Fjalë kyçe:Splenocitet (SPLS); Splenocitet e majmunit Cynomolgus; Splenocitet e majmunit rezus; Splenocitet e qenve; Splenocitet e qenit; Splenocitet e miut; Splenocitet e miut; Splenocitet e minjve; Splenocitet e lepurit; Izolimi i splenociteve; Ngrirja e splenociteve; Shkatërrimi i splenociteve
Produkt iPhase
Splenocitet (SPLS)janë një popullsi heterogjene e qelizave imune të izoluara nga shpretka, një organ jetësor i përfshirë në filtrimin e gjakut, në montimin e përgjigjeve imune dhe ruajtjen e homeostazës. Këto qeliza përfshijnë limfocitet (qelizat T, qelizat B), makrofagët, qelizat dendritike dhe qelizat vrasëse natyrore (NK), të gjitha këto luajnë role kritike në imunitetin adaptiv dhe të lindur. Splenocitet përdoren gjerësisht në hulumtimin paraklinik dhe përkthimor për të studiuar funksionin imunitar, zhvillimin e vaksinave, sëmundjet autoimune dhe imunoterapinë e kancerit.
Roli dhe përbërja e splenociteve (SPLS)
Brenda shpretkës, splenocitet banojnë në rajone të dallueshme: pulpën e kuqe, e cila filtron gjakun dhe riciklon qelizat e vjetra të gjakut të kuq, dhe pulpën e bardhë, ku fillohen përgjigjet imune. Pulpa e bardhë është e organizuar në zonat e qelizave T dhe folikulat e qelizave B, duke lehtësuar ndërveprimet midis antigjenit - qelizat prezantuese dhe limfocitet. Kjo arkitekturë unike i bën splenocitet (SPLS) një mjet të fuqishëm në analizat imunologjike si ELISPOT, citometria e rrjedhës dhe reaksionet e përziera të limfociteve.
Speciet - Splenocitet specifike (SPLS)
-Splenocitet e majmunit cinomolgus:Splenocitet e majmunit Cynomolgus përdoren në hulumtime paraklinike sepse ato imitojnë më ngushtë përgjigjet imune të njeriut, duke e bërë splenocitet e majmunit Cynomolgus ideal për studimet e përkthimit.
-Splenocitet e majmunit rezus:Splenocitet e majmunit rezus vlerësohen në mënyrë të ngjashme për ngjashmëritë e tyre të ngushta imunologjike me njerëzit. Studimet që përdorin splenocitet e majmunit rezus ndihmojnë në urën e hendekut midis modeleve të kafshëve dhe aplikimeve klinike.
-Splenocitet e qenve / splenocitet e qenit:Në hulumtimin veterinar, splenocitet e qenve (ose splenocitet e qenit) përdoren për të studiuar çrregullimet imune në qen dhe për të tërhequr krahasime me përgjigjet imune të njeriut.
-Splenocitet e lepujve: Splenocitet e lepujve janë të rëndësishme në studimet mbi prodhimin e antitrupave dhe zhvillimin e vaksinave. Splenocitet e lepujve ndihmojnë në zbulimin e detajeve që mund të ndryshojnë nga splenocitet e miut ose splenocitet e miut.
-Splenocitet / minjtë splenocitet e miut:Splenocitet e miut janë një nga splenocitet më të studiuara shpesh (SPLS) në imunologji. Protokollet për splenocitet e izolimit nga minjtë janë të vendosura mirë, dhe të dy splenocitet e miut dhe splenocitet e minjve përdoren për citometrinë e rrjedhës, ELISPOT dhe analizat e tjera funksionale.
-Splenocitet e miut:Splenocitet e miut ofrojnë një model plotësues për imunotoksikologjinë dhe studimet e vaksinave. Splenocitet e miut shpesh krahasohen me splenocitet e miut për të kuptuar ndryshimet e interspecies.
Izolimi i splenociteve
Izolimi i splenociteveështë procesi i nxjerrjes së qelizave imune nga shpretka që do të përdoret në aplikime të ndryshme kërkimore, të tilla si citometria e rrjedhës, analizat e prodhimit të citokinës ose reaksionet e përziera të limfociteve.
