Matryca biologiczna ludzka i zwierząt ślepej matrycy biologicznej do rozwoju metod bioanalitycznych i walidacji metody bioanalitycznej

1 produkty iPhase

2 puste biomatrix

Różne rodzajemacierze biologiczne, w tym pusta pełna krew, surowica, plazma, żółć, Mleko, mocz, kał, zawartość jelit, narząd od pejzażu, szklisty humor, humor wodny, płyn mózgowo -rdzeniowy itp., Zebrane od zdrowych osób lub zdrowych zwierząt eksperymentalnych, są wspólnie określane jako puste matryce biologiczne.

3 Konieczność stosowania pustych macierzy biologicznych w badaniach przedklinicznych

In Badania przedkliniczne leku, pusta matryca biologiczna jest kamieniem węgielnym do ustanowienia i walidacjiMetody analizy biologicznej. Stosując puste matryce zdrowych osób lub zwierząt eksperymentalnych, naukowcy mogą dokładnie przygotować standardy kalibracyjne i próbki kontroli jakości, ocenić specyficzność, wrażliwość, precyzję i macierz metod analitycznych oraz zapewnić wiarygodność wyników kwantyfikacji stężenia leku.

4 Walidacja metody biologicznej i ustanowienie i zastosowanie pustej matrycy biologicznej

Zgodnie z wymogami wytycznych FDA/EMA, w ustanowieniu i walidacji metod analizy macierzy biologicznej, należy zastosować puste matryce biologiczne, aby zapewnić dokładność i niezawodność metody analizy. Zwłaszcza w analizie LC - MS/MS różnice w składnikach matrycy z różnych źródeł mogą znacząco wpłynąć na wydajność jonizacji. Pusta macierz jest wykorzystywana głównie do przygotowywania standardów kalibracji, przygotowywania próbek kontroli jakości do badania swoistości, selektywności, precyzji, dokładności, efektów macierzy, szybkości odzyskiwania, stabilności, liniowości rozcieńczenia, efektów interferencyjnych itp. Metod analitycznych. Selektywność i efekt matrycy metody wykrywania wymagają wyższych wymagań dla macierzy pustej.

5 Scenariusze zastosowania macierzy pustej żółciowej w opracowywaniu leków

Sztuczna matryca żółciowa (Symulowana macierz żółci)jest rozwiązaniem syntetycznym, które symuluje naturalne składniki żółciowe i jest wykorzystywane do metabolizmu leków, toksykologii i badań analizy biologicznej.Matryca pustej żółciMa ważną wartość zastosowania w następujących scenariuszach opracowywania leków: badania farmakokinetyczne (PK) leków w układzie wątroby, wchłanianie i badania metabolizmu pierwszego przejścia (LC - MS/MS).

6 leków w systemie wątroby

W opracowywaniu leków dla układu wątroby, macierz żałówek pustej odgrywa niezastąpioną rolę jako znormalizowany system symulacji in vitro w badaniach analizy farmakokinetycznej (PK), toksykologicznej i biologicznej.

6.1 Oceń charakterystykę wydalania żółci

Badania nad krążeniem wątroby: żółć jest jednym z ważnych ścieżek wydalania leków i ich metabolitów. Za pomocą sztucznej macierzy żółciowej można symulować zmiany stężenia leków w żółciach, aby ocenić, czy są one wchłaniane przez wątrobowe krążenie jelit.

Oznaczanie wskaźnika klirensu żółciowego: W przypadku leków, które są aktywnie wydalane przez żółć (takie jak statyny i niektóre antybiotyki), sztuczna żółć (symulowana żółć) może pomóc określić ilościowo wydajność prześwitu i zoptymalizować schemat dawkowania.

6.2 Badaj wpływ kwasów żółciowych na wchłanianie leków

Efekt rozpuszczenia: kwasy żółciowe mogą promować rozpuszczanie i wchłanianie jelit leków lipofilowych, takich jak witamina D. Sztuczna żółć może symulować różne składy kwasu żółciowego i oceniać ich wpływ na biodostępność leku.

Interakcje z kwasem żółciowym: niektóre leki (takie jak liraglutyd) mogą konkurować z transporterami kwasu żółciowego (takimi jak BSEP, MRP2), a sztuczną żółć można wykorzystać do badania takich interakcji, aby uniknąć potencjalnych zagrożeń zastrzeżenia żółciowego.

6.3 Ocena ryzyka hepatotoksyczności i cholestazy

Model cholestazy indukowanej przez leki: sztuczna żółć może symulować warunki patologiczne, takie jak niedrożność przewodu żółciowego i hiperbilirubinemia, i jest stosowana do wykrycia, czy leki zakłócają przepływ żółci lub uszkodzić komórki przewodu żółciowego.

Analiza biomarkera: Dodając określone składniki, takie jak bilirubina, kwasy żółciowe i czynniki zapalne, można ocenić wpływ leków na składniki żółciowe i przewidzieć bezpieczeństwo kliniczne.

