प्रेरित मुसा लिभर S9 अंश: भिट्रो जेनोटोक्स्टिकता र उत्परिवर्तन परीक्षणहरूको लागि एक मेटाबोलिक सक्रियता प्रणाली

कीवर्डहरू: OECD 471, OECD 473, OECD 476, OECD 476, oncd 477, उत्परिवर्तन टेक्स्टेसन, एडमोस्टिक विषाक्तता, एचपीटी / एचजीआरएसएन एसटीएम, एचपी / एचजीआरटीएक्षण

Ipphese उत्पादन

परिचय

प्रेरित मुसा लिभर S9एक कुञ्जी घटक को आकलन मा एक कुञ्जी घटक होआनुवंशिक विषाक्ततारसायनको सम्भाव्यता, विशेष गरी नियामक विषाक्ततामा। यो सामान्य रूपमा भिट्रो अमान्यहरूमा संयोजनमा प्रयोग गरिन्छ, जस्तैAMES परीक्षण रउत्परिवर्तन परीक्षण, कम्पाउन्डको Cusaganic गुणहरूको मूल्यांकन गर्न। साइटोक्रोम P450 मा धनी इन्जाइमेटिक प्रणाली प्रदान गरेर, प्रेरित मुकुट एभल एसआरए डलर कलेजोमा भएको मेटाब्लिक प्रक्रियाहरूको कारणले र क्यान्सरले सम्भावित भूमिका खेल्दछ।

प्रेरित मुसा लिभर S9

कलेजो S9 भागले एक पोष्टलाई जनाउँछ जुन - mitochondrial Suntanter Smitronguation चरणहरु को एक श्रृंखला को एक श्रृंखला पछि मुसा लिभर hungentens बाट प्राप्त। "प्रेरित" शब्दको उपचारको उपचारको लागि विशेष यौगिकहरूको उपचारलाई सन्दर्भित गर्नुहोस् जुन लिभर एन्जाइम्सहरूको गतिविधि बढाउँदछ, विशेष गरी सिटोच्रोम p450 एन्जाइमहरूको लागि जिम्मेवार हुन्छ, जुन ZENOBOD को एक विस्तृत श्रृंखलाको लागि जिम्मेवार हुन्छ।

प्रेरित मुसा लिभर एस priction अंशको विभिन्न प्रकारका विभिन्न प्रकारहरू छन् जुन चरणमा समावेश छन् र छाँटका आइरी मस्तिष्क चरणहरू। यसले संक्षिप्त P450 M4500 Moooooxygensies जस्तै एन्जाइमहरू समावेश गर्दछ, जसले अनुशासनहरू समावेश गर्दछ, यसैले मानव लिबर कलेजोनवादको नक्कल गर्दै।

Cyp450 गतिविधि र मेटाबोलिक सक्रियता

साइटोच्रोम P450 एन्जाइम परिवार (CYP450) पदार्थले धेरै फार्मास्यूटिकल, वातावरणीय रसायन र कार्सिनोगन लगायतका विभिन्न प्रकारका अनावश्यकताका सामानहरू खेल्छन्। प्रेरित मुसा लिभर S9 अंशले यी एन्जाइमहरू समावेश गर्दछ र रसायनहरूको रूपमा रसायनक्सक बन्न सक्ने र रक्तक्षेपण मात्र हुन सक्छ।

धेरै यौगिकहरू सुरुमा गैर-- विषाक्त रूपमा छन् तर कलेजोमा मेटाबोलिज्मले विषाक्त हुन सक्छ। यी प्रो - - - - mababolic सक्रियता र प्रो - कार्कोगोजेनहरू (प्रो क्यान्सरको कारणको लागि सक्रियता चाहिन्छ) मा एक S9 मेटाबोलिक सक्रियता प्रणाली समावेश गर्न सकिन्छ। Byp4500 जस्तै मेटाबोलिक एन्जाइमहरूको प्रेमी बिना यी पदार्थहरू मानक जेटोटोक्स्टिकता परीक्षणमा हानिकारक देखिन सक्छ।

विट्रो अड्डाहरूमा एडिएड गरिएको दर्जाित मुसा लिभर एसएचएसमा, अन्वेषकहरूले सीपी 4500 एन्जाइमको साथ कसरी अन्तरिक्षहरू नियन्त्रण गर्न सक्छन्। यो विशेष गरी औषधिहरूको लागि महत्त्वपूर्ण छ, साइपप्लूलिडिजेशिजका रूपमा थोरै औषधिहरूको फार्मामाइक्टिक्समा एक महत्वपूर्ण कदम हो।

प्रेरित मुसा लिभर CO9 को आवेदन

1. 1 AMES परीक्षण (OECD 471)

AMMES परीक्षण, दिशानिर्देशमा उल्लिखितOECD 471, सबैभन्दा राम्रो को एक हो - विकृतिलाई मूल्या assess ्कन गर्नका लागि ज्ञात र व्यापक रूपमा प्रयोग गरिएको विधिहरू। यसमा सल्मोनला ब्याक्टेरियाको तनावको पर्दाफास गर्नु समावेश छ कि यसले बेस्टेडरियामा फर्काउन ब्याक्टेरियाहरूलाई समर्थन गर्दछ।

