozza - ċ-ċelloli immuni

CGT Terapija Innovattiva - Lentivirus - Ippakkjar tal-Karozza - ċ-ċelloli immuni

It-terapija taċ-ċelloli immuni hija trattament innovattiv tal-kanċer li jsaħħaħ is-sistema immuni tal-ġisem biex jimmira u jelimina ċ-ċelloli tal-kanċer. Il-forom ewlenin jinkludu ċitokina - terapija taċ-ċelloli qattiel indotta, terapija taċ-ċelluli T, u terapija taċ-ċelluli T - T. It-terapija CAR - T tinvolvi ċ-ċelloli T mill-ġdid biex jesprimu riċetturi ta 'antiġeni kimeriċi (CAR) li speċifikament jimmiraw iċ-ċelloli tat-tumur, li juru suċċess sinifikanti fil-kanċer ematoloġiku bħal lewkimja u limfoma.

Keywords: CAR - T, lentiviral, Vector Lentiviral, Lentivirus Tracer

Preparazzjoni ta 'CAR - Terapija taċ-Ċelluli T

B'mod ġenerali, il-passi ewlenin biex tħejji ċ-ċelloli tal-karozzi - T huma kif ġej:

Sors tal-figura: Dana - Farber Cancer Institute - CAR T - Provi Kliniċi taċ-Ċelluli jgħinu lill-Pazjenti Multiple Myeloma jirritornaw għas-Saħħa

1. 1.Sorting (t - iżolament taċ-ċellula)

L-ewwel pass fil-preparazzjoni taċ-ċelloli CAR - T huwa li jiżolaw t - ċelloli miċ-ċelloli bojod tad-demm fid-demm periferali tal-pazjent. Tekniki bħal separazzjoni immunomagnetika taż-żibeġ jew ċitometrija tal-fluss huma tipikament użati biex jiġu estratti CD3 + - ċelloli sinjuri T - mid-demm. Biex tkun żgurata l-purità taċ-ċellula, il-proċess ta 'għażla jeħtieġ li jkun preċiż ħafna, li jiżgura li jinkisbu numru suffiċjenti ta' ċelloli T - ta 'kwalità għolja.

2. 2. Stimulazzjoni (T - Attivazzjoni taċ-Ċellula)

Iċ-ċelloli t - estratti huma attivati ​​in vitro, ġeneralment bl-użu ta 'CD3 / CD28 T - Kit ta 'attivazzjoni / espansjoni taċ-ċelloli- Iċ-ċelloli T attivati ​​jidħlu fi stat attiv, u tħejjihom għat-trasfezzjoni tal-ġeni. Permezz ta 'dan il-proċess, il-funzjoni taċ-ċellula T hija msaħħa, li tikkontribwixxi għal modifika ġenetika sussegwenti u amplifikazzjoni.

3. 3.transfezzjoni (editjar tal-ġeni)

Ċelloli T attivati ​​jgħaddu minn trasfezzjoni tal-ġeni biex jesprimu riċettur ta 'antiġen kimeriku (CAR). Dan il-proċess tipikament jużavettur lentiviraliBiex tintroduċi ġeni tal-karozzi fiċ-ċelloli T. Lentivirus huwa għodda effettiva ta 'transduzzjoni tal-ġeni, bil-vantaġġ li tintegra b'mod stabbli l-ġene fil-mira (bħall-ġene tal-karozza) fil-ġenoma taċ-ċellula. Billi tinfetta ċ-ċelloli T u tittrasferixxi l-ġene tal-karozza fid-DNA taċ-ċelloli T, lentivirus jippermetti liċ-ċelloli T jesprimu karozzi twal - Term. Il-ġene CAR jinkludi framment varjabbli tal-katina waħda (SCFV) ta 'antikorp li jippermetti liċ-ċelloli T jirrikonoxxu antiġeni speċifiċi fuq il-wiċċ taċ-ċelloli tat-tumur u jibdew rispons immuni billi jattivaw reġjuni ta' sinjalazzjoni taċ-ċelloli T. Kif muri fil-Figura 2. It-trasfezzjoni lentivirali għandha l-karatteristiċi ta 'effiċjenza għolja u stabbiltà, sabiex il-ġene tal-karozza jkun jista' jiġi espress f'ċelloli T għal żmien twil.