6.4 Etyczne i praktyczne zalety zastępowania naturalnej żółci

Rozwiązanie problemu niedoboru próbki: Naturalna żółć należy uzyskać metodami inwazyjnymi, takimi jak cewnikowanie przewodu żółciowego, podczas gdy sztuczna żółć może być nieskończenie przygotowana w celu uniknięcia ograniczeń etycznych.

Spójność partii: Skład sztucznej macierzy (macierz symulowanej) jest kontrolowany, zmniejszając wpływ indywidualnych różnic w naturalnej żółci na wyniki eksperymentalne.

6.5 Wspieraj rozwój metod analizy biologicznej LC - MS/MS

Korekta efektu macierzy: złożony skład naturalnej żółci (sole o wysokiej zawartości żółci, fosfolipidy, pigmenty) może łatwo prowadzić do supresji lub wzmocnienia jonów w analizie LC - MS/MS. Sztuczna matryca żółciowa (symulowana macierz żółciowa) może zapewnić stabilne tło, optymalizować czułość i dokładność metody.

7 Badania gatunków krzyżowych

Skład żółci różni się znacznie w zależności od różnych zwierząt (szczurów, psów, małp), a sztuczna żółć może standaryzować różnice gatunków i poprawić tłumaczenie danych przedklinicznych.

7.1 Cynomolgus Monkey Żółć (żółć NHP)

Żółć małpy Cynomolgus jest wysoce podobna do ludzi pod względem składu (takiego jak profil kwasu żółciowego) i ekspresji transportera leku (takiego jak BSEP, MRP2), co czyni go złotym standardowym modelem naczelnym nie -ludzkim do oceny wydalania żółci w żółciowej i interakcji kwasu żółciowego.

7.2 Bile Beagle Dog

Zawartość fosfolipidów w żółci Beagle jest stosunkowo wysoka, co sprawia, że ​​jest odpowiednia do badania wydalania żółci i wchłaniania leków lipofilowych zależnych od żółciowych. Jednak różnice w składzie kwasu żółciowego między beagle i ludźmi wymagają kalibracji poprzez sztuczne matryce.

7.3 Żółć szczura SD

Objętość zbierania żółci szczurów SD jest stosunkowo duża (~ 1 ml/czas), co jest szeroko stosowane do badań w krążeniu jelit w wątrobie i badania hepatotoksyczności leku. Należy jednak zauważyć, że ich wysoka bilirubina może zakłócać analizę LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 Żółć myszy

Mysz CD - 1 ma małą objętość żółciową (50 - 200 μl), co czyni je odpowiednimi do badania mechanizmów modeli modyfikacji genów (takich jak szlak FXR/PXR), ale do adaptacji potrzebne są techniki mikro ilościowe.

7.5 Myszy żółć C57BL/6

Mysz C57BL/6 jest powszechnie stosowana w modelach chorób metabolicznych, a zmiany w ich składzie żółciowym mogą odzwierciedlać warunki patologiczne, wymagające zastosowania sztucznej macierzy żółciowej do symulacji patologii.

Powyższe modele należy połączyć ze sztuczną matrycą żółciową, aby kontrolować różnice gatunków i optymalizować porównywalność gatunków między metodami LC - MS/MS.

Wniosek

Sztuczna matryca żółciowa, jako kluczowe narzędzie do symulacji funkcji naturalnej żółci, odgrywa niezastąpioną rolę w rozwoju leków wątroby. Standaryzację składu żółci różnych gatunków (takich jak małpy Cynomolgus, psy beagle, szczury SD, szczury CD - 1, szczury C57BL/6), sztuczna macierz żółci skutecznie rozwiązuje podstawowe wyzwania, takie jak ograniczenia etyczne, różnice indywidualne i patologiczna symulacja stanu naturalnych próbek, znacząco zwiększając wiarygodność i translacyjną badania leku.

Wraz z rozwojem medycyny precyzyjnej sztuczna matryca żółciowa będzie dalej połączyć patologiczne elementy specyficzne i technologię mikroprzepływową w celu dynamicznego symulacji mikrośrodowiska wątroby i pęcherzyka żółciowego, zapewniając silniejsze poparcie dla innowacyjnego rozwoju leków.

Słowa kluczowe:pusta analiza biologiczna, próbka matrycy biologicznej, analiza biomatryki, ludzka żółć, żółć zwierzęta, próbka żółciowa, sztuczna żółć, symulowana żółć, żółć NHP, żółta małżeński Cynomolgus, rozwój metody bioanalitycznej, walidacja metody bioanalitycznej.

Odniesienie

Li T, Chiang JY. Sygnalizacja kwasu żółciowego w chorobie metabolicznej i terapii leczniczej. Pharmacol Rev. 2014 październik; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.