Инновационная терапия CGT - Лентивирус - Упаковочный автомобиль - T Иммунные клетки

Инновационная терапия CGT - Лентивирус - Упаковочный автомобиль - T Иммунные клетки

Терапия иммунными клетками - это инновационное лечение рака, которое усиливает иммунную систему организма к нацеливанию и устранению раковых клеток. Ключевые формы включают цитокин - индуцированная терапия клеточной клеток, T - Cell Therapy и Car - T -клеточная терапия. Терапия CAR - T включает в себя перепрограммирование Т -клеток для экспрессии химерных антигенных рецепторов (CAR), которые специфически нацелены на опухолевые клетки, демонстрирующие значительный успех при гематологическом раке, таких как лейкоз и лимфома.

Ключевые слова: Car - T, лентивирус, лентивирусный вектор, трассировщик лентивирус

Приготовление автомобиля - Т -клеточная терапия

В общем, ключевые шаги по приготовлению автомобилей - Т -клетки следующие:

Источник рисунка: Дана - Институт рака Фарбера - CAR T - Клинические испытания клеток помогают пациентам с множественной миеломой вернуться к здоровью

1. 1. Сортирование (T - Изоляция клеток)

Первым шагом в приготовлении автомобильных клеток является выделение t - клеток из лейкоцитов в периферической крови пациента. Такие методы, как иммуномагнитное разделение шариков или проточная цитометрия, обычно используются для извлечения CD3+- богатые клетки из крови. Чтобы обеспечить чистоту ячейки, процесс сортировки должен быть очень точным, гарантируя получение достаточного количества высоких качественных клеток.

2. 2. Стимуляция (T - Активация клеток)

Извлеченные t - клетки активируются in vitro, обычно используяCD3 /CD28 T - Activation /Expansion Kit CellsПолем Активированные Т -клетки входят в активное состояние, подготовя их к трансфекции генов. Благодаря этому процессу функция Т -клеток усиливается, способствуя последующей генетической модификации и амплификации.

3. 3. Трансфекция (редактирование генов)

Активированные Т -клетки подвергаются трансфекции генов, чтобы экспрессировать химерный рецептор антигена (CAR). Этот процесс обычно используетлентивирусный векторввести автомобильные гены в Т -клетки. Лентивирус является эффективным инструментом трансдукции генов с преимуществом стабильной интеграции гена -мишени (такого как ген CAR) в геном клеток. Инфекция Т -клеток и трансфекции гена автомобиля в ДНК Т -клеток, лентивирус позволяет Т -клеткам экспрессировать автомобили длинный. Ген CAR включает в себя единый фрагмент переменной цепи (SCFV) антитела, которое позволяет Т -клеткам распознавать специфические антигены на поверхности опухолевых клеток и инициировать иммунный ответ путем активации сигнальных областей Т -клеток. Как показано на рисунке 2. Лессивирусная трансфекция имеет характеристики высокой эффективности и стабильности, так что автомобильный ген может экспрессироваться в Т -клетках в течение длительного времени.

Источник рисунка: сингапурский автомобиль - Т -клеточная терапия

4. 4. Акпликация (пролиферация клеток)

После трансфекции CAR - T входят в стадию амплификации, где факторы роста, такие какIl - 2добавляются, чтобы способствовать пролиферации клеток. Цель этого процесса состоит в том, чтобы обеспечить достаточное количество автомобильных клеток для возможной инфузии в пациенту. Процесс амплификации должен проводиться в стерильных условиях, чтобы гарантировать качество и количество клеток.

5. 5. Качественный контроль (QC)
6. Перед повторным реинфузией в пациенте контроль качества имеет решающее значение в процессе подготовки. Подготовленные автомобильные клетки проходят строгое тестирование наОбеспечить их чистоту, активность, эффективность трансфекции и соблюдение стандартов леченияПолем Кроме того, тестирование на загрязнение клеток или побочные реакции необходимо для обеспечения безопасности и терапевтической эффективности клеток после реинфузии в пациенту.

