CGT Innovative Therapy - Lentivirus - emballasjebil - T immunceller

CGT Innovative Therapy - Lentivirus - emballasjebil - T immunceller

Immuncelleterapi er en nyskapende kreftbehandling som forbedrer kroppens immunforsvar for å målrette og eliminere kreftceller. Nøkkelformer inkluderer cytokin - indusert mordercelleterapi, t - celleterapi og CAR - T celleterapi. CAR - T -terapi innebærer omprogrammering av T -celler for å uttrykke kimære antigenreseptorer (CAR) som spesifikt målretter tumorceller, og viser betydelig suksess i hematologiske kreftformer som leukemi og lymfom.

Nøkkelord: bil - t, lentiviral, lentiviral vektor, sporstoff lentivirus

Utarbeidelse av bil - T celleterapi

Generelt er de viktigste trinnene for å fremstille bil - T -celler som følger:

Figur Kilde: Dana - Farber Cancer Institute - CAR T - Cell Clinical Trials Hjelper flere myelompasienter tilbake til helse

1. 1.Sorting (T - Cellisolasjon)

Det første trinnet med å tilberede CAR - T -celler er å isolere T - celler fra de hvite blodcellene i pasientens perifere blod. Teknikker som immunomagnetisk perleseparasjon eller flytcytometri brukes vanligvis til å trekke ut CD3+- rike T - celler fra blodet. For å sikre cellens renhet, må sorteringsprosessen være veldig presis, noe som sikrer at et tilstrekkelig antall høye - kvalitet t - celler oppnås.

2. 2.Stimulering (T - Celleaktivering)

De ekstraherte t - cellene aktiveres in vitro, vanligvis ved bruk av enCD3 /CD28 T - Celler aktivering /ekspansjonssett. Aktiverte T -celler kommer inn i en aktiv tilstand, og forbereder dem for gentransfeksjon. Gjennom denne prosessen forbedres T -cellefunksjonen, og bidrar til påfølgende genetisk modifisering og amplifisering.

3. 3. Transfeksjon (genredigering)

Aktiverte T -celler gjennomgår gentransfeksjon for å uttrykke en kimær antigenreseptor (CAR). Denne prosessen bruker vanligvisLentiviral vektorå introdusere bilgener i T -celler. Lentivirus er et effektivt gentransduksjonsverktøy, med fordelen av å integrere målgenet (for eksempel bilgenet) i cellegenomet. Ved å infisere T -celler og transfisere bilgenet til T -celle -DNA, gjør lentiviruset T -celler å uttrykke biler lang - termin. Bilgenet inkluderer et enkelt - kjedevariabelt fragment (SCFV) av et antistoff som gjør det mulig for T -celler å gjenkjenne spesifikke antigener på overflaten av tumorceller og sette i gang en immunrespons ved å aktivere signalregioner av T -celler. Som vist i figur 2. har lentiviral transfeksjon egenskapene til høy effektivitet og stabilitet, slik at bilgenet kan uttrykkes i T -celler i lang tid.

Figur Kilde: Singapore Car - T Cell Therapy

4. 4.Amplifisering (celleproliferasjon)

Etter transfeksjon kommer bil - T -celler inn i forsterkningsstadiet, der vekstfaktorer som somIl - 2blir lagt til for å fremme celleproliferasjon. Hensikten med denne prosessen er å sikre at et tilstrekkelig antall CAR - T -celler er tilgjengelige for eventuell infusjon i pasienten. Amplifiseringsprosessen må utføres under sterile forhold for å garantere cellekvalitet og mengde.

5. 5. Kvalitetskontroll (QC)
6. Før reinfusjon i pasienten er kvalitetskontroll avgjørende under forberedelsesprosessen. Forberedte bil - T -celler gjennomgår streng testing tilsikre deres renhet, aktivitet, transfeksjonseffektivitet og overholdelse av behandlingsstandarder. I tillegg er testing for celleforurensning eller bivirkninger nødvendig for å sikre sikkerhet og terapeutisk effekt av cellene etter reinfusjon i pasienten.

