Biliare njerëzore dhe shtazore e matricës biologjike bosh për zhvillimin e metodës bianalitike dhe vërtetimin e metodës bianalitike

1 produkte iPhase

2 Biomatrix bosh

Lloje të ndryshme tëmatricat biologjike, përfshirë gjak të tërë, serum, plazma, biliare, qumështi, urina, feces, përmbajtja e zorrëve, organi visceral, humori i qelqit, humori ujor, lëngu cerebrospinal, etj., Të mbledhura nga subjekte të shëndetshme ose kafshë të shëndetshme eksperimentale, quhen kolektivisht si matrica biologjike boshe.

3 Domosdoshmëria e përdorimit të matricave biologjike boshe në studimet paraklinike

In Hulumtimi paraklinik i drogës, Matrica Biologjike boshe është gurthemeli për krijimin dhe vërtetiminMetodat e analizës biologjike. Duke përdorur matrica boshe nga subjekte të shëndetshme ose kafshë eksperimentale, studiuesit mund të përgatisin me saktësi standardet e kalibrimit dhe mostrat e kontrollit të cilësisë, të vlerësojnë specifikën, ndjeshmërinë, saktësinë dhe efektet e matricës së metodave analitike dhe të sigurojnë besueshmërinë e rezultateve të kuantifikimit të përqendrimit të ilaçeve.

4 Validimi dhe krijimi i metodës biologjike dhe zbatimi i matricës biologjike bosh

Siç kërkohet nga udhëzimet FDA/EMA, në krijimin dhe vërtetimin e metodave të analizës së matricës biologjike, duhet të përdoren matricat biologjike boshe për të siguruar saktësinë dhe besueshmërinë e metodës së analizës. Sidomos në analizën LC - MS/MS, ndryshimet në përbërësit e matricës nga burime të ndryshme mund të ndikojnë ndjeshëm në efikasitetin e jonizimit. Matrica e zbrazët përdoret kryesisht për përgatitjen e standardeve të kalibrimit, përgatitjen e mostrave të kontrollit të cilësisë për ekzaminimin e specifikës, selektivitetit, saktësisë, saktësisë, efekteve të matricës, shkallës së rikuperimit, stabilitetit, linearitetit të hollimit, efekteve të ndërhyrjes, etj. Të metodave analitike. Selektiviteti dhe efekti i matricës së metodës së zbulimit kërkojnë kërkesa më të larta për matricën bosh.

5 Skenarët e Aplikimit të Matricës Bile Blank në Zhvillimin e Drogës

Matricë biliare artificiale (Matrica biliare e simuluar)është një zgjidhje sintetike që simulon përbërësit natyrorë biliare dhe përdoret për metabolizmin e drogës, toksikologjinë dhe hulumtimin e analizës biologjike.Matricë boshe biliareKa vlerë të rëndësishme të aplikimit në skenarët e mëposhtëm të zhvillimit të ilaçeve: studime farmakokinetike (PK) për ilaçet e sistemit hepatobiliar, thithjen dhe studimet e metabolizmit të kalimit të parë të ilaçeve orale, studimet e ndërveprimit të acideve biliare, vlerësimin e hepatotoksicitetit dhe studimet e stazës biliare dhe zhvillimin e metodave të analizës biologjike (LC - ms/ms).

6 ilaçe të sistemit hepatobiliary

Në zhvillimin e ilaçeve për sistemin hepatobiliar, matrica e boshllëkut biliare luan një rol të pazëvendësueshëm si një sistem i standardizuar i simulimit in vitro në hulumtimin farmakokinetik (PK), toksikologjik dhe analizë biologjike.

6.1 Vlerësoni karakteristikat e sekretimit biliare të ilaçeve

Hulumtimi mbi qarkullimin hepatointestinal: biliare është një nga rrugët e rëndësishme për sekretimin e ilaçeve dhe metabolitëve të tyre. Duke përdorur matricën biliare artificiale, ndryshimet e përqendrimit të ilaçeve në biliare mund të simulohen për të vlerësuar nëse ato janë reabsorbuar përmes qarkullimit të zorrëve hepatike.

Përcaktimi i shkallës së pastrimit të biliareve: Për ilaçet që ekskretohen në mënyrë aktive përmes biliare (të tilla si statinat dhe antibiotikët e caktuar), biliare artificiale (biliare e simuluar) mund të ndihmojë në sasinë e efikasitetit të tyre të pastrimit dhe të optimizojë regjimin e dozimit.

6.2 Studioni efektin e acideve biliare në thithjen e ilaçeve

Efekti i solubilizimit: Acidet biliare mund të promovojnë shpërbërjen dhe thithjen e zorrëve të ilaçeve lipofilike siç është vitamina D. Biliare artificiale mund të simulojë kompozime të ndryshme të acidit biliare dhe të vlerësojë ndikimin e tyre në bio -disponueshmërinë e drogës.

Ndërveprimet e acidit biliare të drogës: Disa ilaçe (të tilla si liraglutide) mund të konkurrojnë me transportues të acideve biliare (të tilla si BSEP, MRP2), dhe biliare artificiale mund të përdoret për të studiuar ndërveprime të tilla për të shmangur rreziqet e mundshme të stazës biliare.

6.3 Vlerësimi i rrezikut të hepatotoksicitetit dhe kolestazës

Modeli i kolestazës i shkaktuar nga droga: Biliare artificiale mund të simulojë kushte patologjike siç janë pengimi i kanalit biliare dhe hiperbilirubinemia, dhe përdoret për të zbuluar nëse ilaçet ndërhyjnë në rrjedhën biliare ose dëmtimin e qelizave të kanalit biliare.

