CGT inovatívna terapia Lentivírus - Balenie auto imunitné bunky

CGT inovatívna terapia Lentivírus - Balenie auto imunitné bunky

Terapia imunitných buniek je inovatívna liečba rakoviny, ktorá zvyšuje imunitný systém tela na zacielenie a eliminovanie rakovinových buniek. Medzi kľúčové formy patrí cytokín - indukovaná zabíjačská bunková terapia, T - bunková terapia a terapia CAR - T buniek. Terapia CAR - T zahŕňa preprogramovanie T buniek na exprimovanie chimérnych antigénových receptorov (CAR), ktoré sa špecificky zameriavajú na nádorové bunky, ktoré vykazujú významný úspech pri hematologických rakovinách, ako je leukémia a lymfóm.

Kľúčové slová: auto - t, lentivírus, lentivírusový vektor, indiírus

Príprava terapie automobilu - T buniek

Všeobecne sú kľúčové kroky na prípravu automobilových buniek nasledujúce:

Obrázok Zdroj: Dana - Farber Cancer Institute - CAR T Klinické skúšky Bunky pomáhajú viacerým pacientom s myelómom vrátiť sa k zdraviu

1. 1.sorting (izolácia buniek T -)

Prvým krokom pri príprave automobilových buniek je izolácia T - buniek z bielych krviniek v periférnej krvi pacienta. Techniky, ako je imunomagnetická separácia guľôčok alebo prietoková cytometria, sa zvyčajne používajú na extrakciu CD3+- bohatých T - buniek z krvi. Aby sa zabezpečila čistota buniek, musí byť proces triedenia veľmi presný, čo zabezpečuje, aby sa získalo dostatočný počet vysokých - kvalitných T - buniek.

2. 2. stimulácia (aktivácia buniek)

Extrahované bunky T - sú aktivované in vitro, zvyčajne s použitím aCD3 /CD28 T - Aktivácia /expanzia buniek. Aktivované T bunky vstupujú do aktívneho stavu a pripravujú ich na génovú transfekciu. Prostredníctvom tohto procesu je funkcia T buniek zvýšená, čo prispieva k následnej genetickej modifikácii a amplifikácii.

3. 3.Transfekcia (úpravy génov)

Aktivované T bunky podliehajú transfekcii génu na exprimovanie chimérneho antigénového receptora (CAR). Tento proces zvyčajne používalentivírusový vektorZavádzanie génov automobilov do T buniek. Lentivírus je účinný nástroj na transdukciu génov s výhodou stabilnej integrácie cieľového génu (ako je gén automobilu) do bunkového genómu. Infekciou T buniek a transfekciou génu automobilu do DNA T -buniek umožňuje lentivírus T bunkami exprimovať autá dlho - Gén automobilu obsahuje jediný - reťazový premenný fragment (SCFV) protilátky, ktorá umožňuje T bunkám rozpoznať špecifické antigény na povrchu nádorových buniek a iniciovať imunitnú reakciu aktiváciou signalizačných oblastí T buniek. Ako je znázornené na obrázku 2. Lentivírusová transfekcia má charakteristiky vysokej účinnosti a stability, takže gén automobilu sa môže po dlhú dobu exprimovať v T bunkách.

Zdroj obrázku: Singapurské auto terapia T -buniek

4. 4. Vzostup (proliferácia buniek)

Po transfekcii vstupujú bunky CAR -IL - 2sa pridávajú na podporu proliferácie buniek. Účelom tohto procesu je zabezpečiť, aby bol na prípadnú infúziu do pacienta k dispozícii dostatočný počet automobilových buniek. Proces zosilnenia sa musí vykonávať za sterilných podmienok, aby sa zaručila kvalita a množstvo buniek.

5. 5. Kontrola kvality (QC)
6. Pred reinfúziou do pacienta je kontrola kvality počas procesu prípravy rozhodujúca. Pripravené autá T -bunky podliehajú prísnemu testovaniuZaistite ich čistotu, aktivitu, účinnosť transfekcie a dodržiavanie liečebných noriem. Okrem toho je potrebné testovanie na kontamináciu buniek alebo nežiaduce reakcie na zabezpečenie bezpečnosti a terapeutickej účinnosti buniek po reinfúzii do pacienta.