Importance av lentivirus transfeksjon i immunceller

Lentiviral transfeksjonsteknologi er avgjørende i immuncelleterapi, spesielt for genredigering og celleteknikk. Lentivirale vektorer, avledet fra modifisert HIV - 1, er mye brukt på grunn av deres evne til å integrere gener i vertsgenomet, noe som sikrer stabilt, langt - terminuttrykk. De kan infisere både delende og ikke -delende celler, og deres sikkerhet er forbedret ved å modifisere nøkkelgener for å forhindre replikasjon. Disse vektorene brukes nå ofte i genterapi, genredigering og cellebiologiforskning for deres effektivitet og holdbarhet i genlevering.

Figur Kilde: obiosh.com/product/ Skjematisk diagram over lentivirusemballasje og lentivirus transfeksjonsprosess i 293T -celler

1. Effektiv gentransduksjon

Lentiviral vektor kan effektivt levere målgener, for eksempel bilgenet, i immunceller og integrere disse genene stabilt i det cellulære genomet, noe som sikrer at bilgenet kontinuerlig uttrykkes under celledeling og spredning. Denne høye - Effektivitetstransduksjonsevnen er grunnleggende for suksessen med immunterapi.

2. Lower immunogenisitet 

Sammenlignet med andre virale vektorer har lentivirus en lavere immunogenisitet. Som et resultat, når lentivirus brukes til å transdusere immunceller, genererer pasientens immunforsvar en relativt svakere immunrespons på viruset. Dette bidrar til å minimere bivirkninger, spesielt i langs overlevelse av celler etter infusjon, og dermed forhindre overdreven immunavvisning.

3. høy tilpasningsevne til immunceller

Lentiviral vektor er i stand til effektivt å transducere forskjellige typer immunceller,spesielt T -celler og NK -celler. Gjennom lentiviral transduksjon kan immunceller tilegne seg tumor - Spesifikke gjenkjennelsesevner, og dermed styrke deres kapasitet til å målrette og drepe tumorceller.

4. Beskrivelse av transduserte effektorceller i målcellegjenkjenning 

I immunterapi,transduserte effektorcellerHenvis til immunceller som etter transduksjon uttrykker bil og utøver anti - tumoraktivitet. Lentivirale vektorer kan nøyaktig levere bilgenet inn i disse effektorcellene, slik at de kan gjenkjenne og målrette tumorceller.Målcellerer tumorcellene som blir identifisert og ødelagt av disse immuncellene. Gjennom lentiviral transduksjon kan immunceller forbedre deres spesifisitet i å gjenkjenne og drepe tumorceller, og dermed forbedre terapeutisk effekt.

I denne sammenhengen har IPhase, ledende innen in vitro -forskningsreagenser, utviklet et lentivirus -emballasjesett og lentivirus -konsentrasjonsreagens for å forenkle kompleksiteten i transduksjon for immunterapi kunder og forbedre suksessraten for stabil gentransfeksjon. Disse produktene tilbyr en - Stoppløsning for kunder.

IPhase lentivirusPRodukter

IPhase Lentivirus -emballasjesettetinneholder alle essensielle reagenser som kreves forLentivirusemballasje, forenkle den eksperimentelle prosessen og sparer tid og krefter betydelig. Dette settet inkluderer:

• Lentivirusemballasje plasmidblanding
• Transfekt reagens
• EGFP -plasmid
• IPhase lentivirus konsentrasjonsreagens

Dette settet effektiviserer virkelig eksperimentet! Uten behov for komplisert reagenspreparat, kan lentivirusemballasje effektivt fullføres ved å bare følge de medfølgende instruksjonene.De unike fordelene med settet inkluderer kort emballasjetid, høy viral titer og enkel drift, noe som gjør den ideell for nybegynnere i lentivirusemballasje. Hvert sett med reagenser gjennomgår streng kvalitetskontroll for å sikre nøyaktige, pålitelige og reproduserbare resultater, noe som forbedrer transfeksjonseffektiviteten og stabiliteten til virale vektorer betydelig, og gir dermed kraftig teknisk støtte for immuncellepreparat.

