Bile uman u tal-annimali ta 'matriċi bijoloġika vojta għall-iżvilupp tal-metodu bijoanalitiku u validazzjoni tal-metodu bijoanalitiku

1 Prodotti Iphase

2 Biomatrix vojt

Diversi tipi ta 'matriċi bijoloġiċi, inkluż demm sħiħ vojt, serum, plażma, bili, ħalib, awrina, ħmieġ, kontenut intestinali, organu viscerali, umoriżmu vitruż, umoriżmu milwiem, fluwidu ċerebrospinali, eċċ., Miġbura minn suġġetti b'saħħithom jew annimali sperimentali b'saħħithom, huma kollettivament imsejħa matriċi bijoloġiċi vojta.

3 Il-ħtieġa li jintużaw matriċi bijoloġiċi vojta fi studji prekliniċi

In Riċerka prekliniċi tad-droga, il-matriċi bijoloġika vojta hija l-pedament għall-istabbiliment u l-validazzjoniMetodi ta 'analiżi bijoloġika- Bl-użu ta 'matriċi vojta minn suġġetti b'saħħithom jew annimali sperimentali, ir-riċerkaturi jistgħu jħejju b'mod preċiż l-istandards ta' kalibrazzjoni u kampjuni ta 'kontroll tal-kwalità, jevalwaw l-ispeċifiċità, is-sensittività, il-preċiżjoni, u l-effetti tal-matriċi ta' metodi analitiċi, u jiżguraw l-affidabbiltà tar-riżultati tal-kwantifikazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-mediċina.

4 Metodu Bijoloġiku Validazzjoni u Stabbiliment u Applikazzjoni ta 'Matriċi Bijoloġika Blank

Kif meħtieġ mil-linji gwida tal-FDA / EMA, fl-istabbiliment u l-validazzjoni tal-metodi ta 'analiżi tal-matriċi bijoloġiċi, jeħtieġ li jintużaw il-matriċi bijoloġiċi vojta biex tiżgura l-eżattezza u l-affidabbiltà tal-metodu ta' analiżi. Speċjalment fl-analiżi LC - MS / MS, id-differenzi fil-komponenti tal-matriċi minn sorsi differenti jistgħu jaffettwaw b'mod sinifikanti l-effiċjenza tal-jonizzazzjoni. Matriċi vojta tintuża prinċipalment għall-preparazzjoni ta 'standards ta' kalibrazzjoni, tħejji kampjuni ta 'kontroll tal-kwalità għall-eżami tal-ispeċifiċità, selettività, preċiżjoni, eżattezza, effetti ta' matriċi, rata ta 'rkupru, stabbiltà, linearità ta' dilwizzjoni, effetti ta 'interferenza, eċċ. Ta' metodi analitiċi. Is-selettività u l-effett tal-matriċi tal-metodu ta 'skoperta jeħtieġu rekwiżiti ogħla għal matriċi vojta.

5 Xenarji ta 'Applikazzjoni ta' Bili Matriċi vojta fl-Iżvilupp tad-Droga

Matriċi tal-bili artifiċjali (Matriċi tal-bili simulata)hija soluzzjoni sintetika li tissimula l-komponenti tal-bili naturali u tintuża għall-metaboliżmu tad-droga, it-tossikoloġija, u r-riċerka tal-analiżi bijoloġika.Bili matriċi vojtaGħandu valur ta 'applikazzjoni importanti fix-xenarji ta' żvilupp tal-mediċina li ġejjin: studji farmakokinetiċi (PK) dwar mediċini tas-sistema epatobiliary, assorbiment u l-ewwel pass ta 'studji ta' metaboliżmu ta 'mediċini orali, studji ta' interazzjoni ta 'aċidu tal-bili tal-mediċina, valutazzjoni ta' epatotossiċità u studji ta 'stasi tal-bili, u żvilupp ta' metodi ta 'analiżi bijoloġika (LC - MS / MS.

6 Drogi tas-Sistema Epatobiliari

Fl-iżvilupp ta 'mediċini għas-sistema epatobiliary, il-matriċi vojta tal-bili għandha rwol insostitwibbli bħala sistema standardizzata ta' simulazzjoni in vitro fir-riċerka farmakokinetika (PK), tossikoloġika u ta 'analiżi bijoloġika.

