ප්රේරිත මීයන් අක්මාව එස් 9 භාගය: විට්රෝ ප්රවේසමය හා විකෘති පරීක්ෂණ සඳහා පරිවෘත්තීය සක්රිය කිරීමේ පද්ධතියක්

මූල පද: OECD 471, OECD 473, OECD 476, OECD 476, ONV LIV, GIMOTOOS SETS, MISROMOST ASEME, MICROMOST / HGTPRT Asse, tk Asse

IPhase නිෂ්පාදන

හැඳින්වීම

ප්රේරිත මීයන් අක්මාව S9තක්සේරු කිරීමේදී ප්රධාන අංගයකිජානමය විෂ වීමරසායනික ද්රව්යවල, විශේෂයෙන් නියාමන විෂ විද්යාව පිළිබඳ. එය සාමාන්යයෙන් විට්රෝ තක්සේරු කිරීම් සමඟ බහුලව භාවිතා වේAMES පරීක්ෂණය සහවිකෘති පරීක්ෂණ, සංයෝගවල විකෘති ගුණාංග තක්සේරු කිරීම සඳහා. ලිවර්රෝම් P450 (CYP450) හි පොහොසත් එන්සයිමීටික පද්ධතියක් ලබා දීමෙන්, රෝගාතුරව ඇති පරිවෘත්තීය ක්රියාදාමයන් අනුකරණය කිරීමේදී, රසායනික ද්රව්යවලට ජාන විකෘති හෝ පිළිකා ඇතිවිය හැකිද යන්න තීරණය කිරීමට උපකාරී වේ.

ප්රේරිත මීයන් අක්මාව S9

අක්මාව එස් 9 අර්සාධනය යනු තනතුරකට යොමු වේ - මීයන් අක්මාව සමගින් ලබාගත් මයිටොකොන්ඩ්රීයි අතිගරු බුද්ධිය කේන්ද්රාපසාත්මක පියවර මාලාවකින් පසුව. "ප්රේරක" යන යෙදුම යන්නෙන් අදහස් කරන්නේ අක්මාව එන්සයිම, විශේෂයෙන් සයිටොච්රෝම් P450 එන්සයිම (CYP450) හි ක්රියාකාරිත්වය සමඟිනි.

දිරාපත් වූ මීයන් වන අක්මාව එස් 9 භාගය තුළ පළමු අදියර සහ රසායනික ද්රව්යවල අදියර පරිවෘත්තීය වර්ගයට සම්බන්ධ විවිධ එන්සයිම අඩංගු වේ. උපස්ථරවල ඔක්සිකාරක ජෛව ශාස්ත්ර කිරීම සඳහා පහසුකම් සපයන සයිටොචොරෝම් පී 450 මොනොබොක්සිජපුර වැනි එන්සයිම මෙයට ඇතුළත් වේ. එමගින් මිනිස් අක්මා පරිවෘත්තීය අනුකරණය කරයි.

CYP450 ක්රියාකාරකම් සහ පරිවෘත්තීය සක්රීය කිරීම

බොහෝ ce ෂධ, පාරිසරික රසායනික ද්රව්ය ඇතුළු විවිධාකාර ද්රව්යවල පරිවෘත්තීය පරිවෘත්තීය P450 එන්සයිම (CYP450) වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. දීප්තිමත් මීයන් වන අක්මාව S9 භාගයේ මෙම එන්සයිම අඩංගු වන අතර පරිවෘත්තීය සක්රිය කිරීමෙන් පසු ජභූතෝසොක්සික් බවට පත්විය හැකි රසායනික ද්රව්ය තක්සේරු කිරීම සඳහා අත්යවශ්ය වේ.

බොහෝ සංයෝග මුලදී නොව විෂ සහිත නමුත් අක්මාවේ පරිවෘත්තීය වලින් පසුව විෂ සහිත විය හැකිය. මෙම ප්රෝ - විකෘති කිරීම් (විකෘති ක්රියාවක් බවට පත්වීම (විකෘතියක් බවට පත්වීම සඳහා පරිවෘත්තීය සක්රීය කිරීම) සහ ප්රෝ - CRACINOGENS (පිළිකා ඇතිවීම සඳහා සක්රිය කිරීම) හඳුනා ගැනීම සඳහා S9 පරිවෘත්තීය සක්රිය කිරීමේ පද්ධතියක් ඇතුළත් තක්සේරු කිරීම් හරහා පමණි. පරිවෘත්තීය එන්සයිම CYP450 වැනි පරස්පරතාවයකින් තොරව, මෙම ද්රව්ය සම්මත ප්රවේසිතතා පරීක්ෂණවල හානිකර නොවන බව පෙනේ.