IMportance of лентивирусной трансфекции в иммунных клетках

Технология лентивирусной трансфекции имеет решающее значение при терапии иммунных клеток, особенно для редактирования генов и инженерии клеток. Лентивирусные векторы, полученные из модифицированного ВИЧ - 1, широко используются из -за их способности интегрировать гены в геном хозяина, обеспечивая стабильную, долгосрочную экспрессию. Они могут заражать как делящихся, так и не делящихся клеток, и их безопасность была улучшена путем изменения ключевых генов для предотвращения репликации. Эти векторы в настоящее время обычно используются в генной терапии, редактировании генов и исследованиях клеточной биологии для их эффективности и долговечности при доставке генов.

Источник рисунка: Obiosh.com/product/ Схематическая диаграмма упаковки лентивируса и процесса трансфекции лентивируса в 293T -клетках

1. Эффективная трансдукция генов

Лентивирусный вектор может эффективно доставлять гены -мишени, такие как ген CAR, в иммунные клетки, и интегрировать эти гены стабильно в клеточный геном, гарантируя, что ген CAR постоянно экспрессируется во время клеточного деления и пролиферации. Эта высокая способность трансдукции эффективности является фундаментальной для успеха иммунотерапии.

2. Полученная иммуногенность 

По сравнению с другими вирусными векторами, лентивирусы имеют более низкую иммуногенность. В результате, когда лентивирусы используются для преобразования иммунных клеток, иммунная система пациента генерирует относительно более слабый иммунный ответ на вирус. Это помогает минимизировать побочные реакции, особенно в долгосрочной выживании клеток после инфузии, что предотвращает чрезмерное иммунное отторжение.

3. Высокая адаптивность к иммунным клеткам

Лентивирусный вектор способен эффективно преобразовать различные типы иммунных клеток,Особенно Т -клетки и NK -клеткиПолем Благодаря лентивирусной трансдукции иммунные клетки могут приобретать опухоль - Специфические способности распознавания, тем самым повышая их способность нацелить и убивать опухолевые клетки.

4. Оценка трансдуцированных эффекторных клеток в распознавании клеток -мишеней 

В иммунотерапии,трансдуцированные эффекторные клеткиОбратитесь к иммунным клеткам, которые после трансдукции экспрессируют автомобиль и оказывают анти - опухолевую активность. Лентивирусные векторы могут точно доставить ген автомобиля в эти эффекторные клетки, что позволяет им распознавать и нацелить опухолевые клетки.Целевые клеткиявляются опухолевыми клетками, которые идентифицируются и уничтожаются этими иммунными клетками. Благодаря лентивирусной трансдукции иммунные клетки могут повысить их специфичность в распознавании и убийстве опухолевых клеток, тем самым повышая терапевтическую эффективность.

В этом контексте Iphase, лидер в исследовательских реагентах in vitro, разработал набор для упаковки лентивируса и концентрационный реагент лентивируса для упрощения сложности трансдукции для клиентов иммунотерапии и улучшения скорости успеха стабильной трансфекции генов. Эти продукты предлагают одно - STOP Solution для клиентов.

Iphase лентивирусPродуки

Комплект упаковки ифазного лентивирусасодержит все важные реагенты, необходимые длялентивирус упаковка, значительно упростить экспериментальный процесс и экономить время и усилия. Этот комплект включает в себя:

• Лентивирус упаковочная плазмидная смесь
• Трансфектный реагент
• EGFP плазмида
• Реагент концентрации ифазного лентивируса

Этот комплект действительно оптимизирует эксперимент! Не нуждаясь в сложной подготовке реагентов, лентивирусная упаковка может быть эффективно завершена, просто выполнив включенные инструкции.Уникальные преимущества комплекта включают короткое время упаковки, высокий вирусный титр и легкую работу, что делает его идеальным для начинающих в упаковке лентивируса. Каждый набор реагентов подвергается строгому контролю качества, чтобы обеспечить точные, надежные и воспроизводимые результаты, значительно повышая эффективность трансфекции и стабильность вирусных векторов, что обеспечивает мощную техническую поддержку для подготовки иммунных клеток.