Sors tal-Figura: Terapija taċ-Ċelluli T Singapor - Terapija taċ-Ċelluli T

4. 4.Amplifikazzjoni (proliferazzjoni taċ-ċelloli)

Wara t-trasfezzjoni, iċ-ċelloli CAR - T jidħlu fl-istadju ta 'amplifikazzjoni, fejn fatturi ta' tkabbir bħalIl - 2huma miżjuda biex jippromwovu l-proliferazzjoni taċ-ċelloli. L-iskop ta 'dan il-proċess huwa li jiżgura li numru suffiċjenti ta' ċelloli T - T huma disponibbli għal infużjoni eventwali fil-pazjent. Il-proċess ta 'amplifikazzjoni għandu jitwettaq f'kundizzjonijiet sterili biex jiggarantixxu l-kwalità u l-kwantità taċ-ċellula.

5. 5. Kontroll tal-Kwalità (QC)
6. Qabel ma terġa 'tittieħed mill-ġdid fil-pazjent, il-kontroll tal-kwalità huwa kruċjali matul il-proċess ta' preparazzjoni. CAR ippreparat - ċelloli T jgħaddu minn testijiet stretti għalTiżgura l-purità, l-attività, l-effiċjenza tat-trasfezzjoni tagħhom, u l-konformità mal-istandards tat-trattament- Barra minn hekk, l-ittestjar għal kontaminazzjoni taċ-ċelloli jew reazzjonijiet avversi huwa meħtieġ biex tiġi żgurata s-sigurtà u l-effikaċja terapewtika taċ-ċelloli wara l-infużjoni fil-pazjent.

Importanza tat-trasfezzjoni tal-lentivirus fiċ-ċelloli immuni

It-teknoloġija ta 'trasfezzjoni lentivirali hija kruċjali fit-terapija taċ-ċelloli immuni, speċjalment għall-editjar tal-ġeni u l-inġinerija taċ-ċelluli. Vetturi lentivirali, derivati ​​minn HIV modifikat - 1, huma użati ħafna minħabba l-kapaċità tagħhom li jintegraw il-ġeni fil-ġenoma ospitanti, li jiżguraw espressjoni stabbli, twila - fit-tul. Jistgħu jinfettaw kemm iċ-ċelloli diviżorji kif ukoll dawk li ma jaqsmux, u s-sigurtà tagħhom ġiet imtejba billi timmodifika l-ġeni ewlenin biex tevita r-replikazzjoni. Dawn il-vettori issa huma komunement użati fit-terapija tal-ġeni, l-editjar tal-ġeni, u r-riċerka tal-bijoloġija taċ-ċelluli għall-effiċjenza u d-durabilità tagħhom fil-kunsinna tal-ġeni.

Sors tal-figura: obiosh.com/product/ dijagramma skematika tal-imballaġġ tal-lentivirus u proċess ta 'trasfezzjoni tal-lentivirus fiċ-ċelloli 293T

1. Transduzzjoni tal-ġene effiċjenti

Il-vettur lentivirali jista 'jagħti b'mod effiċjenti ġeni fil-mira, bħall-ġene tal-karozza, f'ċelloli immuni u jintegra dawn il-ġeni b'mod stabbli fil-ġenoma ċellulari, li jiżgura li l-ġene CAR huwa espress kontinwament waqt id-diviżjoni taċ-ċellula u l-proliferazzjoni. Din il-kapaċità għolja ta 'transduzzjoni ta' effiċjenza hija fundamentali għas-suċċess ta 'l-immunoterapija.

2. Immunogeniċità baxxa 

Meta mqabbel ma 'vettori virali oħra, lentiviruses għandhom immunogeniċità aktar baxxa. Bħala riżultat, meta lentiviruses jintużaw biex jittrasferixxu ċelloli immuni, is-sistema immuni tal-pazjent tiġġenera rispons immuni relattivament aktar dgħajjef għall-virus. Dan jgħin biex jiġu minimizzati reazzjonijiet avversi, partikolarment fit-tul - sopravivenza fit-tul taċ-ċelloli wara l-infużjoni, u b'hekk tipprevjeni rifjut immuni eċċessiv.

3. Adattabilità għolja għaċ-ċelloli immuni

Il-vettur lentivirali huwa kapaċi jittrasferixxi b'mod effiċjenti diversi tipi ta 'ċelloli immuni,partikolarment ċelloli T u ċelloli NK- Permezz ta 'transduzzjoni lentivirali, iċ-ċelloli immuni jistgħu jakkwistaw tumur - abbiltajiet ta' rikonoxximent speċifiċi, u b'hekk itejbu l-kapaċità tagħhom biex jimmiraw u joqtlu ċelloli tat-tumur.