ප්රේරිත-මීයන් ලෙස් ලිවර් එස් 9 ක් විට්රෝ තක්සේරු කිරීම්වල එකතු කිරීමෙන් පර්යේෂකයන්ට යම් ද්රව්යයක් CYP450 එන්සයිම සමඟ අන්තර්ක්රියා කරන ආකාරය තක්සේරු කළ හැකිය. බොහෝ drugs ෂධවල c ෂධීයවාදීන්ගේ තීරණාත්මක පියවරක් වන අතර පරිවෘත්තීය ෙපොබොයිබොලිස්ට් හි තීරණාත්මක පියවරක් වන බැවින් pharma ෂධ සඳහා මෙය විශේෂයෙන් වැදගත් වේ.

ප්රේරිත මීයන් අක්මාව S9 යෙදුම් යෙදුම්

1. 1. Ames පරීක්ෂණය (OECD 471)

පාස්ට් පරීක්ෂණය, මාර්ගෝපදේශයේ දක්වා ඇතOECD 471, වඩාත්ම හොඳින් - විකල්ප විකෘතිතභාවය තක්සේරු කිරීම සඳහා දන්නා සහ පුළුල් ලෙස භාවිතා කරන ක්රම වේ. බැක්ටීරියා හිස්ටිටින්ව හිස්ටිටින් වෙත ගෙන ඒමට හේතු වන විකෘති ප්ලාන්ස්ස් ලබා ගන්නේ දැයි බැලීමට සල්මොනෙල්ලා බැක්ටීරියා වල වික්රියා හෙළිදරව් කිරීම ඊට ඇතුළත් වේ.

මානව පරිවෘත්තීය ක්රියාවලිය අනුකරණය කිරීම සඳහා, ප්රේරිත මීයන් අක්මාව S9 බොහෝ විට පරීක්ෂණ පද්ධතියට එකතු වේ. එස් 9 භාගය, සිප්450 ඇතුළුව අවශ්ය එන්සයිම ලබා දෙන අතර, සංයෝගය පරිවෘත්තීය කිරීම වඩාත් ප්රතික්රියාශීලී ස්වරූපයක් බවට පරිවරණය කිරීම සඳහා බැක්ටීරියා ඩීඑන්ඒ තුළ ඇති විය හැකිය. S9 AMS පරීක්ෂණය සමඟ මෙම සංයෝජනය විකෘතියේ විභවයන් සෘජු හා පරිවෘත්තීය සක්රිය කරන ලද විකෘති යාන්ත්රණයන් අනුකරණය කිරීමෙන් විකෘතියේ හැකියාවන් පිළිබඳ පුළුල් තක්සේරුවක් ලබා ගැනීමට ඉඩ සලසයි.

2. 2.විකෘති පරීක්ෂණ (වර්ණදේහ විමෝචන පරීක්ෂණය, ක්ෂුද්ර ඕවර් නුවර සහ වෙනත් අය)

AMES පරීක්ෂණයට අමතරව, රසායනික ද්රව්යවල ජාතික විභවය තක්සේරු කිරීම සඳහා විකෘති පරීක්ෂණ බහුලව භාවිතා වේ. වර්ණදේහ විකෘති, ජාන විකෘති සහ මයික්ක්රිලේලි සෑදීම ඇතුළු ජානමය හානියක් තක්සේරු කිරීමේදී මෙම පරීක්ෂණ වඩාත් පුළුල් වේ. පහත සඳහන් හේතු නිසා ප්රේරිත මීයන් අක්මාව S9 විකෘති පරීක්ෂණ වලදී භාවිතා වේ:

Micronucus Test (OECD 487)

මෙම පරීක්ෂණය මගින් සෛල බෙදීම තුළ න්යෂ්ටියට සංස්ථාගත කර නොමැති වර්ණදේහ හෝ සම්පූර්ණ වර්ණෝරස්ථාන අඩංගු සෛලවල මයිකිරූලයෙලි සෑදීම. ඒ Micronucus Testක්ලැස්ටොජෙන්සික් (වර්ණෝමුහුක - කැඩීම) සහ අනේජ්නික් (වර්ණදේහ වලට බලපාන) බලපෑම් හඳුනාගත හැකිය. පරීක්ෂණ ද්රව්යය සක්රිය කරන්න. එස් 9 භාරදීම වීවෝ හි සිදුවිය හැකි පරිවෘත්තීය සක්රිය කිරීම අනුකරණය කිරීමෙන් පරීක්ෂණයේ සංවේදීතාව වැඩි කරයි.

