Dinamika li torbot il-proteina fil-plażma: dijalisi ta 'ekwilibriju u metodi ta' ultrafiltrazzjoni u applikazzjoni f'DDIs

Keywords: Ekwilibriju tad-dijalisi, ultrafiltrazzjoni, proteina tal-plażma li torbot (PPB), rata li torbot ta 'proteina fil-plażma (BRPP), apparat ta' dijalisi ta 'ekwilibriju, membrana tad-dijalisi ta' ekwilibriju, dijalisi ta 'ekwilibriju rapidu (aħmar), interazzjonijiet tad-droga tad-droga (DDI), ADME

Introduzzjoni

Fir-riċerka farmakokinetika, Torbot tal-proteina fil-plażma (PPB) u l- Rata li torbot ta 'proteina fil-plażma (BRPP) Iservu bħala determinanti ċentrali ta 'l-imġieba farmakoloġika ta' kompost, li jinfluwenza direttament l-assorbiment, id-distribuzzjoni, il-metaboliżmu u l-eskrezzjoni tiegħu (Adme) proprjetajiet. Komposti li juru għoliTorbot tal-proteina fil-plażma (PPB)Juri disponibbiltà ta 'frazzjoni ħielsa ristretta, u b'hekk timmodula l-effikaċja u s-sigurtà terapewtika. Fl-istess ħin, BRPP jipprovdi riżoluzzjoni kinetika ta 'interazzjonijiet ta' mediċina - proteina, li jelimina d-dinamika li torbot temporali. Biex tikkwantifika dawn il-parametri bi preċiżjoni, metodoloġiji bħal Dijalisi tal-ekwilibriju u Ultrafiltrazzjoni huma impjegati ta 'rutina, partikolarment fl-evalwazzjoni Droga - Interazzjonijiet tad-Droga (DDI) u l-avvanz tal-pajpijiet tal-iżvilupp tad-droga.

Dijalisi tal-ekwilibriju (ed)

Id-dijalisi tal-ekwilibriju hija teknika bijokimika klassika għall-kejl tal-PPB u l-BRPP. IlApparat tad-dijalisi tal-ekwilibrijutimpjega żewġ kmamar separati minn semipermeable Membrana tad-dijalisi tal-ekwilibriju: naħa waħda fiha t-taħlita makromolekula-ligand, u l-oħra fiha biss buffer. Maż-żmien, ligands li jxerrdu liberament jimxu mal-membrana tad-dijalisi tal-ekwilibriju sakemm il-konċentrazzjoni tagħhom tkun ugwali fuq iż-żewġ naħat (ekwilibriju), filwaqt li l-ligands marbuta mal-proteina jibqgħu fuq in-naħa tal-makromolekula minħabba li ma jistgħux jgħaddu mill-pori tal-membrana. Billi jkejlu l-konċentrazzjonijiet tal-ligand fuq in-naħa tal-bafers wara li jintlaħaq l-ekwilibriju, ir-riċerkaturi jistgħu jiddeterminaw il-frazzjoni ħielsa tal-ligand u, meta mqabbla mal-ligand totali miżjud, ikkalkula affinitajiet, kapaċitajiet jew livelli ħielsa li jorbtu f'kampjuni bijoloġiċi. Il-vantaġġ tad-dijalisi tal-ekwilibriju huwa li huwa preċiż ħafna, iżda huwa l-ħin li jikkunsma. L-apparat konvenzjonali tad-dijalisi tal-ekwilibriju jieħu 3 - 48 siegħa biex jibbilanċja.

Dijalisi ta 'ekwilibriju rapidu (aħmar)

Dijalisi ta 'ekwilibriju mgħaġġel(Aħmar)Huwa adattament b'rendiment għoli ta 'dijalisi ta' ekwilibriju klassiku ddisinjat biex iħaffef u jissimplifika l-kejl tal-frazzjoni mhux marbuta (ħielsa) ta 'molekuli żgħar - mediċini tipikament - fil-matriċi bijoloġiċi kumplessi. Fid-dijalisi ta 'ekwilibriju mgħaġġel, kampjuni (per eżempju, kumplessi li fihom il-proteini tal-mediċina) u buffer huma mqiegħda f'kamra li jmissu magħhom ta' pjanċa b'ħafna ħinijiet separati minn membrana ta 'dijalisi ta' ekwilibriju semipermeabbli; Żona tal-wiċċ ottimizzata tal-membrana, disinn tal-pjanċa u aġitazzjoni kkontrollata jippermettu li l-ekwilibriju jintlaħaq fi ftit sigħat minflok matul il-lejl. Minħabba li l-mediċina ħielsa biss tista 'taqsam il-membrana, li tikkwantifika l-konċentrazzjoni tagħha fil-kamra tal-bafer wara l-ekwilibriju tagħti direttament il-frazzjoni mhux marbuta. L-apparat aħmar huwa aktar mgħaġġel minn apparat tradizzjonali ta 'dijalisi ta' ekwilibriju mingħajr ma jissagrifika l-eżattezza, u jagħmel ideali aħmar għal skrining ADME parallelizzat.