Analiza e biomarkerit: Duke shtuar përbërës specifikë si bilirubinë, acidet biliare dhe faktorët inflamatorë, ndikimi i ilaçeve në përbërësit biliare mund të vlerësohet dhe mund të parashikohet siguri klinike.

6.4 Përparësitë etike dhe praktike të zëvendësimit të biliare natyrore

Adresimi i çështjes së mungesës së mostrës: Biliare natyrore duhet të merret përmes metodave invazive siç është kateterizimi i kanalit biliare, ndërsa biliare artificiale mund të jetë pafundësisht e përgatitur për të shmangur kufizimet etike.

Konsistenca e serisë: Përbërja e matricës artificiale (matrica e simuluar) është e kontrollueshme, duke zvogëluar ndikimin e ndryshimeve individuale në biliare natyrore në rezultatet eksperimentale.

6.5 Mbështetni zhvillimin e LC - Metodat e Analizës Biologjike MS/MS

Korrigjimi i efektit të matricës: Përbërja komplekse e biliare natyrale (kripëra të larta biliare, fosfolipide, pigmente) lehtë mund të çojë në shtypje jonike ose përmirësim në analizën LC - MS/MS. Matrica biliare artificiale (matrica biliare e simuluar) mund të sigurojë një sfond të qëndrueshëm, të optimizojë ndjeshmërinë dhe saktësinë e metodës.

7 hulumtime të specieve kryq

Përbërja e biliare ndryshon shumë midis kafshëve të ndryshme (minjtë, qentë, majmunët) dhe biliare artificiale mund të standardizojë ndryshimet e specieve dhe të përmirësojë përkthueshmërinë e të dhënave paraklinike.

7.1 Cynomolgus Monkey Biliare (NHP BILE)

Biliare e majmunit Cynomolgus është shumë i ngjashëm me atë të njerëzve për sa i përket përbërjes (siç është profili i acidit biliare) dhe shprehja e transportuesit të drogës (siç janë BSEP, MRP2), duke e bërë atë modelin standard të artë jo - njerëzor primat njerëzor për vlerësimin e sekretimit hepatik të bilianve dhe ndërveprimeve të acidit biliare të drogës.

7.2 BILE BEAGLE QEN

Përmbajtja e fosfolipidit në biliare beagle është relativisht e lartë, duke e bërë atë të përshtatshme për studimin e sekretimit biliare dhe thithjen e varur nga kripa biliare e ilaçeve lipofile. Sidoqoftë, ndryshimet në përbërjen e acidit biliare midis beagle dhe njerëzve kërkojnë kalibrim përmes matricave artificiale.

7.3 Biliare e miut SD

Vëllimi i mbledhjes biliare të minjve SD është relativisht i madh (~ 1 ml/kohë), i cili përdoret gjerësisht për qarkullimin e zorrëve hepatike dhe studimet e hepatotoksicitetit të drogës. Sidoqoftë, duhet të theksohet se baza e tyre e lartë e bilirubinës mund të ndërhyjë në analizën LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 biliare e miut

CD - 1 miu ka një vëllim të vogël biliare (50 - 200 μ L), duke i bërë ato të përshtatshme për të studiuar mekanizmat e modeleve të modifikimit të gjeneve (siç është rruga FXR/PXR), por teknikat e mikro -kuantifikimit janë të nevojshme për adaptim.

7.5 C57BL/6 biliare e miut

Miu C57BL/6 përdoret zakonisht në modelet e sëmundjes metabolike, dhe ndryshimet në përbërjen e tyre biliare mund të pasqyrojnë kushtet patologjike, duke kërkuar përdorimin e matricës biliare artificiale për të simuluar patologjinë.

Modelet e mësipërme duhet të kombinohen me matricën biliare artificiale për të kontrolluar ndryshimet e specieve dhe për të optimizuar krahasueshmërinë e specieve kryq të metodave LC - MS/MS.

Përfundim

Matrica biliare artificiale, si një mjet kryesor për simulimin e funksionit të biliare natyrore, luan një rol të pazëvendësueshëm në zhvillimin e ilaçeve hepatobiliare. Duke standardizuar përbërjen biliare të specieve të ndryshme (të tilla si majmunët Cynomolgus, qentë beagle, minjtë SD, CD - 1 minjtë, minjtë C57BL/6), matrica artificiale biliare adreson në mënyrë efektive sfidat thelbësore të tilla si kufizimet etike, ndryshimet individuale dhe simulimin e shtetit patologjik të mostrave natyrore, duke rritur ndjeshëm besueshmërinë dhe vlerën e përkthimit të kërkimit të drogës.

Me zhvillimin e mjekësisë precize, matrica artificiale biliare do të kombinojë më tej përbërësit specifikë patologjikë dhe teknologjinë mikrofluidike për të simuluar dinamikisht mikro mjedisin e mëlçisë dhe fshikëzës së tëmthit, duke siguruar mbështetje më të fortë për zhvillimin inovativ të ilaçeve.

Fjalët kyçe:Analizë biologjike boshe, mostra e matricës biologjike, analiza e biomatrix, biliare njerëzore, biliare kafshësh, mostër biliare, biliare artificiale, biliare e simuluar, biliare NHP, Cynomolgus Monkey Biliare, Rheany Monkey Monkey Biliare, Biliare Biliare, Rat Bile, Biliare Mouse, LC - MS/MS, Zhvillimi i Metodave Bioanalytical, Metoda Bioanytical Validition

Referim

Li T, Chiang JY. Sinjalizimi i acidit biliare në sëmundjen metabolike dhe terapinë e ilaçeve. Pharmacol Rev. 2014 Tet; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.