Nyababkeun beurit s9 S1: Sistem aktivitas metabolik pikeun vitoxoxicity sareng tes mutasi

Konci: Ocd 471, oecd 473, OcD 476, OifD 487, ujian mutasi, Griotrix, Abomosom, HGPTS / TK Asal

Produk iphase

Bubuka

Dikuatkeun beurit ati S9mangrupikeun komponén konci dina nganalisisKeloktrik genetikPoténsi bahan kimia, hususna dina tokéik Aturan. Éta biasana dianggo di kombinasi sareng assay vitro, sapertosUjian ames jeungtés mutasi, pikeun meunteun sipat panyebaran sanyawa. Ku nyayogikeun hiji sistem énzimatik beunghar ku sichochrome P450 (cere syp450), anu mendorong beurit ati dina presiasi genial atanapi kanker.

Dikuatkeun beurit ati S9

Fraksi s9 anu ngarujuk kana tulisan - supochatant mitokhial dibalikeun tina homogen uyah saatos nyusun léngkah sentrifewation. Istilah "ngakibatkeun" nujerkeun beurit sareng sanyawa jumlahna anu ningkatkeun kagiatan tanaga ati, khususna ieu tanggung jawab Pelabolisme.

Perda ati sinar S9 Lauk ngandung rupa-rupa énzim anu afted dina fase i sareng fase métabolisme bahan kimia. Ieu kalebet énzim sapertos kitu cytochomhome P450 Millocgtypyes, anu ruang agama ofhereriferifatif, dikhususkeun métabolisme ati manusa.

Aktivitas Cyp450 sareng aktivitas métabolik

Kulawarga énzim P450 (Cyp450) puterkeun panci pivotal dina métabolisme, kalebet seueur farmasi. Fraksi s9 S9 ngandung énzim ieu sareng penting pikeun ngaevaluasi bahan kimia anu ngan ukur janten genahok saatos aktivasina saatos accanik.

Seueur sanyawa anu mimiti moal - toksik tapi tiasa janten toksik saatos metabolisme dina ati. Pro ieu - mutagen (anu peryogi akpation métabik anu janten mutabat) sareng pro - karsianana pikeun nyababkeun kanker anu kaasup ngaliwatan dasar aktivasina s9 metabolis. Tanpa inline énzim métabolik sapertos cipt450, bahan ieu tiasa munculna bahaya dina tés genotogenitas standar.

Ku nambihan ngilik kana beurit ati s9 pikeun di Assays, Panaliti tiasa netepkeun kumaha zat interaksi kana khamat. Ieu sacara penting pikeun betak, sakumaha Nétabolisme ku Cips450 énzim mangrupikeun léngkah kritis dina apotheretic béda ubar.

Aplikasi anu dikaluarkeun tina beurit ati S9

1. 1. UMES (OECD 471)

Tés Ames, digaris dina pedomanOecd 471, mangrupikeun salah sahiji anu paling saé - anu saé pisan sareng cara anu dianggo pikeun nganalisis mutagenity. Éta ngalibatkeun nyebarkeun irisan salmonella ka kimia tés pikeun ningali upami ngahasilkeun mutasi anu nyababkeun mutasi anu nyababkeun baktéri pikeun histdia pikeun nyegah baktéri pikeun histdia pikeun nyegah baktéri pikeun histdia pikeun nyegah baktéri pikeun histdia pikeun nyegah baktéri pikeun histdia pikeun nyegah baktéri pikeun histdia pikeun nyegah baktéri pikeun histdia pikeun nyegah kana hanjakalna.

Pikeun simate prosés métabolik manusa, nolak beurit ati s9 sering ditambah kana sistem tés. Fraksi s9 nyayogikeun énzim anu dipikabutuh, kalebet cipsp450, anu panginten dibutuhkeun pikeun métabolize sanyad ku bentuk anu langkung révénsial. Kombinasi s9 kalayan tes ames ngamungkinkeun pikeun penilaian anu langkung lengkep tina potitasi mutabien ku mimpitan atanapi mékanisme mutabolik.

