Человеческая и животная желчь пустой биологической матрицы для развития биоаналитического метода и проверки биоаналитического метода

1 ифазные продукты

2 пустая биоматрица

Различные типыбиологические матрицы, включая пустую целую кровь, сыворотку, плазму, желчь, молоко, моча, фекалии, кишечное содержание, висцеральный орган, стекловидное тело, водный юмор, спинномозговая жидкость и т. Д., Собранные у здоровых субъектов или здоровых экспериментальных животных, в совокупности называются пустыми биологическими матрицами.

3 Необходимость использования пустых биологических матриц в доклинических исследованиях

In Доклинические исследования наркотиков, пустая биологическая матрица является краеугольным камнем для установления и проверкиБиологические методы анализаПолем Используя пустые матрицы от здоровых субъектов или экспериментальных животных, исследователи могут точно готовить калибровочные стандарты и образцы контроля качества, оценивать специфичность, чувствительность, точность и матричные эффекты аналитических методов и обеспечить надежность количественных результатов концентрации лекарственного средства.

4 Проверка и создание биологического метода и применение пустой биологической матрицы

Как требуется руководящие принципы FDA/EMA, в создании и валидации методов анализа биологического матрикса необходимо использовать пустые биологические матрицы для обеспечения точности и надежности метода анализа. Особенно в анализе LC - MS/MS различия в компонентах матрицы из разных источников могут значительно повлиять на эффективность ионизации. Попуская матрица в основном используется для подготовки стандартов калибровки, подготовки образцов контроля качества для изучения специфичности, селективности, точности, точности, матричных эффектов, скорости восстановления, стабильности, линейности разбавления, эффектов интерференции и т. Д. Аналитических методов. Эффект селективности и матрицы метода обнаружения требуют более высоких требований для пустой матрицы.

5 сценарии применения желчной пустой матрицы при разработке лекарств

Искусственная матрица желчи (моделируемая матрица желчи)является синтетическим раствором, который имитирует естественные компоненты желчи и используется для метаболизма лекарств, токсикологии и биологического анализа.Желчья пустая матрицаИмеет важную ценность применения в следующих сценариях разработки лекарств: фармакокинетические исследования (PK) исследования лекарств от гепатобилиарной системы, поглощение и первые исследования метаболизма пероральных препаратов, исследования взаимодействия лекарственной кислоты, оценка гепатотоксичности и исследования билевого стазиса и развитие методов биологического анализа (LC - MS/MS).

6 наркотики гепатобилиарной системы

При разработке лекарств для гепатобилиарной системы желчья пустая матрица играет незаменимую роль в качестве стандартизированной системы моделирования in vitro в фармакокинетических (PK), токсикологическом и биологическом анализе исследования.

6.1 Оценить характеристики выбросов желчи лекарств

Исследование гепатоинтерийного циркуляции: желчь является одним из важных путей для выведения лекарств и их метаболитов. Используя искусственную желчную матрицу, изменения концентрации лекарств в желчи могут быть смоделированы, чтобы оценить, реабсорбируются ли они через кишечную циркуляцию печени.

Определение скорости клиренса желчи. Для лекарств, которые активно выделяются с помощью желчи (такие как статины и некоторые антибиотики), искусственная желчь (моделируемая желчь) может помочь количественно оценить эффективность их очистки и оптимизировать режим дозирования.

6.2 Изучите влияние желчных кислот на поглощение лекарственного средства

Эффект солюбилизации: желчные кислоты могут способствовать растворению, а кишечная абсорбция липофильных препаратов, таких как витамин D. Искусственная желчь, может имитировать различные композиции желчных кислот и оценивать их влияние на биодоступность лекарственного средства.

Взаимодействие лекарственной желчной кислоты: некоторые препараты (такие как лираглутид) могут конкурировать с переносчиками желчной кислоты (такими как BSEP, MRP2), а искусственная желчь может использоваться для изучения таких взаимодействий, чтобы избежать потенциальных рисков желчного стазиса.

6.3 Оценка риска гепатотоксичности и холестаза

Модель холестаза, индуцированная препаратом: искусственная желчь может имитировать патологические условия, такие как обструкция желчных протоков и гипербилирубинемия, и используется для выявления того, мешают ли лекарства поток желчи или повреждены ячейки желчных протоков.