වර්ණදේහ අපිරිසිදු පරීක්ෂණය (OECD 473)

මෙම පරීක්ෂණය ඇනාසි වී ඇත්තේ යම් ද්රව්යයක් වර්ණෝමොමොමොමොමොමොමොමොමොමොම්ස් වලට ව්යුහාත්මක හානියක් කළ හැකිද යන්න ඇගයීමට ලක් කරයි. Micrichucus පරීක්ෂණය මෙන්,වර්ණදේහ අපිරිසිදු පරීක්ෂණයපරිවෘත්තීය සක්රිය කිරීමකින් හෝ නැතිව අයදුම් කළ හැකිය. අක්මාවේ පරිවෘත්තීය ක්රියාදාමයන් අනුකරණය කිරීම සඳහා, අක්මාව වන පරිවෘත්තීය ක්රියාදාමයන් අනුකරණය කිරීම සඳහා ප්රේරිත මීයන් අක්මා කරන්න

වගුව 1. විකෘති පරීක්ෂණ සංසන්දනාත්මක සලකා බැලීම්

HPRT / HGPRT Asse (OECD 476)

තුළHprt / hgprt aseray, චීන හැම්ස්ටර්ගේ සංස්කෘතීන් (චෝ හෝ වී 79) හෝ මානව ලිම්ෆොබ්ලාස්ටොයිඩ් (ටීකේ 6) සෛල පරීක්ෂණ රසායනිකයට නිරාවරණය වන අතර එය ඩීඑන්ඒ-ප්රතිසංස්කරණ විශේෂ බවට පරිවර්තනය කිරීම සඳහා සිප් 450 මෙටබෝලික් මිශ්රණයක් මතු වේ. කෙටි ප්රතිකාරයකින් පසු දින හතක ප්රකාශන කාල පරිච්ඡේදයක්, සෛල 6-thiogoganine සමඟ අභියෝගයට ලක්ව ඇත; හයිපොක්සැන්ටොයින්-ග්වානින් පොස්පරස්ෆ්රස්ෆෙරස්ෆ්රේස් ෆෙයාර්ස් හි ක්රියාකාරී විකෘති කිරීම්වල විකෘති කිරීම් පමණි. විකෘති යටත් විජිත සංසන්දනය කිරීමෙන් සමස්ත ශක්යතාව සැලකිල්ලට ගනිමින් පර්යේෂකයන් විසින් අපරාධකරුවන් තීරණය කරන්නේ, සමගාමී හා historical තිහාසික පාලනයන් දෙකටම ප්රජනනය කළහොත්, ජාතික විභවය පෙන්නුම් කරයි.

Tk Assens (OECD 490 සහ OECD 476)

ඒTk තක්සේරුව L5178Y MOUSE MOUSE LIMPOHOMA සෛල (OECD 490) හෝ චොක් සෛල (OECD 490) භාවිතා කරයි (OECD 476) තිමියේඩින් කයිනස් ලොවුස් හි ඉංජිනේරු විෂමජාතීය. රසායනික නිරාවරණයෙන් පසුව ± S9 මිශ්රණය, සෛල නැවත ලබා ගන්නා අතර ට්රයිෆ්ලෝරෝති සෛල අඩංගු වන ස්වී-වින්ගුයි සෛල අඩංගු මධ්යම ප්රමාණයේ. කුඩා ජනපද විකෘති බොහෝ විට වර්ණදේහ සිදුවීම් පිළිබිඹු කරන කුඩා ජනපද විකෘති වලින් දිවි ගලවා ගැනීම. HPRT / HGTRT ASESE හි මෙන්, දැඩි සයිටොටොක්සොක්සික් පාලනය සහ ධනාත්මක විකෘති මිණුම් සලකුණු, විකෘති සංඛ්යාතය වැඩි කිරීම විශ්වාසදායක ලෙස සංයෝගයේ ලිංගික අවදානම පිළිබිඹු කරයි.

