Keywords:Splenocytes (SPLS); Splenocytes Cynomolgus Monkey; Splenocytes tax-xadina rhesus; Splenocytes tal-klieb; Splenocytes tal-klieb; Splenocytes tal-far; Splenocytes tal-ġurdien; Splenocytes tal-ġrieden; Splenocytes tal-fenek; Iżolament splenocytes; Splenokiti tal-iffriżar; Splenocytes li jinħallu
Prodott iphase
Splenocytes (SPLs)huma popolazzjoni eteroġenja ta 'ċelloli immuni iżolati mill-milsa, organu vitali involut fil-filtrazzjoni tad-demm, immuntar risponsi immuni, u ż-żamma ta' omejostasi. Dawn iċ-ċelloli jinkludu limfoċiti (ċelloli T, ċelloli B), makrofaġi, ċelloli dendritiċi, u ċelloli tal-qattiel naturali (NK), li kollha għandhom rwoli kritiċi fl-immunità adattiva u innata. Splenocytes huma użati ħafna fir-riċerka preklinika u traslazzjonali biex jistudjaw il-funzjoni immuni, l-iżvilupp tal-vaċċini, mard awtoimmuni, u immunoterapija tal-kanċer.
Ir-rwol u l-kompożizzjoni ta 'splenocytes (SPLs)
Fi ħdan il-milsa, splenocytes joqogħdu f'reġjuni distinti: il-polpa ħamra, li tiffiltra d-demm u tirriċikla ċelloli ħomor qodma, u l-polpa bajda, fejn ir-risponsi immuni huma mibdija. Il-polpa bajda hija organizzata f'żoni taċ-ċelloli T u follikuli taċ-ċelluli B, li tiffaċilita l-interazzjonijiet bejn l-antiġen - ċelloli li jippreżentaw u limfoċiti. Din l-arkitettura unika tagħmel splenocytes (SPLS) għodda qawwija f'analiżi immunoloġika bħal ELISPOT, ċitometrija tal-fluss, u reazzjonijiet ta 'limfoċiti mħallta.
Speċi - Splenocytes Speċifiċi (SPLs)
-Splenocytes tax-xadina Cynomolgus:Splenocytes tax-xadina Cynomolgus jintużaw fir-riċerka prekliniċi minħabba li jimitaw aktar mill-qrib ir-risponsi immuni tal-bniedem, u jagħmlu splenocytes ta 'xadina Cynomolgus ideali għal studji ta' traduzzjoni.
-Splenocytes tar-Rhesus Monkey:Splenocytes tax-xadina Rhesus huma bl-istess mod stmati għas-similaritajiet immunoloġiċi mill-qrib tagħhom mal-bnedmin. Studji bl-użu ta 'splenocytes ta' xadina rhesus jgħinu biex jitnaqqas id-distakk bejn mudelli ta 'annimali u applikazzjonijiet kliniċi.
-Splenocytes tal-klieb / splenocytes tal-klieb:Fir-riċerka veterinarja, splenocytes tal-klieb (jew splenocytes tal-klieb) jintużaw biex jistudjaw disturbi immuni fil-klieb u biex jiġbdu paraguni mar-risponsi immuni tal-bniedem.
-Splenocytes tal-fenek: Splenocytes tal-fenek huma importanti fi studji dwar il-produzzjoni tal-antikorpi u l-iżvilupp tal-vaċċini. Splenocytes tal-fenek jgħinu biex jiżvelaw dettalji li jistgħu jvarjaw minn splenocytes tal-ġurdien jew splenocytes tal-far.
-Splenocytes tal-ġurdien / splenocytes tal-ġrieden:Splenocytes tal-ġurdien huma waħda mill-aktar splenocytes studjati frekwenti (SPLs) fl-immunoloġija. Protokolli għal splenokiti ta 'iżolament mill-ġrieden huma stabbiliti sew, u kemm splenocytes tal-ġurdien kif ukoll ġrieden splenocytes jintużaw għaċ-ċitometrija tal-fluss, ELISPOT, u testijiet funzjonali oħra.
-Splenocytes tal-far:Splenocytes tal-firien jipprovdu mudell kumplimentari għall-immunotossikoloġija u studji tal-vaċċini. Splenocytes tal-firien huma spiss imqabbla ma 'splenocytes tal-ġurdien biex jifhmu d-differenzi ta' l-interspeċi.
Iżolament ta 'splenocytes
Iżolament ta 'splenocyteshuwa l-proċess ta 'estrazzjoni ta' ċelloli immuni mill-milsa li għandhom jintużaw f'diversi applikazzjonijiet ta 'riċerka, bħal ċitometrija tal-fluss, testijiet ta' produzzjoni ta 'ċitokina, jew reazzjonijiet ta' limfoċiti mħallta.
