Wprowadzenie doMikrosomy wątrobyi frakcje S9
W dziedzinie metabolizmu leku i farmakokinetyki kluczowe jest zrozumienie zawiłości mikrosomów wątroby i frakcji S9. Te systemy in vitro mają kluczowe znaczenie we wczesnych stadiach odkrywania leków, zapewniając wgląd w sposób, w jaki nowe jednostki chemiczne (NCE) są metabolizowane przez wątrobę. Zdolność do przewidywania stabilności metabolicznej i potencjalnych interakcji związanych z lekami jest nieoceniona, oszczędzając czas i zasoby w rozwoju nowych farmaceutyków. Ten artykuł zagłębia się w różnice między mikrosomami wątroby a frakcjami S9, badając ich skład, funkcjonalność, zalety i ograniczenia.Skład i struktura mikrosomów wątroby
● Mikrosomy w ramach retikulum endoplazmatycznego
Mikrosomy wątroby są pęcherzyków - Podobnie jak artefakty pochodzące z retikulum endoplazmatycznego w komórkach eukariotycznych. Powstają one, gdy komórki są rozkładane podczas procesu homogenizacji, co powoduje sedymentację retikulum endoplazmatycznego. Ta frakcja subkomórkowa jest wzbogacona o enzymy związane z błoną i jest najważniejsze w badaniu metabolizmu leku, szczególnie reakcji fazy I.● Zaangażowane kluczowe enzymy: cytochrom P450S i UGTS
Wysokie stężenie enzymów cytochromu P450 (CYP) w mikrosomach wątroby jest ich cechą definiującą. Enzymy te odgrywają kluczową rolę w oksydacyjnym metabolizmie ogromnego zakresu ksenobiotyków, w tym leków i toksyn środowiskowych. Obecne są również difosforan urydyny - glukuronozylotransferazy (UGT), które przyczyniają się do koniugacji, a następnie eliminacji metabolitów, oznaczając początkowy krok w kierunku zrozumienia fazy I i niektórych reakcji fazy II.Skład i struktura frakcji S9
● S9 jako połączenie frakcji mikrosomalnych i cytozolowych
Frakcja S9, często określana jako supernatant 9000G, jest składnikiem subkomórkowym uzyskanym z homogenatów wątroby poprzez różnicową wirowanie. W przeciwieństwie do mikrosomów zawierających głównie enzymy retikulum endoplazmatyczne - Frakcja S9 obejmuje zarówno enzymy mikrosomalne, jak i cytozolowe, prezentując bardziej kompleksowy profil enzymatyczny.● Enzymy obecne w S9, w tym faza I i II
Frakcje S9 zapewniają bogatsze środowisko enzymatyczne, otaczające oba enzymy fazy I, takie jak CYP, i apartament enzymów fazy II, takich jak sulfotransferazy, glukuronozylotransferazy i transferazy glutationu - S - Ta tablica pozwala na szersze transformacje metaboliczne, symulując środowisko wątroby in vivo dokładniej niż same mikrosomy.Funkcjonalność: metabolizm fazy I i fazy II
● Różnice w aktywności enzymu między mikrosomami a S9
Różnica podstawowa polega na zakresie enzymatycznym. Mikrosomy wątroby stanowią przede wszystkim reakcje metaboliczne fazy I, obejmujące utlenianie, redukcję i hydrolizę. Reakcje te wprowadzają lub narażają grupy funkcjonalne na cząsteczkach leku, torując drogę reakcjom fazy II. Natomiast frakcje S9 obejmują obie fazy I i II, ułatwiając w ten sposób reakcje koniugacyjne, których mikrosomy nie mogą wykonać niezależnie.● Znaczenie fazy I i II w metabolizmie leków
Sekwencyjny charakter reakcji fazy I i II podkreśla ich znaczenie w metabolizmie leku. Modyfikacje fazy I ogólnie przygotowują związki do fazy II, które zwykle obejmują koniugację w celu zwiększenia rozpuszczalności, pomagając w procesie wydalania. Zrozumienie tych faz jest niezbędne do przewidywania biodostępności leku, skuteczności i potencjalnej toksyczności.Zastosowania w badaniach metabolizmu leków
● Zastosowanie w badaniach ADME: absorpcja, dystrybucja, metabolizm, eliminacja
Mikrosomy wątroby i frakcje S9 są kluczowe w badaniach ADME, które oceniają absorpcję, dystrybucję, metabolizm i eliminację kandydatów na leki. Badania te mają kluczowe znaczenie w określaniu profilu farmakokinetycznego leków, dostarczając niezbędnych danych, które informują o dawkowaniu, potencjalnych interakcjach i skutkach ubocznych.● Badania porównawcze: mikrosomy vs. S9 w odkrywaniu leków
Analiza porównawcza między mikrosomami i frakcjami S9 ujawnia, że chociaż oba mają zastosowania, frakcje S9 oferują bardziej holistyczny obraz stabilności metabolicznej z powodu włączenia enzymów fazy II. Ta kompleksowa analiza pomaga w identyfikacji szlaków metabolicznych, które mogą nie być widoczne przy samych mikrosomach wątroby.Zalety mikrosomów wątroby
● Koszt - Skuteczność i dostępność
