Bilă umană și animală a matricei biologice goale pentru dezvoltarea metodei bioanalitice și validarea metodei bioanalitice

1 produse ifase

2 biomatrix gol

Diverse tipuri dematrice biologice, inclusiv sânge întreg gol, ser, plasmă, bilăLaptele, urina, fecalele, conținutul intestinal, organul visceral, umorul vitros, umorul apos, lichidul cefalorahidian etc., colectate de la subiecți sănătoși sau animale experimentale sănătoase, sunt denumite în mod colectiv matrici biologice goale.

3 Necesitatea utilizării matricilor biologice goale în studiile preclinice

In Cercetări preclinice de droguri, Matricea biologică goală este piatra de temelie pentru stabilirea și validareaMetode de analiză biologică. Folosind matrice goale de la subiecți sănătoși sau animale experimentale, cercetătorii pot pregăti cu exactitate standardele de calibrare și eșantioanele de control al calității, pot evalua efectele specificității, sensibilității, preciziei și matricei ale metodelor analitice și să asigure fiabilitatea rezultatelor cuantificării concentrației medicamentului.

4 Validarea metodei biologice și stabilirea și aplicarea matricei biologice goale

După cum solicită orientările FDA/EMA, în stabilirea și validarea metodelor de analiză a matricei biologice, trebuie utilizate matrice biologice goale pentru a asigura exactitatea și fiabilitatea metodei de analiză. Mai ales în analiza LC - MS/MS, diferențele dintre componentele matricei din diferite surse pot afecta semnificativ eficiența ionizării. Matricea necompletată este utilizată în principal pentru prepararea standardelor de calibrare, pregătirea eșantioanelor de control al calității pentru examinarea specificității, selectivității, preciziei, preciziei, efectelor matricei, ratei de recuperare, stabilității, liniarității diluției, efectelor de interferență etc. ale metodelor analitice. Efectul de selectivitate și matrice al metodei de detectare necesită cerințe mai mari pentru matricea necompletată.

5 Scenarii de aplicare a matricei biliene biliene în dezvoltarea drogurilor

Matricea biliară artificială (Matricea biliară simulată)este o soluție sintetică care simulează componentele biliare naturale și este utilizată pentru metabolismul medicamentelor, toxicologia și cercetarea analizei biologice.Matricea necompletată biliarăAre o valoare importantă de aplicare în următoarele scenarii de dezvoltare a medicamentelor: Studii farmacocinetice (PK) ale medicamentelor cu sistemul hepatobiliar, studiile de absorbție și metabolismul de absorbție și prima trecere a medicamentelor orale, studiile de interacțiune a acidului biliar, evaluarea hepatotoxicității și studiile stazei biliare și dezvoltarea metodelor de analiză biologică (LC - MS/MS).

6 medicamente cu sistem hepatobiliar

În dezvoltarea medicamentelor pentru sistemul hepatobiliar, matricea bilă bilă joacă un rol de neînlocuit ca un sistem standardizat de simulare in vitro în cercetarea farmacocinetică (PK), toxicologică și analiză biologică.

6.1 Evaluează caracteristicile excreției biliare ale medicamentelor

Cercetări privind circulația hepatointestinală: Bile este una dintre căile importante pentru excreția medicamentelor și metaboliții acestora. Folosind matricea biliară artificială, modificările de concentrare ale medicamentelor în bilă pot fi simulate pentru a evalua dacă sunt reabsorbite prin circulația intestinală hepatică.

Determinarea ratei de clearance biliene: pentru medicamentele care sunt excretate activ prin bilă (cum ar fi statine și anumite antibiotice), bila artificială (bilă simulată) poate ajuta la cuantificarea eficienței de clearance și la optimizarea regimului de dozare.

6.2 Studiați efectul acizilor biliari asupra absorbției medicamentului

Efectul de solubilizare: Acizii biliari pot promova dizolvarea și absorbția intestinală a medicamentelor lipofile, cum ar fi vitamina D. Bilă artificială, poate simula diferite compoziții de acid biliar și poate evalua impactul acestora asupra biodisponibilității medicamentelor.

Interacțiuni cu acid biliar medicamentos: Unele medicamente (cum ar fi liraglutida) pot concura cu transportatorii de acid biliar (cum ar fi BSEP, MRP2), iar bilia artificială pot fi utilizate pentru a studia astfel de interacțiuni pentru a evita potențialele riscuri de stază biliară.

6.3 Evaluarea riscului de hepatotoxicitate și colestază

Modelul de colestază indus de droguri: bila artificială poate simula afecțiuni patologice, cum ar fi obstrucția canalului biliar și hiperbilirubinemia și este utilizată pentru a detecta dacă medicamentele interferează cu fluxul biliar sau deteriorarea celulelor canalului biliar.

Analiza biomarkerului: Prin adăugarea unor componente specifice, cum ar fi bilirubina, acizii biliari și factorii inflamatori, poate fi evaluat impactul medicamentelor asupra componentelor biliare și poate fi prevăzută siguranța clinică.