Кроме того, чтобы помочь клиентам сэкономить затраты, Iphase также разработала и создала реагент концентрации лентивируса, предлагая быстрое и простое решение для концентрации.Просто смешивая супернатант лентивируса с концентрационным реагентом, за которым следует краткая инкубация и центрифугирование с использованием стандартной центрифуги, лентивирусные частицы могут быть быстро сконцентрированы. Этот процесс не требует ультрацентрифуги, что делает его удобным и стоимостью - Эффективный вариант для большинства лабораторных пользователей.

Короче говоря, реагент концентрации ифазного лентивируса не только значительно повышает эффективность трансфекции, но также обеспечивает высокую поддержку качественного вирусного вектора для препарата иммунных клеток. Это важный продукт для обычных экспериментов, доклинических исследований и других областей применения.

Таким образом, иммунотерапия, в частности, автомобиль -клеточные и автомобильные терапии клеток, представляет собой новое направление в современном лечении рака. Благодаря точным процессам, таким как сортировка клеток, активация, трансдукция, расширение и контроль качества, ученые могут готовить эффективные и безопасные продукты иммунных клеток для пациентов, что позволяет лечить целевым раком.Лентивирусная трансдукция, как основная технология, играет критическую роль в приготовлении клеток Car - T и CAR - NK из -за его высокой эффективности и стабильности.Благодаря непрерывным технологическим достижениям иммунотерапия обладает потенциалом для предложения инновационных вариантов лечения для большего количества пациентов, обеспечивая большую клиническую ценность. Ожидается, что в будущем иммунотерапия принесет революционную терапевтическую надежду большему количеству больных раком.

Для удовлетворения потребностей генов трансдукции, экспрессии и исследований заболеваний IPHASE предлагает наборы для упаковки лентивируса, реагенты концентрации лентивируса и трассерские лентивирусы. Эти трассировщики лентивирусы упакованы с зеленым флуоресцентным белком (GFP), красным флуоресцентным белком MCHRERY и люциферазой, что обеспечивает легкое отслеживание клеток -мишеней как in vitro, так и in vivo.

Кроме того, Iphase также может предлагает два лентивируса Tracer Tracer: GFP & Luciferase и Mcherry & Luciferase. Эти трассировки могут быть выбраны или объединены на основе экспериментальных потребностей, оптимизации рабочих процессов и повышения эффективности для реального отслеживания времени и мониторинга целевых ячеек.

ИФАЗАIМмунотерапияRвозобновленныйPродуки

В дополнение к лентивирусу - Связанные продукты, используемые в автомобильных или автомобильных методах терапии, Iphase, как лидер в исследовательских реагентах in vitro, также внесла значительный вклад в поддержку инноваций в CGT (клеточная и генная терапия) и других областей. Ифаза разработала и продуцировала лейкоциты и PBMC (мононуклеарные клетки периферической крови), выделенные с помощью лейкафереза, наряду с различными наборами для выделения иммунных клеток, чтобы поддержать быстрое развитие иммунотерапии.

Ифазные продукты предлагают следующие преимущества, иСертификат анализа (COA)Проверено Iphase доступно для каждой партии.

Безопасность 

Ифазные продукты поставляются у здоровых доноров/животных, которые подвергались тщательному скринингу, с отрицательными результатами для вирусного тестирования (ВИЧ - 1/2, HBV, HCV, Syphilis).

Согласие  

Iphase предоставляет информированные формы согласия, подписанные донорами, с четкой и прослеживаемой проверкой источника.

Профессионализм

Продукты, предоставляемые Iphase, полученные с помощью лейкафереза, обрабатываются обученными профессионалами. Каждая партия сопровождается соответствующим COA, а продукты транспортируются под строгой холодной цепи, чтобы обеспечить безопасность, быстрой доставки и обеспечение качества.

Обслуживание клиентов

Iphase предлагает высокое - качество после - Service Service, обеспечивая плавный и непрерывный опыт на протяжении всего процесса проб.