IMORANCENCIA LENtivírusovej transfekcie v imunitných bunkách

Technológia lentivírusovej transfekcie je rozhodujúca pri terapii imunitných buniek, najmä pre úpravu génov a bunkového inžinierstva. Lentivírusové vektory, odvodené z modifikovaného HIV - 1, sa široko používajú kvôli ich schopnosti integrovať gény do hostiteľského genómu, čím zabezpečujú stabilnú, dlhú - termínovú expresiu. Môžu infikovať deliace a nerečiace bunky a ich bezpečnosť sa zlepšila modifikáciou kľúčových génov, aby sa zabránilo replikácii. Tieto vektory sa teraz bežne používajú pri výskume génovej terapie, úpravy génov a bunkovej biológie pre ich účinnosť a trvanlivosť pri dodávaní génov.

Zdroj obrázku: Obiosh.com/product/ Schematický diagram lentivírusového balenia a procesu transfekcie lentivírusu v 293T bunkách

1. Účinná transdukcia génu

Lentivírusový vektor môže účinne dodávať cieľové gény, ako je napríklad gén automobilu, do imunitných buniek, a integrovať tieto gény stabilne do bunkového genómu, čím sa zabezpečí, aby bol gén automobilu nepretržite exprimovaný počas bunkového delenia a proliferácie. Táto vysoká účinnosť transdukčnej schopnosti je základom úspechu imunoterapie.

2. Imunogenicita 

V porovnaní s inými vírusovými vektormi majú lentivírusy nižšiu imunogenitu. Výsledkom je, že keď sa lentivírusy používajú na prenos imunitných buniek, imunitný systém pacienta generuje relatívne slabšiu imunitnú odpoveď na vírus. Pomáha to minimalizovať nežiaduce reakcie, najmä pri dlhodobom prežití buniek po infúzii, čím bráni nadmernému imunitnému odmietnutiu.

3. Vysoká adaptabilita na imunitné bunky

Lentivírusový vektor je schopný účinne prenášať rôzne typy imunitných buniek,najmä T bunky a NK bunky. Prostredníctvom lentivírusovej transdukcie môžu imunitné bunky získať špecifické rozpoznávacie schopnosti nádoru, čím sa zvýši ich schopnosť zacieliť a zabíjať nádorové bunky.

4. Zvýšenie transdukovaných efektorových buniek v rozpoznávaní cieľových buniek 

V imunoterapii,transdukované efektorové bunkyPozri imunitné bunky, ktoré po transdukcii exprimujú CAR a vyvíjajú anti - nádorovú aktivitu. Lentivírusové vektory môžu do týchto efektorových buniek presne dodávať gén automobilu, čo im umožňuje rozpoznávať a zacieliť na nádorové bunky.Cieľová bunkasú nádorové bunky, ktoré sú identifikované a zničené týmito imunitnými bunkami. Prostredníctvom lentivírusovej transdukcie môžu imunitné bunky zvýšiť svoju špecificitu pri rozpoznávaní a usmrcovaní nádorových buniek, čím sa zlepší terapeutická účinnosť.

V tejto súvislosti spoločnosť IPHASE, líder vo výskumných reagentoch in vitro, vyvinula súpravu na balenie lentivírusu a Lentivírusové koncentračné činidlo, aby sa zjednodušila zložitosť transdukcie pre zákazníkov imunoterapie a zlepšila mieru úspešnosti stabilnej génovej transfekcie. Tieto produkty ponúkajú zákazníkom jednotlivé riešenie.

Ipházový lentivírusPhodnoty

Balená súprava Lentivírusobsahuje všetky základné činidlá potrebné prelentivírusový balenie, výrazne zjednodušenie experimentálneho procesu a úspory času a úsilia. Táto súprava obsahuje:

• Lentivírusová balená zmes plazmidov
• Prepravovať činidlo
• plazmid EGFP
• Iphase Lentivírusové činidlo

Táto súprava skutočne zefektívňuje experiment! Bez potreby komplikovanej prípravy činidla je možné len účinne dokončiť iba dodržiavaním zahrnutých pokynov.Medzi jedinečné výhody súpravy patrí krátky čas balenia, vysoký vírusový titer a ľahká prevádzka, vďaka čomu je ideálny pre začiatočníkov v lentivírusovom balení. Každá sada činidiel prechádza prísnou kontrolou kvality, aby sa zabezpečilo presné, spoľahlivé a reprodukovateľné výsledky, čo významne zlepšuje účinnosť transfekcie a stabilitu vírusových vektorov, čím poskytuje silnú technickú podporu pre prípravu imunitných buniek.