Анализ биомаркеров: добавляя специфические компоненты, такие как билирубин, желчные кислоты и воспалительные факторы, может быть оценено влияние лекарств на компоненты желчи и может быть предсказана клиническая безопасность.

6.4 Этические и практические преимущества замены естественной желчи

Решение проблемы нехватки выборки: естественная желчь должна быть получена с помощью инвазивных методов, таких как катетеризация желчных протоков, в то время как искусственная желчь может быть бесконечно подготовлена, чтобы избежать этических ограничений.

Пакетная консистенция: композиция искусственной матрицы (смоделированная матрица) контролируется, что уменьшает влияние индивидуальных различий в естественной желчи на экспериментальные результаты.

6.5 Поддержите разработку методов биологического анализа LC - MS/MS

Коррекция эффекта матрицы: сложный состав природной желчи (высокие соли желчи, фосфолипиды, пигменты) может легко привести к подавлению ионов или усилению в анализе LC - MS/MS. Искусственная матрица желчи (смоделированная матрица желчи) может обеспечить стабильный фон, оптимизировать чувствительность и точность метода.

7 Исследование поперечного вида

Композиция желчи сильно варьируется среди разных животных (крысы, собаки, обезьяны) и искусственная желчь может стандартизировать различия в видах и улучшать транслятируемость доклинических данных.

7.1 Cynomolgus monkey bile (желчь NHP)

Била обезьяны Cynomolgus очень похожа на то, что у людей у ​​людей с точки зрения композиции (такого как профиль желчной кислоты) и экспрессия транспортера лекарственного средства (например, BSEP, MRP2), что делает ее моделью приматов с золотым стандартом для оценки вида печеночной билиарной экскреции и лекарственной желчной кислоты.

7.2 Бигль собака желчь

Содержание фосфолипидов в бигле желчи относительно высокое, что делает его подходящим для изучения экскреции желчи и зависимой от желчной соли липофильных препаратов. Тем не менее, различия в составе желчных кислот между Биглом и людьми требуют калибровки с помощью искусственных матриц.

7.3 SD Крыса Била

Объем сбора желчи крыс SD относительно большой (~ 1 мл/время), который широко используется для исследований кишечной циркуляции печени и гепатотоксичности лекарств. Тем не менее, следует отметить, что их высокая базовая линия билирубина может мешать анализу LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 Биле мыши

Мышь CD - 1 имеет небольшой объем желчи (50 - 200 мкл), что делает их подходящими для изучения механизмов моделей модификации генов (таких как путь FXR/PXR), но для адаптации необходимы методы микро -количественной оценки.

7.5 C57BL/6 мышь желчь

Мыши C57BL/6 обычно используются в моделях метаболических заболеваний, а изменения в их желчной композиции могут отражать патологические условия, требующие использования искусственной желчной матрицы для имитации патологии.

Вышеуказанные модели должны быть объединены с искусственной желчной матрицей для контроля различий в видах и оптимизировать сопоставимость поперечных видов методов LC - MS/MS.

Заключение

Искусственная матрица желчи, как ключевой инструмент для моделирования функции естественной желчи, играет незаменимую роль в развитии гепатобилиарных препаратов. Благодаря стандартизации состав желчи различных видов (таких как обезьяны Cynomolgus, Beagle Dogs, SD крыс, крысы CD - 1, крысы C57BL/6), матрица искусственной желчи эффективно решает основные проблемы, такие как этические ограничения, индивидуальные различия и моделирование патологического состояния натуральных образцов, существенно повышающие отношения и трансляции лекарственных средств.

Благодаря разработке точной медицины, искусственная желчная матрица будет дополнительно объединить патологические специфические компоненты и микрофлюидную технологию для динамического моделирования микроокружения печени и желчного пузыря, обеспечивая более сильную поддержку инновационной разработке лекарств.

Ключевые слова:Бланк биологический анализ, образец биологического матрикса, анализ биоматрикса, желчь для человека, желчь для животных, образца желчи, искусственная желчь, моделируемая желчь, желчь NHP, Cynomolgus monkey Ble, Резус -обезьяна, желчь, бигль собака, желчь, била крысы, била мыши, LC - MS/MS, биоаналитическая разработка, метод разработки биологии, метод биологической методики, вартитационная методика.

Ссылка

Ли Т., Чианг Джи. Передача сигналов желчной кислоты при метаболическом заболевании и лекарственной терапии. Pharmacol Rev. 2014 октябрь; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.