Il-milsa tneħħiet taħt kondizzjonijiet asettiċi, mitħuna f’soluzzjoni ta ’iżolament u trasferita għal tubu sterili li fih il-mezz RPMI 1640. Is-saff tal-lewkoċiti nġabar bir-reqqa wara ċentrifugazzjoni. Iċ-ċelloli ġew maħsula b'medju RPMI 1640, iċċentrifugat u s-supernatant jintrema. Dan il-pass tal-ħasil ġie ripetut 1 - 2 darbiet qabel ma ntużaw iċ-ċelloli iżolati għal aktar esperimenti.
Splenocytes tal-iffriżar
Splenocytes tal-iffriżarhuwa pass kruċjali għall-preservazzjoni taċ-ċelloli għal użu futur. Il-krijopreservazzjoni tippermetti lir-riċerkaturi jaħżnu splenocytes għal perjodi estiżi mingħajr ma jikkompromettu l-vijabbiltà jew il-funzjonalità tagħhom.
Is-supernatant tas-sospensjoni taċ-ċellula ċentrifugata sew mill-pass ta 'iżolament jintrema u l-konċentrazzjoni taċ-ċellula ġiet dilwita f'mezz iffriżar. Żid alikwott ma 'kull tubu tal-iffriżar u ttrasferixxi għal kontenitur tal-iffriżar, filwaqt li tiżgura li ċ-ċelloli jibqgħu f'sospensjoni. Iffriża malajr il-kontenituri tal-iffriżar fil-friża - 80 ° C. Ittrasferixxi għal - 150 ° C kontenitur tal-friża (jew tank tan-nitroġenu likwidu) għal ħażna fit-tul.
Splenocytes li jinħallu
Splenocytes li jinħalluGħandha ssir bir-reqqa biex tiżgura vijabbiltà u funzjonalità taċ-ċellula għolja wara l-krijopreservazzjoni. Il-proċess tat-tidwib huwa tipikament mgħaġġel biex jimminimizza l-effetti ta 'ħsara tad-DMSO u l-formazzjoni tal-kristall tas-silġ.
Il-kriotubi huma trasferiti għal banju ta 'l-ilma ta' 37 ° C u jinduna sakemm il-kristalli tas-silġ fini baqgħu biss fit-tubi. Żid 0.5 - 1ml ta 'mezz tal-kultura taċ-ċelluli mat-tubu ffriżat, ibdel mill-ġdid u ttrasferixxi s-sospensjoni għal tubu ta' 15ml mimli b'mezz tal-kultura taċ-ċellula. Ċentrifuga, neħħi s-supernatant u taptap it-tubu biex tinħall l-arranġament taċ-ċellula. Żid 1ml ta 'mezz tal-kultura taċ-ċelluli, daqqa u terġa' tpoġġi ma 'pipetta, żid medju ma' volum ta '15 ml. Ċentrifuga, de - supernatize, żid 1ml ta 'mezz tal-kultura taċ-ċelluli, billi żżid medju skont il-konċentrazzjoni taċ-ċellula mistennija. Poġġi ċ-ċelloli f'inkubatur tas-CO2 u inkuba għal 1H b'distakk żgħir fl-għatu. Fi tmiem l-inkubazzjoni, terġa 'tpoġġi mill-ġdid u titlaq għal 1min biex tippermetti li l-fdalijiet taċ-ċelloli aggregati jippreċipitaw. Is-sospensjoni taċ-ċellula mingħajr preċipitazzjoni ġiet trasferita bir-reqqa għal tubu ġdid ta '15ml. Iċ-ċelloli ġew magħduda biex tiddetermina l-attività taċ-ċellula.
Konklużjoni
Splenocytes, bil-kompożizzjoni diversa tagħhom u r-rwol ċentrali fir-risponsi immuni, huma għodod imprezzabbli fir-riċerka immunoloġika. Kemm jekk derivati minn annimali gerriema, primati, jew speċi oħra bħal fniek u klieb, splenocytes jiffaċilitaw studji kritiċi fil-funzjoni immuni, mekkaniżmi ta 'mard, żvilupp tal-vaċċini, u immunoterapija tal-kanċer. Il-proċessi ta 'iżolament, iffriżar, u jinħall huma essenzjali għall-preservazzjoni tal-integrità u l-vijabbiltà tagħhom, li jippermettu lir-riċerkaturi jesploraw id-dinamika ċellulari f'diversi mudelli. Hekk kif il-fehim tagħna dwar l-immunoloġija japprofondixxi, l-użu ta 'splenocytes se jibqa' strumentali biex inaqqas id-distakk bejn studji prekliniċi u applikazzjonijiet kliniċi, li jiżgura avvanzi kemm fil-mediċina umana kif ukoll f'dak veterinarju.
Post Ħin: 2025 - 03 - 28 15:39:43