6.1 Evalwa l-karatteristiċi tal-eskrezzjoni tal-bili tal-mediċini

Riċerka dwar iċ-ċirkolazzjoni epatointestinali: il-bili hija waħda mill-mogħdijiet importanti għall-eskrezzjoni tal-mediċini u l-metaboliti tagħhom. Bl-użu ta 'matriċi tal-bili artifiċjali, il-bidliet fil-konċentrazzjoni tal-mediċini fil-bili jistgħu jiġu simulati biex tevalwa jekk humiex assorbiti permezz taċ-ċirkolazzjoni intestinali tal-fwied.

Determinazzjoni tar-rata ta 'tneħħija tal-bili: Għal mediċini li jitneħħew b'mod attiv permezz tal-bili (bħal statins u ċerti antibijotiċi), bili artifiċjali (bili simulata) tista' tgħin biex tikkwantifika l-effiċjenza tat-tneħħija tagħhom u ttejjeb ir-reġim tad-dożaġġ.

6.2 Studja l-effett tal-aċidi tal-bili fuq l-assorbiment tal-mediċina

Effett ta 'Solubilizzazzjoni: L-aċidi tal-bili jistgħu jippromwovu d-dissoluzzjoni u l-assorbiment intestinali ta' mediċini lipofiliċi bħal Vitamina D. Il-bili artifiċjali tista 'tissimula kompożizzjonijiet ta' aċidu tal-bili differenti u tevalwa l-impatt tagħhom fuq il-bijodisponibilità tad-droga.

Interazzjonijiet ta 'aċidu tal-bili tal-mediċina: Xi mediċini (bħal liraglutide) jistgħu jikkompetu ma' trasportaturi ta 'aċidu tal-bili (bħal BSEP, MRP2), u bili artifiċjali jistgħu jintużaw biex jistudjaw dawn l-interazzjonijiet biex jevitaw riskji ta' stasi tal-bili potenzjali.

6.3 Valutazzjoni tar-Riskju tal-Epatotossiċità u l-Kolestasi

Mudell ta 'kolestasi indotta mid-droga: Il-bili artifiċjali tista' tissimula kundizzjonijiet patoloġiċi bħal ostruzzjoni tal-kanal tal-bili u iperbilirubinemija, u tintuża biex tiskopri jekk il-mediċini jinterferixxu mal-fluss tal-bili jew il-ħsara tal-bili taċ-ċelloli tal-kanali.

Analiżi tal-bijomarkatur: Billi jiżdiedu komponenti speċifiċi bħal bilirubin, aċidi tal-bili, u fatturi infjammatorji, l-impatt tal-mediċini fuq il-komponenti tal-bili jista 'jiġi evalwat u s-sigurtà klinika tista' tiġi mbassra.

6.4 Vantaġġi etiċi u prattiċi tas-sostituzzjoni tal-bili naturali

L-indirizzar tal-kwistjoni tal-iskarsezza tal-kampjun: il-bili naturali jeħtieġ li jinkiseb permezz ta 'metodi invażivi bħal kateterizzazzjoni tal-kanal tal-bili, filwaqt li l-bili artifiċjali tista' tkun ippreparata b'mod infinit biex tevita limitazzjonijiet etiċi.

Konsistenza tal-lott: Il-kompożizzjoni tal-matriċi artifiċjali (matriċi simulata) hija kontrollabbli, u tnaqqas l-impatt tad-differenzi individwali fil-bili naturali fuq ir-riżultati sperimentali.

6.5 Appoġġ l-iżvilupp ta 'metodi ta' analiżi bijoloġika ta 'LC - MS / MS

Korrezzjoni tal-Effett tal-Matriċi: Il-kompożizzjoni kumplessa tal-bili naturali (melħ għoli tal-bili, fosfolipidi, pigmenti) tista 'faċilment twassal għal soppressjoni tal-joni jew titjib fl-analiżi LC - MS / MS. Matriċi tal-bili artifiċjali (matriċi tal-bili simulata) tista 'tipprovdi sfond stabbli, ottimizza s-sensittività u l-eżattezza tal-metodu.

7 Riċerka dwar l-Ispeċi Salib

Il-kompożizzjoni tal-bili tvarja ħafna fost annimali differenti (firien, klieb, xadini), u l-bili artifiċjali jistgħu jistandardizzaw id-differenzi tal-ispeċi u jtejbu t-traduzzjonijiet ta 'dejta preklinika.