Sprleti u hoq në kushte aseptike, terren në tretësirë izolimi dhe u transferua në një tub steril që përmbante medium RPMI 1640. Shtresa e leukociteve u mblodh me kujdes pas centrifugimit. Qelizat u lanë me RPMI 1640 të mesme, të centrifuguar dhe supernatantin u hodhën poshtë. Ky hap i larjes u përsërit 1 - 2 herë para se të përdoren qelizat e izoluara për eksperimente të mëtejshme.
Splenocitet e ngrirjes
Splenocitet e ngrirjesështë një hap thelbësor për ruajtjen e qelizave për përdorim në të ardhmen. Cryopreservation lejon studiuesit të ruajnë splenocitet për periudha të zgjatura pa kompromentuar qëndrueshmërinë ose funksionalitetin e tyre.
Supernatanti i pezullimit të qelizave të centrifuguar mirë nga hapi i izolimit është hedhur poshtë dhe përqendrimi i qelizës u hollua në mediumin e ngrirjes. Shtoni një alikot në secilin tub ngrirjeje dhe transferojeni në një enë ngrirjeje, duke siguruar që qelizat të mbeten në pezullim. Ngrini shpejt kontejnerët e ngrirjes në një frigorifer - 80 ° C. Transferoni në - 150 ° C enë frigoriferike (ose rezervuari të lëngshëm të azotit) për një kohë të gjatë - ruajtje me afat.
Shkatërrimi i splenociteve
Shkatërrimi i splenociteveDuhet të bëhet me kujdes për të siguruar qëndrueshmërinë e lartë të qelizave dhe funksionalitetin pas cryopreservation. Procesi i shkrirjes është zakonisht i shpejtë për të minimizuar efektet e dëmshme të formimit të kristalit DMSO dhe akullit.
Cryotubat transferohen në një banjë uji 37 ° C dhe shkrirë derisa të mbeten vetëm kristalet e akullit të imët në tuba. Shtoni 0.5 - 1ml të mediumit të kulturës qelizore në tubin e ngrirë, rivendosni dhe transferoni pezullimin në një tub 15ml të mbushur me medium të kulturës qelizore. Centrifuga, hiqni supernatantin dhe trokitni lehtë mbi tubin për të liruar rregullimin e qelizave. Shtoni 1ml të mediumit të kulturës qelizore, goditni dhe rivendosni me një pipetë, shtoni të mesëm në një vëllim prej 15 ml. Centrifuge, de - supernatize, shtoni 1ml të mediumit të kulturës qelizore, duke shtuar medium sipas përqendrimit të pritshëm të qelizave. Vendosni qelizat në një inkubator CO2 dhe inkuboni për 1H me një hendek të vogël në kapak. Në fund të inkubacionit, rivendosni dhe lini për 1min për të lejuar që mbeturinat e qelizave të grumbulluara të precipitojnë. Pezullimi i qelizës pa reshje u transferua me kujdes në një tub të ri 15ml. Qelizat u llogaritën për të përcaktuar aktivitetin e qelizave.
Përfundim
Splenocitet, me përbërjen e tyre të larmishme dhe rolin kryesor në përgjigjet imune, janë mjete të paçmueshme në kërkimet imunologjike. Pavarësisht nëse rrjedhin nga brejtësit, primatët ose speciet e tjera si lepujt dhe qentë, splenocitet lehtësojnë studimet kritike në funksionin imunitar, mekanizmat e sëmundjes, zhvillimin e vaksinave dhe imunoterapinë e kancerit. Proceset e izolimit, ngrirjes dhe shkrirjes janë thelbësore për ruajtjen e integritetit dhe qëndrueshmërisë së tyre, duke u mundësuar studiuesve të eksplorojnë dinamikën qelizore në modele të ndryshme. Ndërsa kuptimi ynë për imunologjinë thellohet, përdorimi i splenociteve do të vazhdojë të jetë i dobishëm në ndërtimin e hendekut midis studimeve paraklinike dhe aplikimeve klinike, duke siguruar përparime në mjekësinë njerëzore dhe veterinare.
Koha e postimit: 2025 - 03 - 28 15:39:43