मानव मेटाबोलिक प्रक्रिया अनुकरण गर्न, प्रेरित मुसा लिभर S9 अक्सर परीक्षण प्रणालीमा थपिन्छ। S9 अंशले सिपी 4500 सहित आवश्यक एन्जाइमहरू प्रदान गर्दछ, जुन कम्पाउन्डलाई अधिक प्रतिक्रियाशील रूपमा परिवर्तन गर्न आवश्यक पर्दछ जुन ब्याक्टेरिया डीएनएमा उत्परिवर्तन सक्छ। AMS परीक्षणको साथ एसएचको यो संयोजनले सिधै सीधा र मेटाबोलिक एक्टेटेड विकृतिविहीन संयधिक संयन्त्रको कारण विकृति क्षमताको अधिक मात्राको आकलनका लागि अनुमति दिन्छ।

2. 2.उत्परिवर्तन परीक्षणहरू (क्रोमोसोमेल वेयररेसन टेस्ट, माइक्रोन्यूक्टस परीक्षण, र भिट्रो अहंकारीमा)

AMES परीक्षणको अतिरिक्त, उत्परिवर्तन परीक्षणहरू रसायनको जीवाटिकक्स क्षमताको मूल्या ate ्कन गर्न प्रयोग गरिन्छ। यी परीक्षणहरू आनुवंशिक क्षतिको दायरा निर्धारणमा अधिक व्यापक हुन्छन्, क्लमोसोल उत्परिवर्तन, जीन उत्परिवर्तन, र माइक्रोपुलेटको गठन। प्रेरित मुसा लिभर S9 निम्न कारणहरूको लागि उत्परिवर्तन परीक्षणमा प्रयोग गरिन्छ:

माइक्रोन्युअलस परीक्षण (OECD 4 487)

यस परीक्षणले कम्मरमा कवचहरूको गठन पत्ता लगाउँदछ, जुन सानो, असाधारण निकायहरू छन्, क्रोमोसोम वा सम्पूर्ण क्रोमोमोमनको टुक्राहरू जुन सेल डिभिजनमा व्यावहारिकतामा समावेश गरिएको छैन। द माइक्रोनलस परीक्षणक्लोस्टोजेन्सेनिक पत्ता लगाउन सक्छ (क्रोमोजोम - ब्रेक गर्दै) र एनेुग्लोनिक (क्रोमोजोम नम्बर प्रभावकारी)। प्रेरित मुसा लिभर S9 यहाँ परीक्षण पदार्थ मेटाबोलिक रूपमा सक्रिय गर्न यहाँ प्रयोग गरीन्छ, किनकि केहि रसायनको रूपमा क्रीमोसोमल नोक्सान मात्र हुन्छ जब तिनीहरू लिभर एन्जाइमहरू द्वारा म्याटबिल भएका छन्। S9 भागले भिटिलोमा हुन सक्छ मेटाबोलिक सक्रियता अनुकरण गरेर परीक्षणको संवेदनशीलता बढाउँदछ।

क्रोमोसोमल वेयररेसन परीक्षण (OECD 47 473)

यो परीक्षणले एक पदार्थले ब्रेक, हटाउने, ट्रान्सलोग्रासको अन्य प्रकारहरू, वा अन्य प्रकारका टिप्पणीहरू हटाउनका लागि क्रीमोसोमहरूको संरचनात्मक क्षति निम्त्याउन सक्छ कि हुँदैन। माइक्रोन्युअलस परीक्षण जस्तै, कोChromosomal वेयररेसन परीक्षणमेटाबोलिक सक्रियताका साथ वा बिना लागू गर्न सकिन्छ। संभवित दर्जा लिभर S ke कलेजोमा मेटाबोलिक प्रक्रियाहरूको नक्कल गर्न टेस्ट प्रणालीमा थपिएको छ, जुन उनीहरूको मूल रूप मा क्रोमोॉजिक क्षति हुन सक्दैन तर कलेजो मस्तिष्क पछि गर्न सक्दछ।

तालिका 1। उत्परिवर्तन परीक्षणहरूको तुलनात्मक विचार

Hprt / HGPPRT Assay (OECD 4 476)

माHPRT / HGPPRT EMEY, चिनियाँ हम्स्टस्टरको संस्कृति (CHER वा v79) वा मानव लिम्फोबेल (TK6) कक्षहरू डाय-रिभिएटिस्ट प्रजातिहरूमा रूपान्तरण गर्न आवश्यक छ। एक संक्षिप्त उपचार पछि र सात दिनको अभिव्यक्ति अवधि पछि, कोषहरू 6h-thioguarine संग चुनौती छ; हाइपोक्सानथन-गुन्काइन फास्फेरोल्ससेरेफ्रेन्सफेरेड गन बाँच्नको लागि हानिकारक-फलक उत्कट बनाउने मात्र क्लोडहरू जीवित छन्। उत्परिवर्तन कोलोनीको तुलनामा समग्र व्यवहार्यताका लागि गणना गर्ने, अनुसन्धानकर्ताहरूले एक उत्कृष्ट आवृत्ति निर्धारण गर्छन्, यदि पुनर्जावर्ती र ऐतिहासिक नियन्त्रणहरूमा, जीनोटियोक्सिक क्षमतालाई संकेत गर्दछ।

