X'inhuma l-PBMCs umani u r-rwol tagħhom fl-immunità?

PBMC umanS, jew ċelloli mononukleari tad-demm periferali, huma grupp kritiku ta 'ċelloli immuni li jiċċirkolaw fid-demm tiegħek. Dawn iċ-ċelloli jinkludu limfoċiti, monokiti, u ċelloli dendritiċi, kull wieħed għandu rwol uniku fid-difiża ta 'ġismek. Il-PBMCs jipproteġuk billi tidentifika u tinnewtralizza patoġeni ta 'ħsara, bħal batterji u viruses, filwaqt li żżomm ukoll bilanċ immuni.

Ir-riċerka turi li l-PBMCs jibqgħu stabbli maż-żmien, bil-vijabbiltà taċ-ċellula 'l fuq minn 85% fil-biċċa l-kbira tal-kampjuni. Barra minn hekk, l-espressjoni tal-ġeni tagħhom tista 'tadatta malajr. Pereżempju, l-espressjoni TNFα tiżdied b'aktar minn tliet darbiet fi ftit sigħat. Tali versatilità tenfasizza l-importanza tagħhom fir-regolazzjoni tar-risponsi immuni.

Kompożizzjoni ta 'PBMCs umani

Limfoċiti: ċelloli T, ċelloli B, u ċelloli NK

Il-limfoċiti huma komponent vitali tal-PBMCs umani. Jinkludu ċelloli T, ċelloli B, u ċelloli tal-qattiel naturali (NK), kull wieħed bi rwoli distinti fl-immunità. Iċ-ċelloli T jgħinu biex jirregolaw ir-risponsi immuni u jattakkaw direttament ċelloli infettati. Iċ-ċelloli B jipproduċu antikorpi, li jinnewtralizzaw patoġeni ta 'ħsara. Iċ-ċelloli NK, min-naħa l-oħra, jimmiraw u jeqirdu ċelloli anormali, bħal dawk infettati minn viruses jew ċelloli tal-kanċer.

Interessanti, xi limfoċiti fil-PBMCs umani, identifikati bħala ċelloli CD3 + CD19 +, juru funzjonalità doppja. Dawn iċ-ċelloli jistgħu jaġixxu kemm ċelloli T u ċelloli B. Huma jirrispondu għal theddid permezz ta 't - riċettur taċ-ċellula (TCR) u b - mogħdijiet ta' sinjalazzjoni tar-riċettur taċ-ċellula (BCR). Dan ir-rwol doppju jippermettilhom jipparteċipaw kemm fir-risponsi immuni umoristiċi u ċellulari. Pereżempju, dawn jorbtu l-antiġeni b'mod aktar effettiv minn ċelloli B konvenzjonali u jipproduċu interferon - gamma (IFN - γ) f'livelli simili għaċ-ċelloli T.

Monokiti u l-funzjonijiet immuni tagħhom

Il-monokiti huma grupp ewlieni ieħor fi ħdan il-PBMCs umani. Dawn iċ-ċelloli jgħassu d-demm tiegħek, ifittxu sinjali ta 'infezzjoni jew ħsara fit-tessut. Ladarba jindividwaw problema, huma jemigraw lejn iż-żona affettwata u jittrasformaw f'makrofaġi jew ċelloli dendritiċi. Il-makrofaġi jinħadmu u jiddiġerixxu patoġeni, filwaqt li ċelloli dendritiċi jippreżentaw antiġeni għal ċelloli immuni oħra.

Il-monokiti jirrilaxxaw ukoll ċitokini, li qed jagħmlu sinjal ta 'molekuli li jgħinu biex jikkoordinaw ir-rispons immuni. Billi jagħmlu dan, huma jiżguraw li ġismek jirreaġixxi b'mod effettiv għal infezzjonijiet jew korrimenti.

Ċelloli dendritiċi u r-rwol tagħhom fil-preżentazzjoni tal-antiġen

Iċ-ċelloli dendritiċi huma antiġen professjonali - ċelloli li jippreżentaw (APCs) fi ħdan PBMCs umani. Huma għandhom rwol kruċjali fl-attivazzjoni taċ-ċelloli T billi jippreżentaw antiġeni fuq wiċċhom. Ir-riċerka turi li ċ-ċelloli dendritiċi huma l-uniċi APCs li kapaċi jattivaw kemm ċelloli T CD4 + kif ukoll CD8 + naïve. L-effiċjenza tagħhom ġejja mill-abbiltà tagħhom li jnaqqsu r-ritmu tad-diġestjoni tal-antiġen, li żżid id-disponibbiltà ta 'peptidi għat-tagħbija MHC.

Dawn iċ-ċelloli jiżguraw li s-sistema immuni tiegħek tirrikonoxxi u tirrispondi għal theddid b'mod effettiv, u tagħmilhom indispensabbli fl-immunità.