4. 4. පිළිකා අවදානම් තක්සේරුව

පිළිකා තක්සේරු කිරීම අරමුණු කරගත් අධ්යයනවල දී ප්රේරිත මීයන් අක්මාව S9 අධ්යයනය සඳහා යොදා ගනී - ද්රව්යවල විභවයන් ඇති කරයි. මිනිස් අක්මාව තුළ සිදුවන පරිවෘත්තීය ක්රියාදාමයන් අනුකරණය කිරීමෙන් ඩීඑන්ඒ වෙත බැඳී ඇති ප්රතික්රියාශීලී පරිවෘත්තීය සැකසීමට සහ පිළිකා වලට හේතු විය හැකි සංයෝග ඇති කළ හැකි සංයෝග හඳුනා ගැනීමට S9 කොටස බෙදා ගැනීමට හැකි වේ.

ප්රේරිත හැම්ස්ටර් අක්මාව සමඟ වැඩි දියුණු කළ AmseS පරීක්ෂණය s9

යුරෝපීය man ෂධීය ඒජන්සිය (ඊඑම්ඒ) විසින් නිකුත් කරන ලද නවතම මාර්ගෝපදේශයන්ට අනුව, සාම්ප්රදායික ඇමේස් පරීක්ෂණය සමහර n - නයිට්රෝමයින් අපද්රව්ය, විශේෂයෙන් එන් - නයිටොරොයිමිමිත්මිලයින් (එන්.ඩී.එම්.ඒ). එබැවින්, විෂ විද්යාත්මක පර්යේෂණ සඳහා වූ ජාතික මධ්යස්ථානය (NCTR) විසින් සංවර්ධනය කරන ලද වැඩි දියුණු කළ AMES පරීක්ෂණය, එක්සත් ජනපද ආහාර හා drug ෂධ පරිපාලනය (FDA) බෙදීම වඩාත් විශ්වාසදායක විකල්පයක් ලෙස නිර්දේශ කර ඇත. වැඩි දියුණු කළ Ames පරීක්ෂණය හඳුන්වා දුන් ඇල්ගනැට් හැම්ස්ටර් අක්මාව අක්මාව S9 සහ 30% මීයන් අක්මාව S9 සහ 30% HIMSTSTSTSTSTSTSTSTSTSTER LIM S9 සහ 30% HIMBER LIVS අඩංගු වේ. මීයන් සහ හැම්ස්ටර් ඩෙස්මොමෝමාල් සුපර්මිනන්ට් (S9S) සයිටොචෝම් පී 450 එන්සයිම සමඟ සලකනු ලබන මීයන් සහිත ලිවර්ස් වෙතින් සකස් කළ යුතුය. ප්රේරිත හැම්ස්ටර් අක්මාව S9 භාවිතා කිරීමෙන්, මෙම වැඩි දියුණු කළ පරීක්ෂණය මානව පරිවෘත්තීයභාවය වඩා හොඳින් අනුකරණය කරන අතර ප්රති .ලවල විශ්වසනීයත්වය වැඩි කරයි.

නිගමනය

ප්රේරිත මීයන් වන අක්මාව S9 ප්රවේගිතතා පරීක්ෂණයේ තීරණාත්මක මෙවලමක් ලෙස සේවය කරයි, පර්යේෂකයන්ට සහ නියාමන ආයතනවලට රසායනික ද්රව්යවල විකෘතිත හා පිළිකා කාරක විභවය තක්සේරු කිරීම. පරිවෘත්තීය සක්රිය කිරීමේ පද්ධතියක් ලබා දීමෙන්, එය ඇම්ස් ටෙස්ට්, විකෘති පරීක්ෂණ, විකෘති පරීක්ෂණ සහ සිප් 450 සිප් 450 සිප් 450 සිප් 450 සිප් 450 සිප්450 ක්රියාකාරකම් අධ්යයන මගින් එය වැඩි දියුණු කරයි. නව drugs ෂධ, රසායනික ද්රව්ය සහ පාරිභෝගික නිෂ්පාදනවල ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා එහි අයදුම්පත් අත්යවශ්ය වේ. මිනිස් අක්මාව පරිවෘත්තීය අනුකරණය කිරීමේදී එහි කාර්යභාරය සමඟ, ප්රේරිත මීයන් අක්මා අක්මාව S9 භාගය නූතන විෂ විද්යා විද්යාවේ සහ නියාමන ආරක්ෂිත තක්සේරුවේ අත්යවශ්ය අංගයක් ලෙස අඛණ්ඩව පවතී.