Ultrafiltrazzjoni

L-ultrafiltrazzjoni hija teknika ta 'separazzjoni rapida u bbażata fuq il-membrana użata biex tiddistingwi molekuli żgħar ħielsa (mhux marbuta) - bħal mediċini, metaboliti, jew ligands - minn makromolekuli akbar bħal proteini fis-soluzzjoni. Il-kampjun jitqiegħed 'il fuq minn membrana semipermeabbli li d-daqs tal-pori jżomm il-proteini u l-kumplessi tal-proteina-ligand filwaqt li jippermetti molekuli ħielsa u solvent jgħaddu taħt pressjoni applikata jew forza ċentrifugali. Hekk kif il-filtrat jiġbor fuq in-naħa l-oħra, fih biss il-frazzjoni mhux marbuta ta 'l-analit; Billi jkejlu l-konċentrazzjoni tiegħu, ir-riċerkaturi jistgħu jiddeterminaw direttament il-livelli bla mediċina jew ligand. Dan l-approċċ ta 'throughput għoli huwa użat ħafna fi studji farmakokinetiċi u ADME biex tevalwa l-vinkolanti tal-proteina mingħajr żminijiet estensivi ta' inkubazzjoni.

Implikazzjonijiet fil-mediċina - Interazzjonijiet tad-Droga (DDIs)

Fl-interazzjonijiet tad-droga-mediċina, żewġ aġenti li jaqsmu l-istess siti li jorbtu jistgħu jwarrbu b'mod kompetittiv lil xulxin, temporanjament jgħollu l-frazzjoni mhux marbuta tal-mediċina spostata; Din il-bidla tista 'tamplifika l-effikaċja jew it-tossiċità tagħha u tbiddel il-volum ta' distribuzzjoni u tneħħija tagħha sakemm jiġi stabbilit bilanċ ġdid. Klinikament, il-mediċini bi proteina fil-plażma għolja (PPB) u rata għolja li torbot il-proteina fil-plażma (BRPP) huma l-iktar suxxettibbli għal dawn l-interazzjonijiet ta 'spostament, u għalhekk l-amministrazzjoni ta' l-amministrazzjoni tittella 'monitoraġġ bir-reqqa u, jekk meħtieġ, aġġustament tad-doża biex jiġi evitat bidliet mhux mistennija fl-espożizzjoni tad-droga.

Konklużjoni

Il-fehim tal-proteina fil-plażma (PPB) u r-rata li torbot il-proteina fil-plażma (BRPP) hija kruċjali fil-farmakokinetika, peress li dawn il-parametri jinfluwenzaw b'mod kritiku l-assorbiment, id-distribuzzjoni u l-effikaċja terapewtika ta 'mediċina. Tekniki bħalmalisi ta 'ekwilibriju (ED), dijalisi ta' ekwilibriju rapidu (aħmar), u ultrafiltrazzjoni jipprovdu għodda essenzjali biex tikkwantifika frazzjonijiet ta 'mediċini b'xejn u kinetika li torbot. Filwaqt li ED tibqa 'l-istandard tad-deheb għall-eżattezza, Red joffri alternattiva għolja - throughput li tibbilanċja l-veloċità u l-preċiżjoni, u l-ultrafiltrazzjoni tippermetti skrining rapidu minkejja limitazzjonijiet potenzjali fl-eżattezza. Dawn il-metodi huma indispensabbli fl-evalwazzjoni tal-interazzjonijiet tal-mediċina (DDIs), fejn spostament kompetittiv ta 'proteina għolja - mediċini marbuta jistgħu jbiddlu l-livelli ta' mediċini ħielsa, li jippreżentaw riskji ta 'tossiċità jew effikaċja mibdula. Hekk kif l-iżvilupp tal-mediċina javvanza, l-għażla ta 'metodoloġiji xierqa biex tevalwa PPB u BRPP tiżgura riżultati terapewtiċi aktar sikuri, tiggwida aġġustamenti fid-doża u mitigazzjoni tar-riskji fil-prattika klinika. Fl-aħħar mill-aħħar, l-integrazzjoni ta 'dawn it-tekniki fi studji farmakokinetiċi ssaħħaħ il-kapaċità tagħna li nbassru u nimmaniġġjaw l-imġieba tad-droga, u jissottolinjaw ir-rwol vitali tagħhom fl-ottimizzazzjoni tal-iżvilupp tad-droga u l-kura tal-pazjent.