4. Preċiżjoni taċ-ċelloli effetturi transduced fir-rikonoxximent taċ-ċelloli fil-mira 

Fl-immunoterapija,ċelloli effetturi transducedIrreferi għal ċelloli immuni li, wara t-transduzzjoni, jesprimu CAR u jeżerċitaw l-attività anti-tumur. Vetturi lentivirali jistgħu jwasslu b'mod preċiż il-ġene tal-karozza f'dawn iċ-ċelloli effetturi, li jippermettilhom jirrikonoxxu u jimmiraw iċ-ċelloli tat-tumur.Ċelloli fil-mirahuma ċ-ċelloli tat-tumur li huma identifikati u meqruda minn dawn iċ-ċelloli immuni. Permezz ta 'transduzzjoni lentivirali, iċ-ċelloli immuni jistgħu jtejbu l-ispeċifiċità tagħhom fir-rikonoxximent u l-qtil ta' ċelloli tat-tumur, u b'hekk itejbu l-effikaċja terapewtika.

F'dan il-kuntest, iPhase, mexxej fir-reaġenti ta 'riċerka in vitro, żviluppa kit ta' l-imballaġġ tal-lentivirus u reaġent ta 'konċentrazzjoni tal-lentivirus biex jissimplifika l-kumplessità ta' transduction għal klijenti ta 'immunoterapija u jtejjeb ir-rata ta' suċċess ta 'trasfezzjoni tal-ġeni stabbli. Dawn il-prodotti joffru soluzzjoni waħda ta 'waqfien għall-klijenti.

Iphase lentivirusPRoducts

Il-kit tal-imballaġġ tal-lentivirus iphasefih ir-reaġenti essenzjali kollha meħtieġa għalIppakkjar tal-lentivirus, tissimplifika b'mod sinifikanti l-proċess sperimentali u tiffranka ħin u sforz. Dan il-kit jinkludi:

• Lentivirus Packaging Plasmid Mix
• Reaġent Trasfett
• Plasmid EGFP
• Ir-reaġent tal-konċentrazzjoni tal-lentivirus tal-iphase

Dan il-kit tassew jissimplifika l-esperiment! Mingħajr l-ebda ħtieġa ta 'preparazzjoni kkumplikata tar-reaġent, l-imballaġġ tal-lentivirus jista' jitlesta b'mod effiċjenti billi sempliċement isegwi l-istruzzjonijiet inklużi.Il-vantaġġi uniċi tal-kit jinkludu ħin qasir tal-imballaġġ, titolu virali għoli, u operazzjoni faċli, li jagħmilha ideali għal jibdew fl-imballaġġ tal-lentivirus. Kull sett ta 'reaġenti jgħaddi minn kontroll strett tal-kwalità biex jiżgura riżultati preċiżi, affidabbli u riproduċibbli, li jtejjeb b'mod sinifikanti l-effiċjenza tat-trasfezzjoni u l-istabbiltà ta' vettori virali, u b'hekk jipprovdi appoġġ tekniku potenti għall-preparazzjoni taċ-ċelloli immuni.

Barra minn hekk, biex tgħin lill-klijenti jiffrankaw l-ispejjeż, iPhase żviluppa wkoll u pproduċa r-reaġent tal-konċentrazzjoni tal-lentivirus, u joffri soluzzjoni ta 'konċentrazzjoni rapida u sempliċi.Billi sempliċement tħallat is-supernatant tal-lentivirus mar-reaġent tal-konċentrazzjoni, segwit minn inkubazzjoni qasira u ċentrifugazzjoni bl-użu ta 'ċentrifuga standard, partiċelli lentivirali jista' jkun ikkonċentrat malajr. Dan il-proċess ma jeħtieġx ultracentrifuge, li jagħmilha għażla konvenjenti u kost - Effettiva għal ħafna utenti tal-laboratorju.

Fil-qosor, ir-reaġent tal-konċentrazzjoni tal-lentivirus tal-iPhase mhux biss itejjeb b'mod sinifikanti l-effiċjenza tat-trasfezzjoni iżda jipprovdi wkoll appoġġ ta 'vettur virali ta' kwalità għolja għall-preparazzjoni taċ-ċelloli immuni. Huwa prodott essenzjali għal esperimenti ta 'rutina, riċerka preklinika, u oqsma oħra ta' applikazzjoni.