7.1 Cynomolgus Monkey Bile (NHP Bile)

Il-bili ta 'Cynomolgus Monkey hija simili ħafna għal dik tal-bnedmin f'termini ta' kompożizzjoni (bħall-profil tal-aċidu tal-bili) u l-espressjoni tat-trasportatur tal-mediċina (bħal BSEP, MRP2), li jagħmilha l-istandard tad-deheb mhux - mudell primat uman għall-evalwazzjoni tal-eskrezzjoni biljari tal-fwied u l-interazzjonijiet tal-aċidu biljari tal-mediċina.

7.2 Beagle Dog Bile

Il-kontenut tal-fosfolipidi fil-bili tal-beagle huwa relattivament għoli, u jagħmilha xierqa għall-istudju tal-eskrezzjoni tal-bili u l-assorbiment tal-melħ tal-bili li jiddependi mill-melħ ta 'mediċini lipofiliċi. Madankollu, id-differenzi fil-kompożizzjoni tal-aċidu tal-bili bejn il-beagle u l-bnedmin jeħtieġu kalibrazzjoni permezz ta 'matriċi artifiċjali.

7.3 SD Rat Bile

Il-volum tal-ġbir tal-bili tal-firien SD huwa relattivament kbir (~ 1 ml / ħin), li huwa użat ħafna għaċ-ċirkolazzjoni intestinali tal-fwied u studji tal-epatotossiċità tad-droga. Madankollu, għandu jkun innutat li l-linja bażi għolja tagħhom ta 'bilirubin tista' tinterferixxi ma 'l-analiżi LC - MS / MS.

7.4 ICR / CD - 1 bile tal-ġurdien

CD - 1 Ġurdien għandu volum żgħir tal-bili (50 - 200 μ l), li jagħmilhom adattati għall-istudju tal-mekkaniżmi ta 'mudelli ta' modifika tal-ġeni (bħalma huma l-passaġġ FXR / PXR), iżda tekniki ta 'kwantifikazzjoni mikro huma meħtieġa għall-adattament.

7.5 C57BL / 6 bile tal-ġurdien

Il-ġurdien C57BL / 6 huma komunement użati fil-mudelli ta 'mard metaboliku, u l-bidliet fil-kompożizzjoni tal-bili tagħhom jistgħu jirriflettu kundizzjonijiet patoloġiċi, li jeħtieġu l-użu ta' matriċi tal-bili artifiċjali biex tissimula l-patoloġija.

Il-mudelli ta 'hawn fuq jeħtieġ li jiġu kkombinati ma' matriċi tal-bili artifiċjali biex tikkontrolla d-differenzi ta 'l-ispeċi u jottimizzaw il-komparabilità ta' speċi trasversali tal-metodi LC - MS / MS.

Konklużjoni

Il-matriċi tal-bili artifiċjali, bħala għodda ewlenija għas-simulazzjoni tal-funzjoni tal-bili naturali, għandha rwol insostitwibbli fl-iżvilupp ta 'mediċini epatobiliarji. Bl-istandardizzazzjoni tal-kompożizzjoni tal-bili ta 'speċi differenti (bħal xadini cynomolgus, klieb beagle, firien SD, firien CD - 1, firien C57BL / 6), matriċi tal-bile artifiċjali tindirizza effettivament sfidi ewlenin bħal limitazzjonijiet etiċi, differenzi individwali, u simulazzjoni patoloġika tal-istat ta' kampjuni naturali, li tħejji b'mod sinifikanti l-affidabbiltà u l-valur ta 'traduzzjoni.

Bl-iżvilupp tal-mediċina ta 'preċiżjoni, il-matriċi tal-bili artifiċjali se tkompli tgħaqqad komponenti speċifiċi patoloġiċi u teknoloġija mikrofluwdika biex tissimula b'mod dinamiku l-mikroambjent tal-fwied u tal-marrara, li tipprovdi appoġġ aktar b'saħħtu għall-iżvilupp innovattiv tal-mediċina.

Kliem Ewlenin:Analiżi bijoloġika vojta, kampjun tal-matriċi bijoloġika, analiżi tal-bijomiċi, bili tal-annimali, kampjun tal-bili, bili artifiċjali, bili simulata, bili NHP, bile Cynomolgus Monkey, Rhesus Monkey Bile, Beagle Dog Bile, Rat Bile, Mouse Bile, LC - Ms / MS, Bijoanalitiku Metodu ta 'Żvilupp, Bioanalitiku Validazzjoni tal-Metodu ta' Validazzjoni

Referenza

Li T, Chiang JY. Is-sinjalar tal-aċidu tal-bili fil-mard metaboliku u t-terapija tal-mediċina. Pharmacol Rev. 2014 Oct; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124 / pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.