Mikrosomy wątroby są preferowane za ich koszt - Skuteczność i szeroko rozpowszechniona dostępność. Procesy ich przygotowania i użycia są dobrze ustalone, co czyni je praktycznym wyborem dla wielu laboratoriów.● Wysoka przepustowość i kompatybilność automatyzacji
Prostota testów mikrosomów sprawia, że są one podatne na wysoką przepustowość i automatyzację, co jest niezbędną funkcją szybkiego badania dużych bibliotek związków. Ta zaleta ma kluczowe znaczenie dla usprawnienia rurociągu odkrywania leków, umożliwiając wczesną identyfikację obiecujących kandydatów.Zalety frakcji wątroby s9
● Kompleksowa reprezentacja metaboliczna
W przypadku enzymów fazy I i II frakcje S9 oferują pełniejszą ocenę losu metabolicznego związku. Ta kompleksowa reprezentacja jest szczególnie przydatna do identyfikacji potencjalnych metabolitów na początku procesu opracowywania leków.● Włączenie metabolizmu fazy II i rozważań dotyczących kosztów
Uwzględnienie enzymów fazy II oznacza, że frakcje S9 mogą zapewnić wgląd w reakcje koniugacyjne, przewidując, w jaki sposób leki będą przetwarzane w ciele. Chociaż mogą wymagać dodatkowych kofaktorów do niektórych reakcji, nadal oferują korzystną równowagę kosztów i użyteczności w ustawieniach o wysokiej przepustowości.Ograniczenia mikrosomów wątroby
● Brak enzymów cytozolowych wpływających na pełne dane metabolizmu
Znaczącym ograniczeniem mikrosomów wątroby jest ich brak enzymów cytozolowych, które są niezbędne dla pełnego obrazu metabolicznego. Ta nieobecność oznacza, że niektóre metabolity mogą być pomijane, brakuje kluczowych ścieżek ważnych dla zrozumienia bezpieczeństwa i skuteczności narkotyków.● Wymagania dodatkowych systemów do badania fazy II
Aby kompleksowo zbadać reakcje fazy II, przy użyciu mikrosomów konieczne jest dodatkowe systemy lub suplementacja enzymami zewnętrznymi/kofaktorami. Ten wymóg może skomplikować projekt i interpretacja testu.Ograniczenia frakcji wątroby S9
● Potrzeba czynników CO -
Pomimo ich kompleksowego charakteru frakcje S9 często wymagają dodania kofaktorów do wspierania niektórych działań enzymatycznych. Ta potrzeba może wprowadzić zmienność i złożoność do testów. Ponadto rozcieńczenie enzymów we frakcjach S9, w porównaniu z izolowanymi preparatami, może wpływać na wrażliwość wykrywania dla niektórych reakcji metabolicznych.● Wyzwania dotyczące przechowywania i przygotowywania w porównaniu z mikrosomami
Przygotowanie i przechowywanie frakcji S9 może być trudniejsze niż w przypadku mikrosomów. Właściwe utrzymanie aktywności enzymatycznej poprzez staranne przetwarzanie i przechowywanie ma kluczowe znaczenie dla uzyskania wiarygodnych wyników, nieznacznie komplikując ich zastosowanie w badaniach na dużą skalę.Wnioski i zalecenia
● Podsumowanie najlepszych - Użyj scenariuszy dla każdej metody
Mikrosomy wątroby i frakcje S9 mają wyraźne mocne i słabe strony. Mikrosomy wątroby są najlepiej stosowane, gdy kosztowne - Skuteczne, potrzebne są szybkie przesiewowe badania metabolizmu I. Natomiast frakcje S9 lepiej nadają się do kompleksowych badań wymagających wglądu w metabolizm fazy I i II. Wybór odpowiedniego systemu zależy od konkretnych wymagań badań i dostępnych zasobów.● Sugestie dotyczące optymalnego stosowania w procesach opracowywania leków
Dla osób na wczesnym etapie rozwoju leków stosowanie wysokiej jakości mikrosomów wątroby z renomowanego dostawcy mikrosomów wątroby lub producenta mikrosomów wątroby może usprawnić wstępne badania. W miarę postępów badań, włączanieWątroba S9Frakcje, prawdopodobnie pochodzące z niezawodnej fabryki mikrosomów wątroby, zapewnią pełniejszy obraz stabilności metabolicznej, zapewniając solidną ocenę kandydatów na leki.● Wprowadzenie doIPhase
Z siedzibą w Północnej Walii w Pensylwanii, IPhase Biosciences to „wyspecjalizowane, nowatorskie i innowacyjne” wysokie - Enterprise technologiczne integrujące badania, rozwój, produkcję, sprzedaż i usługi techniczne innowacyjnych odczynników biologicznych. Wykorzystując obszerną wiedzę i pasję do badań naukowych, nasz zespół naukowy jest zaangażowany w dostarczanie wysokiej jakości innowacyjnych odczynników biologicznych naukowcom na całym świecie i pomaganiu badaczom podczas ich naukowców, aby pomóc w osiągnięciu ich celów badawczych. IPTION IPEDING IPETING IPETING „Innowacyjne odczynniki, badanie przyszłości”, ustanowiło wiele obiektów badawczo -rozwojowych, centrów sprzedaży, magazynów i partnerów dystrybucyjnych na całym świecie.
Czas postu: 2024 - 11 - 26 16:50:02