Fil-qosor, l-immunoterapija, partikolarment it-terapiji taċ-ċelloli taċ-ċelloli u l-karozzi tal-karozzi, tirrappreżenta direzzjoni ġdida fit-trattament modern tal-kanċer. Permezz ta 'proċessi preċiżi bħall-issortjar taċ-ċelloli, l-attivazzjoni, it-transduzzjoni, l-espansjoni, u l-kontroll tal-kwalità, ix-xjentisti jistgħu jħejju prodotti taċ-ċelloli immuni effiċjenti u sikuri għall-pazjenti, li jippermettu trattament immirat għall-kanċer.It-transduzzjoni lentivirali, bħala teknoloġija ċentrali, għandha rwol kritiku fil-preparazzjoni taċ-ċelloli tal-karozzi - t u tal-karozzi minħabba l-effiċjenza u l-istabbiltà għolja tagħha.B'avvanzi teknoloġiċi kontinwi, l-immunoterapija għandha l-potenzjal li toffri għażliet ta 'trattament innovattivi għal aktar pazjenti, li tipprovdi valur kliniku akbar. Fil-futur, l-immunoterapija hija mistennija li ġġib tama terapewtika rivoluzzjonarja lil aktar pazjenti bil-kanċer.

Biex tissodisfa l-bżonnijiet tat-transduzzjoni tal-ġeni, l-espressjoni, u r-riċerka dwar il-mard, iPhase joffri kits tal-imballaġġ tal-lentivirus, reaġenti ta 'konċentrazzjoni tal-lentivirus, u lentivirus ta' tracer. Dawn il-lentivirus ta 'tracer huma ppakkjati bi proteina fluworexxenti ħadra (GFP), proteina fluworexxenti ħamra mcherry, u luciferase, li tippermetti traċċar faċli taċ-ċelloli fil-mira kemm in vitro kif ukoll in vivo.

Barra minn hekk, iPhase jista 'joffri wkoll żewġ lentivirus ta' tracer ippakkjat minn qabel: GFP & luciferase u MCherry & luciferase. Dawn it-traċċaturi jistgħu jiġu magħżula jew ikkombinati abbażi tal-bżonnijiet sperimentali, is-simplifikazzjoni tal-flussi tax-xogħol u t-titjib tal-effiċjenza għall-intraċċar u l-monitoraġġ tal-ħin reali taċ-ċelloli fil-mira.

IphaseImmunoterapijaRelatiPRoducts

Minbarra lentivirus - prodotti relatati użati fit-terapiji tal-karozzi - T jew tal-karozzi, iPhase, bħala mexxej fir-reaġenti ta 'riċerka in vitro, għamlet ukoll kontribuzzjonijiet sinifikanti biex tappoġġja innovazzjonijiet fis-CGT (ċelloli u terapija tal-ġeni) u oqsma oħra. Iphase żviluppat u pproduċiet lewkoċiti u PBMCs (ċelloli mononukleari tad-demm periferali) iżolati permezz tal-lewkapheresis, flimkien ma 'diversi kits ta' iżolament taċ-ċelloli immuni, biex tappoġġja l-iżvilupp mgħaġġel ta 'immunoterapija.

Prodotti iphase joffru l-vantaġġi li ġejjin, uĊertifikat ta 'Analiżi (COA)Verifikat minn iPhase huwa disponibbli għal kull lott.

Sigurtà 

Il-prodotti iPhase jinxtraw minn donaturi / annimali b'saħħithom li għaddew minn pre-- skrining bir-reqqa, b'riżultati negattivi għall-ittestjar virali (HIV - 1/2, HBV, HCV, Sifilide).

Konformità  

Iphase tipprovdi formoli ta 'kunsens infurmati ffirmati mid-donaturi, b'verifika tas-sors ċara u traċċabbli.

Professjonaliżmu

Il-prodotti pprovduti minn iPhase, miksuba permezz ta ’lewkapheresis, huma mmaniġġjati minn professjonisti mħarrġa. Kull lott huwa akkumpanjat minn COA korrispondenti, u l-prodotti jiġu trasportati taħt katina kiesħa stretta biex tiżgura s-sigurtà, il-kunsinna rapida, u l-assigurazzjoni tal-kwalità.

Servizz tal-Klijent

Iphase joffri kwalità għolja - wara - servizz ta 'bejgħ, li jiżgura esperjenza bla xkiel u bla interruzzjoni matul il-proċess ta' prova.