For å hjelpe kunder med å spare kostnader, har IPhase også utviklet og produsert lentivirus -konsentrasjonsreagenset, og tilbyr en rask og enkel konsentrasjonsløsning.Ved å bare blande lentivirus -supernatanten med konsentrasjonsreagenset, etterfulgt av en kort inkubasjon og sentrifugering ved bruk av en standard sentrifuge, kan lentivirale partikler raskt konsentreres. Denne prosessen krever ikke en ultracentrifuge, noe som gjør den til et praktisk og kostnad - effektivt alternativ for de fleste laboratoriebrukere.

I korte trekk forbedrer IPhase Lentivirus -konsentrasjonsreagenset ikke bare transfeksjonseffektiviteten, men gir også høy - kvalitetsviral vektorstøtte for immuncellepreparat. Det er et viktig produkt for rutinemessige eksperimenter, preklinisk forskning og andre applikasjonsområder.

Oppsummert representerer immunterapi, spesielt CAR - T -celle- og CAR - NK -celleterapier, en ny retning i moderne kreftbehandling. Gjennom presise prosesser som cellesortering, aktivering, transduksjon, ekspansjon og kvalitetskontroll, kan forskere forberede effektive og sikre immuncelleprodukter for pasienter, noe som muliggjør målrettet kreftbehandling.Lentiviral transduksjon, som en kjerneteknologi, spiller en kritisk rolle i utarbeidelsen av CAR - T og CAR - NK -celler på grunn av dens høye effektivitet og stabilitet.Med kontinuerlige teknologiske fremskritt, har immunterapi potensialet til å tilby innovative behandlingsalternativer for flere pasienter, og gir større klinisk verdi. I fremtiden forventes immunterapi å bringe revolusjonerende terapeutisk håp til flere kreftpasienter.

For å imøtekomme behovene til gentransduksjon, uttrykk og sykdomsforskning, tilbyr IPHase lentivirusemballasjesett, lentivirus konsentrasjonsreagenser og sporstofflentivirus. Disse sporstofflentivirusene er pakket med grønt fluorescerende protein (GFP), rødt fluorescerende protein mCherry og luciferase, noe som muliggjør enkel sporing av målceller både in vitro og in vivo.

Dessuten kan IPHASE også tilby to pre -pakket sporingslentivirus: GFP & luciferase og mcherry & luciferase. Disse sporstoffene kan velges eller kombineres basert på eksperimentelle behov, strømlinjeformende arbeidsflyter og forbedre effektiviteten for reell - Tidssporing og overvåking av målceller.

IPhaseImmunoterapiRElatertPRodukter

I tillegg til lentivirus - relaterte produkter som brukes i CAR - T eller CAR - NK Therapies, har IPHASE, som ledende innen in vitro forskningsreagenser, også gitt betydelige bidrag for å støtte innovasjoner innen CGT (celle- og genterapi) og andre felt. Iphase har utviklet og produsert leukocytter og PBMCs (perifere blodmononukleære celler) isolert gjennom leukaferese, sammen med forskjellige immuncelleisolasjonssett, for å støtte den raske utviklingen av immunterapi.

IPhase -produkter tilbyr følgende fordeler, oget analysebevis (COA)Bekreftet av IPhase er tilgjengelig for hver batch.

Sikkerhet 

IPhase -produkter er hentet fra sunne givere/dyr som har gjennomgått grundig pre - screening, med negative resultater for viral testing (HIV - 1/2, HBV, HCV, syfilis).

Etterlevelse  

IPhase gir informerte samtykkeskjemaer signert av giverne, med klar og sporbar kildeverifisering.

Profesjonalitet

Produktene levert av Iphase, oppnådd gjennom leukaferese, håndteres av trente fagpersoner. Hver batch er ledsaget av en tilsvarende COA, og produktene blir transportert under en streng kald kjede for å sikre sikkerhet, rask levering og kvalitetssikring.

Kundeservice

IPhase tilbyr høy - Kvalitet etter - salgstjeneste, og sikrer en jevn og uavbrutt opplevelse gjennom hele prøveprosessen.