6.4 Avantaje etice și practice ale înlocuirii bilă naturală

Abordarea problemei de penurie a eșantionului: Bile naturale trebuie să fie obținută prin metode invazive, cum ar fi cateterizarea cu conducte biliare, în timp ce bila artificială poate fi pregătită infinit pentru a evita limitările etice.

Consistența lotului: compoziția matricei artificiale (matricea simulată) este controlabilă, reducând impactul diferențelor individuale în bila naturală asupra rezultatelor experimentale.

6.5 Susțineți dezvoltarea metodelor de analiză biologică LC - MS/MS

Corecția efectului matricial: Compoziția complexă a biliei naturale (săruri biliare mari, fosfolipide, pigmenți) poate duce cu ușurință la suprimarea ionilor sau la îmbunătățirea analizei LC - MS/MS. Matricea biliară artificială (matricea biliară simulată) poate oferi un fundal stabil, optimiza sensibilitatea și precizia metodei.

7 Cercetare Cross Species

Compoziția biliei variază foarte mult între diferite animale (șobolani, câini, maimuțe), iar bilia artificială poate standardiza diferențele de specii și poate îmbunătăți translabilitatea datelor preclinice.

7.1 Cynomolgus Monkey Bile (NHP Bile)

Bileul maimuței Cynomolgus este extrem de asemănătoare cu cea a oamenilor în ceea ce privește compoziția (cum ar fi profilul acidului biliar) și expresia transportorului de medicamente (cum ar fi BSEP, MRP2), ceea ce face ca acesta să fie standardul de aur non -uman Prime, pentru evaluarea excreției biliare hepatice și a interacțiunilor de acid biliar medicamentos.

7.2 Bile Beagle Dog

Conținutul de fosfolipid din bilia Beagle este relativ ridicat, ceea ce îl face potrivit pentru studierea excreției biliare și a absorbției dependente de sare biliară a medicamentelor lipofile. Cu toate acestea, diferențele de compoziție a acidului biliar dintre beagle și oameni necesită calibrare prin matrici artificiale.

7.3 Bilă de șobolan SD

Volumul de colectare a biliei de șobolani SD este relativ mare (~ 1 ml/timp), care este utilizat pe scară largă pentru circulația intestinală hepatică și studiile împotriva hepatotoxicității medicamentoase. Cu toate acestea, trebuie menționat că valoarea lor ridicată de bilirubină poate interfera cu analiza LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 bilă de șoarece

CD - 1 Mouse are un volum biliar mic (50 - 200 μ L), ceea ce le face adecvate pentru studierea mecanismelor modelelor de modificare a genelor (cum ar fi calea FXR/PXR), dar tehnicile de cuantificare micro sunt necesare pentru adaptare.

7.5 C57BL/6 Bile de șoarece

Șoarecele C57BL/6 sunt utilizate în mod obișnuit în modelele de boli metabolice, iar modificările compoziției lor biliare pot reflecta condițiile patologice, necesitând utilizarea matricei biliare artificiale pentru a simula patologia.

Modelele de mai sus trebuie să fie combinate cu matricea biliară artificială pentru a controla diferențele de specii și pentru a optimiza comparabilitatea speciilor încrucișate a metodelor LC - MS/MS.

Concluzie

Matricea biliară artificială, ca instrument cheie pentru simularea funcției biliei naturale, joacă un rol de neînlocuit în dezvoltarea medicamentelor hepatobiliare. Prin standardizarea compoziției biliare a diferitelor specii (cum ar fi maimuțele Cynomolgus, Beagle Dogs, șobolani SD, șobolani Cd - 1, șobolani C57BL/6), matrice biliară artificială abordează eficient provocările de bază, cum ar fi limitările etice, diferențele individuale și simularea patologică a eșantioanelor naturale, îmbunătățind semnificativ religia și valoarea de traducere a cercetării medicamentelor.

Odată cu dezvoltarea medicamentului de precizie, matricea bilă artificială va combina în continuare componentele patologice specifice și tehnologia microfluidică pentru a simula dinamic microambientul ficatului și vezicii biliare, oferind un sprijin mai puternic pentru dezvoltarea inovatoare a medicamentelor.

Cuvinte cheie:Analiză biologică necompletată, eșantion de matrice biologică, analiză biomatrix, bilă umană, bilă animală, eșantion biliar, bilă artificială, bilă simulată, bilă NHP, cynomolgus maimuță bilă, bilă maimuță rhesus, bilă de câine beagle, bilă de șobolan, bilă de șoarece, metoda lc - ms/ms, dezvoltarea metodei bioanalitice, bioanalytical metoda validării metodei validă validare validați validarea metodei validați validari validari validari validați bioanalitic

Referinţă

Li T, Chiang JY. Semnalizarea acidului biliar în boala metabolică și terapia medicamentoasă. Pharmacol Rev. 2014 oct. 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.