TK Assays (oecd 49 0 र OECD 4766)

दTk अशायत या त L5178.Y माउस लिम्फोमाको कक्षहरू प्रयोग गर्दछ (OECD 49 90 0) वा CH CO कोषहरू (OECD 476) ईन्जिनियर क्रिराइन किनस मा हेटर फिर्ती। रासायनिक एक्सपोजर बमोजिम ± S9 मिक्स, कोषहरू पुन: प्राप्ति र ट्राइफलरोथेमेडमिडमिटेडमा मध्यम विमानमा प्लेटिन्छ, जसले TK-अपमानजनक कोषहरू मार्दछ। TK⁻ विरामीहरूले 10-1-14 दिन सम्म उपनिवेशहरू 10-1-14 दिन भन्दा बढी, साना-कोलनी उत्परिवर्तनकर्ताहरू प्राय: ठूला-कवनिक विकृतिहरू पोइन्ट विकृतिहरू प्रतिबिम्बित गर्दैछन्। HPRT / HGPRT Astay मा रूपमा, स्ट्रिटन्ट साइटोटोटिकता नियन्त्रण र सकारात्मक म्यूगोन बेन्चमार्कहरूले सुनिश्चितता र सकरात्मक म्युटेन बेन्चमार्कहरू अवलोकन गरे कि उत्कट आवधिक आवेदकको जीरोटिक जोखिममा छ।

4. । क्यान्सर जोखिम मूल्यांकन

प्रेरित मुसा लिभर S9 क्यान्सर मूल्या assess ्कन गर्नको लागि लक्षित गरी प्रयोग गरिएको छ - पदार्थहरूको सम्भाव्यताको कारण। मानव कलेजोमा हुने मेटाबोलिक प्रक्रियाहरू अनुकरण गरेर, S9 अंशले ट्राउन्डहरू पहिचान गर्न मद्दत गर्दछ जसले प्रतिक्रियाशील मैथेलिजहरूको गठन गर्न सक्छ र क्यान्सर निम्त्याउन सक्छ।

संक्षेप गरिएको हम्स्टर लिभर एस 9 को साथ AMES परीक्षण बढाउनुहोस्

युरोपियन औषधी एजेन्सी (EMA) द्वारा जारी गरिएको पछिल्लो दिशानिर्देशका अनुसार निश्चित एन - N - nitsraimine निष्क्रियहरू पत्ता लगाउन संवेदनशील हुनसक्दछ, विशेष गरी एन - nitsabodylaine (NDMAMETHYEAMITITINE (NDMAMETHYEITELEINE)। तसर्थ, संगेड एमेस परीक्षण, राष्ट्रिय केन्द्रले (एनएटीआर) को लागि विकसित गरेको (एनसीटीआर) को एक विभाजन अधिक भरपर्दो विकल्पको रूपमा सिफारिस गरिएको छ। संबेश्वर AMES परीक्षण प्रेरित हम्स्टर लिभर S9 को थैई शुरू भयो, जुन% 0% मुसा कल्वर S9 र% 0% हम्स्टर कलेज एसओएसईमा प्रदर्शन गरियो। मुसा र ह्यामस्टर डेमोसोमल सौजनहरू (S9s) साइटोच्रोम P450 enzeme को उपचार गर्न को लागी भव्य गाईवस्तुहरु बाट तयार हुनु पर्छ। प्रेरित हम्स्टर कलेजो S9 प्रयोग गरेर, यो विस्तारित परीक्षणले मानव मैलोपोलिज्म अनुकरण गर्दछ र परिणामहरूको विश्वसनीयता बढाउँदछ।

निष्कर्ष

विनियोक्षित मुसा कल्वर S ence जनटोटोक्सिकता परीक्षणको एक महत्वपूर्ण उपकरणको रूपमा सेवा गर्दछ, अन्वेषक र नियामक एजेन्सीहरूलाई रसायनहरूको विकृति र कार्किनोजेनिक सम्भावनालाई मद्दत गर्दछ। एक मेटाबोलिक सक्रियता प्रणाली प्रदान गरेर, यसले AMMES परीक्षण, उत्परिवर्तन परीक्षणहरू, र साइटोल गतिविधिलाई पत्ता लगाउन साइकोबोलिक सक्रियताका आवश्यकताहरू पत्ता लगाउन सक्ने क्षमतालाई बढावा दिन्छ। यसको अनुप्रयोगहरू नयाँ औषधि, रसायन, र उपभोक्ता उत्पादनहरूको सुरक्षाका लागि आवश्यक छन्। मानव जीवआर मेटाबोलिज्म सममूलनमा यसको भूमिकाको साथ, प्रेरित मुसा लिभर S9 अंश आधुनिक विषाक्त विज्ञान र नियामक सुरक्षा सुविधाहरूको अपरिहार्य भाग जारी रहन्छ।