Okrem toho, aby pomohol zákazníkom ušetriť náklady, spoločnosť IPHASE tiež vyvinula a produkovala koncentračné činidlo Lentivírusu, ktoré ponúka rýchle a jednoduché koncentračné riešenie.Jednoduchým zmiešaním supernatantu lentivírusu s koncentračným činidlom, po ktorom nasleduje krátka inkubácia a centrifugácia pomocou štandardného odstredivka, sa môžu lentivírusové častice rýchlo koncentrovať. Tento proces nevyžaduje ultracentrifuge, čo z neho robí pohodlnú a nákladovú efektívnu možnosť pre väčšinu laboratórnych používateľov.

Stručne povedané, koncentračné činidlo Ipházové lentivírusové činidlo nielen významne zlepšuje účinnosť transfekcie, ale tiež poskytuje vysoko kvalitnú podporu vírusového vektora pre prípravu imunitných buniek. Je to nevyhnutný produkt pre bežné experimenty, predklinický výskum a ďalšie oblasti aplikácií.

Stručne povedané, imunoterapia, najmä bunky CAR - T -bunky, predstavuje nový smer pri modernej liečbe rakoviny. Prostredníctvom presných procesov, ako je triedenie buniek, aktivácia, transdukcia, expanzia a kontrola kvality, môžu vedci pripraviť účinné a bezpečné produkty imunitných buniek u pacientov, čo umožňuje cielenú liečbu rakoviny.Lentivírusová transdukcia ako základná technológia hrá rozhodujúcu úlohu pri príprave buniek CAR - T a CAR - NK kvôli svojej vysokej účinnosti a stabilite.Vďaka nepretržitému technologickému pokroku má imunoterapia potenciál ponúknuť inovatívne možnosti liečby pre viac pacientov, čo poskytuje väčšiu klinickú hodnotu. V budúcnosti sa očakáva, že imunoterapia prinesie revolučnej terapeutickej nádeji väčšiemu počtu pacientov s rakovinou.

Na uspokojenie potrieb génovej transdukcie, expresie a výskumu chorôb IPHASE ponúka lentivírusové súpravy na obaly, lentivírusové koncentračné činidlá a indiírus. Tieto inditivírusy sú balené so zeleným fluorescenčným proteínom (GFP), červeným fluorescenčným proteínom MCherry a luciferázou, čo umožňuje ľahké sledovanie cieľových buniek in vitro aj in vivo.

Okrem toho môže iphase ponúka aj dve predbalené stopovacie lentivírusy: GFP a Luciferase a McHerry & Luciferase. Tieto indikátory je možné vybrať alebo kombinovať na základe experimentálnych potrieb, zefektívnenia pracovných postupov a zvýšenia účinnosti pre skutočné sledovanie času a monitorovanie cieľových buniek.

IfázaImmunoterapiaRnadšenýPhodnoty

Okrem výrobkov súvisiacich s lentivírusom používaným v terapiách CAR - T alebo CAR - NK, IPHASE ako líder vo výskumných činidlách in vitro tiež významne prispel k podpore inovácií v CGT (bunkovej a génovej terapii) a ďalších oblastiach. IPHASE vyvinula a produkovala leukocyty a PBMC (mononukleárne bunky periférnej krvi) izolované leukaferézou spolu s rôznymi súpravami izolácie imunitných buniekna podporu rýchleho rozvoja imunoterapie.

Produkty iphase ponúkajú nasledujúce výhody aOsvedčenie o analýze (COA)Overené spoločnosťou Iphase je k dispozícii pre každú dávku.

Bezpečnosť 

Produkty ipházy pochádzajú zo zdravých darcov/zvierat, ktoré prešli dôkladným skríningom, s negatívnymi výsledkami vírusového testovania (HIV - 1/2, HBV, HCV, syfilis).

Súlad  

IPHASE poskytuje formuláre informovaného súhlasu podpísané darcami s jasným a vysledovateľným overením zdroja.

Profesionalita

Výrobky poskytované spoločnosťou IPHASE, získané prostredníctvom leukaferézy, riešia vyškolení odborníci. Každá šarža je sprevádzaná zodpovedajúcim COA a výrobky sa prepravujú v prísnom chladnom reťazci, aby sa zaistila bezpečnosť, rýchle dodanie a zabezpečenie kvality.

Zákaznícky servis

Spoločnosť Iphase ponúka vysokú kvalitu po - predajnej službe, ktorá zaisťuje hladký a nepretržitý zážitok počas skúšobného procesu.