Iżolament tal-PBMCs umani

Sorsi ta 'PBMCs: Demm periferali u mudullun

PBMCs umani jistgħu jiġu iżolati minn żewġ sorsi primarji: demm periferali u mudullun. Id-demm periferali huwa l-iktar sors komuni minħabba l-aċċessibilità u l-invażività minima tiegħu. Il-mudullun, min-naħa l-oħra, jipprovdi ambjent aktar sinjur għaċ-ċelloli immuni iżda jeħtieġ proċedura aktar invażiva.

Ir-rendiment u l-purità tal-PBMCs jistgħu jvarjaw skont is-sors u l-metodu ta 'iżolament. Pereżempju, studji juru li l-metodu Standard Ficoll jikseb rendiment u purità ogħla meta mqabbel mal-metodi CPT (Tube Preparazzjoni taċ-Ċelluli). It-tabella hawn taħt tenfasizza dawn id-differenzi:

Teknika ta 'Overlay Ficoll għall-iżolament tal-PBMC

It-teknika tal-overlay Ficoll hija metodu użat ħafna għall-iżolament tal-PBMCs. Dan il-proċess jinvolvi saffi ta 'demm fuq soluzzjoni ta' ficoll - paque u ċentrifugatha għal ċelloli separati bbażati fuq id-densità. Il-PBMCs jiffurmaw saff distint bejn il-plażma u l-ficoll, u jagħmilhom faċli biex jinġabru.

Studji jenfasizzaw l-importanza tal-immaniġġjar xieraq matul dan il-proċess biex jiżguraw riżultati konsistenti. Pereżempju, studju wieħed sab li l-użu ta 'Ficoll b'mod korrett jista' jikseb purità sa 97% b'varjabbiltà minima. It-tabella hawn taħt tqabbel metodi ta 'inkubazzjoni differenti għall-iżolament tal-PBMC:

Metodi ta 'separazzjoni immunomagnetika

Is-separazzjoni immunomagnetika hija teknika oħra avvanzata għall-iżolament tal-PBMCs. Dan il-metodu juża żibeġ manjetiċi miksija b'anticorpi biex jimmiraw tipi ta 'ċelloli speċifiċi. L-issortjar pożittiv jiżola ċ-ċelloli billi jorbothom maż-żibeġ, filwaqt li l-issortjar negattiv ineħħi ċelloli mhux mixtieqa, u jħalli l-popolazzjoni mixtieqa mhux mittiefsa.

Ir-riċerka turi li l-issortjar negattiv iżomm il-vijabbiltà taċ-ċellula u ma jaffettwax markaturi ta 'attivazzjoni bħal IL - 2R (CD25). B'kuntrast, issortjar pożittiv jista 'jnaqqas il-kapaċità ta' vijabbiltà u attivazzjoni, speċjalment wara l-istimulazzjoni. It-tabella hawn taħt tiġbor fil-qosor dawn is-sejbiet:

Dan il-metodu huwa partikolarment utli meta jkollok bżonn popolazzjonijiet ta 'ċelloli speċifiċi ħafna għal riċerka jew applikazzjonijiet terapewtiċi.

Applikazzjonijiet ta 'PBMCs umani fir-Riċerka u l-Mediċina

Rwol fl-iżvilupp tat-terapija taċ-ċelloli T CAR - T

Il-PBMCs umani għandhom rwol ċentrali fl-avvanz tat-terapija taċ-ċelloli T - T, trattament innovattiv għal ċerti kanċer. Dawn iċ-ċelloli jservu bħala l-materjal tal-bidu għall-ġenerazzjoni taċ-ċelloli CAR - T, li huma mfassla biex jimmiraw u jeqirdu ċ-ċelloli tal-kanċer. Tista 'tistaqsi kemm huma effettivi PBMCs f'dan il-proċess. Studji juru riżultati impressjonanti:

• Wara 11-il jum ta 'kultura, 1 × 10 ^ 7 PBMCs iffriżati jistgħu jipproduċu mill-inqas 1.48 × 10 ^ 9 ċelloli Mesocar - T, b'aktar minn 30% CAR + ċelloli.

• It-testijiet taċ-ċitotossiċità juru ċelloli m-mesocar - T derivati ​​minn PBMCs friski u krijopreservati jwettqu bl-istess mod. F'effettur - sa - proporzjon fil-mira ta '4: 1, iċ-ċitotossiċità tagħhom tvarja bejn 91.02% - 100.00% u 95.46% - 98.07%, rispettivament.

• Anke fi proporzjon aktar baxx ta '2: 1, ma hija osservata l-ebda differenza sinifikanti fiċ-ċitotossiċità.

Dawn is-sejbiet jenfasizzaw l-affidabbiltà tal-PBMCs fil-produzzjoni taċ-ċelloli tal-karozzi effettivi, anke wara l-ħażna fit-tul.

Użu fl-ittestjar tad-droga u studji ta 'tossiċità

Il-PBMCs huma ta 'siwi kbir fl-ittestjar tad-droga u studji ta' tossiċità. Huma jipprovdu bniedem - rilevanti biex jevalwa kif il-mediċini jinteraġixxu maċ-ċelloli immuni. Pereżempju, ir-riċerkaturi ttestjaw il-quinacrine tad-droga fuq PBMCs biex jivvalutaw it-tossiċità tagħha. It-tabella hawn taħt tiġbor fil-qosor is-sejbiet:

Dawn ir-riżultati juru li l-PBMCs jirrispondu b'mod attiv għal quinacrine, anke f'livelli baxxi ta 'tossiċità. Dan jagħmilhom għodda affidabbli għat-tbassir ta 'risponsi immuni għal mediċini ġodda.

Skoperta tal-bijomarkatur u monitoraġġ immuni

Il-PBMCs huma essenzjali għall-identifikazzjoni tal-bijomarkaturi u l-monitoraġġ tas-saħħa immuni. Il-bijomarkaturi huma indikaturi li jistgħu jitkejlu ta 'proċessi jew mard bijoloġiċi. Billi tanalizza l-PBMCs, tista 'tiskopri bijomarkaturi li jiżvelaw attività immuni, progressjoni tal-marda, jew effikaċja tat-trattament. Pereżempju, ir-riċerkaturi spiss ikejlu l-livelli ta 'ċitokina fil-PBMCs biex jimmonitorjaw ir-risponsi immuni waqt infezzjonijiet jew terapiji. Dan l-approċċ jgħin fit-trattamenti mfassla għal pazjenti individwali, u jtejbu r-riżultati.

Il-PBMCs jippermettu wkoll il-monitoraġġ immuni fit-tul. L-istabbiltà u l-adattabilità tagħhom jagħmluhom ideali għat-traċċar tal-bidliet fil-funzjoni immuni maż-żmien. Dan huwa partikolarment utli fil-mard kroniku jew waqt trattamenti fit-tul.

Il-PBMCs umani huma indispensabbli fil-fehim u l-avvanz tal-immunoloġija. Il-kompożizzjoni diversa tagħhom - limfoċiti, monokiti u ċelloli dendritiċi - tippermettilhom li jwettqu funzjonijiet immuni kritiċi. Tekniki ta 'iżolament bħall-overlay Ficoll u s-separazzjoni immunomagnetika jiżguraw li tista' tikseb PBMCs ta 'purità għolja għal riċerka jew użu terapewtiku.

L-applikazzjonijiet tagħhom jifirxu firxa wiesgħa ta 'oqsma:

• Eluf ta 'studji użaw PBMCs fir-riċerka klinika matul l-aħħar 50 sena.

• Huma vitali għat-terapija taċ-ċelloli T CAR - T, l-iżvilupp tal-mediċina, u l-analiżi tar-rispons immuni.

• Il-PBMCs jikkontribwixxu għall-iskoperta tal-bijomarkatur, l-istratifikazzjoni tal-pazjenti, u riċerka tal-mard rari.

Billi tuża l-PBMCs, tista 'tiftaħ possibbiltajiet ġodda fl-immunoloġija u tiżviluppa trattamenti innovattivi li jittrasformaw il-kura tas-saħħa.

FAQ

Għal xiex jintużaw il-PBMCs fir-riċerka medika?

Il-PBMCs jgħinu lir-riċerkaturi jistudjaw ir-risponsi immuni, jittestjaw mediċini ġodda, u jiżviluppaw terapiji bħal trattamenti taċ-ċelloli T CAR. L-adattabilità u l-istabbiltà tagħhom jagħmluhom ideali għal esperimenti li jeħtieġu ċelloli immuni umani.

Kif taħżen PBMCs għal użu futur?

Tista 'taħżen PBMCs billi tikkriopreservinghom fin-nitroġenu likwidu. Dan il-metodu jżomm il-vijabbiltà u l-funzjonalità tagħhom għal snin twal, li jippermettilek tużahom fi studji fit-tul jew applikazzjonijiet terapewtiċi.

Il-PBMCs huma l-istess bħaċ-ċelloli bojod tad-demm?

Mhux eżattament. Il-PBMCs huma subsett ta 'ċelloli bojod tad-demm li jinkludu limfoċiti, monokiti, u ċelloli dendritiċi. Huma jeskludu granuloċiti bħal newtrofili, li huma wkoll parti miċ-ċelloli bojod tad-demm.

Il-PBMCs jistgħu jintużaw biex jistudjaw mard awtoimmuni?

IVA! Il-PBMCs huma ta 'valur għall-istudju ta' mard awtoimmuni. Huma jgħinuk tanalizza l-imġieba taċ-ċelloli immuni, il-produzzjoni taċ-ċitokina, u l-markaturi ġenetiċi, u tipprovdi għarfien dwar mekkaniżmi ta 'mard u trattamenti potenzjali.

L-iżolament tal-PBMC huwa proċess ikkumplikat?

Mhux tassew. Tekniki bħall-metodu ta 'overlay Ficoll jew separazzjoni immunomagnetika jagħmlu l-iżolament tal-PBMC sempliċi. B'taħriġ u tagħmir xieraq, tista 'tikseb kampjuni ta' purità għolja għar-riċerka tiegħek.