2. 2.Ujian mutasi (uji abomosomal, tés micronucleusus, sareng anu sanés dina assay vitro)

Salian ujian Ames, tés mutasi biasana dianggo pikeun ngirafirasi minyak kimia. Ses ieu langkung cacad dina nganalisa sababaraha karusakan genetik, kalebet mutasi kromosomal, tambakan Geni, sareng formasi Micronuclei. Inditted beurit SM dianggo di uji mutasi pikeun alesan di handap ieu:

Tés micronucleus (oecd 487)

Tes ieu ngadeteksi pembentukan Micronuclei di sél, dimana alit, awak ékstranuclal anu nyababkeun panyaleuluan kromosom atanapi sadayana krisisi sél nalika divisi sél nalika dialapkeun kana divisi sél nalika dialompokeun. Na tés micronucleustiasa ngadeteksi classiogen (kromosida - ngejat) sareng anténén (mangaruhan nomer kromosom). Pangaruh. Turir babakan SM dianggo di dieu pikeun ngaktipkeun zat test métabolis, salaku sababaraha bahan kimia ngan ukur ngabalukarkeun karusakan krabosomal sakali aranjeunna parantos kaparobolisasi ku énzim. S9 phracted ningkatkeun sensitipitas tés ku simhurate aktivasina metabolik anu tiasa kajantenan di Vivo.

Uji Abrosomal (OECD 473)

Tés ieu ngiringan naha zat tiasa nyababkeun ruksakna struktural pikeun kromosom ku ngarecah pendatin, lebanja, turutan, atanapi jinis aberrasior. Sapertos tés micronucleus,ujian abomosomaltiasa diterapkeun sareng atanapi tanpa aktivasina. Ngaluarkeun beurit

Méja 1. Pertimbangan komparasi tés mutasi

HPRT / HGPRT Assay (OECD 476)

DinaHPRT / HGPRT CATETAN, budaya hamster Cina (Copo atanapi V79) atanapi Lmmphloid manusa (Tk6) kakeunaan campur ku kimia dina ayana CRNAifes kana Spéstémber Campuran ka Produk Cragnit. Saatos pengobatan ringkes sareng periode ekspras tujuh dinten, sél anu ditantang kalayan 6-ahli 6-ahli 6-buang; Ngan klonian beuki merangan anu leungit dina anu hipopheranthine-panyiklansltransferase Gine salamet. Ku ngabandingkeun engkol

TK Asays (OECD 490 & Oecd 476)

NaTK Assay Tangguk boh B51780 Boxphomomy Makan (OECD 490) atanapi Co Cai (Oecd 476) hétozyge direkayat di Thysidine Locus Locus. Di handap ngarobih bahan kimia es ± S9 Campur, sél waluh sareng nyalilkeun sedeng dina sedeng anu ngandung trifluornyothym oft, anu nganteurkeun sél terti, anu maéhan sél anu. Salami TKON Muths ngabentuk koloni anu langkung ti 10-14 poé, sareng tabél leutik koloni sering ngagambarkeun kajadian krokaran Choliosom sareng Cutonén anu ageung ngagambarkeun mutiatan titik. Sakumaha dina HPRT / HGRTS Assay, Kontrol Synotoxity sareng Mutagen Mutten Muttine Muttase Ngawengku dina Réktip Mutation

4. 4. Penilaian résiko kanker

Ngalang ngirangan ati s9 ogé dianggo dina panangan anu diajarkeun sacara ngan ukur ngaksed kanker - nyababkeun poténsi zat. Ku cara nyéépkeun kagiatan métabolik anu lumangsung dina ati manusa, fraksi bak éta tiasa ngabantosan sanyawa anu tiasa ngakidangkeun pembentukan métabolites ka DNAstif.

Uji Ames Ditunjuk ku Hamster Alts Si Himster S9

Numutkeun tungtunan panganyarna anu dikaluarkeun ku Badan Médial Éropa (Ema), tes ames tradisional moal cukup pénén pikeun ngadeteksi poténsi silih mak - NGMA), ti - anu sanésna. Therefore, the Enhanced Ames Test, developed by the National Center for Toxicological Research (NCTR), a division of the U.S. Food and Drug Administration (FDA), has been recommended as a more reliable alternative. Tés amarah anu diwanohalkeun nambihan ngiringan hamster ati S9, anu dipendakan dina anu ngandung 30% beurit ati S. hamster ati S. hamster ati S.. Roti sareng supernatants descosomal desmosomal (S9s) kedah disiapkeun ti sion shiftent dirawat ku P450 én Richokrom (ngintun zat. Ku ngagunakeun ati hamster s9, uji ditingkatkeun langkung saé langkung saé simulasi méja manusa sareng ningkatkeun réshabilitas.

Kacindekan

Nyababkeun beurit ati s9 cocog sareng alat kritis dina uji genoticatority, ngabantosan pengelenikan pangenal sareng prupulasi meunteun kompatisi bahan kimia kompagén. Ku nyayogikeun sistem aktivitas akurat, ningkatkeun kamampuan assay sapertos uji ames, tés mutasi, sareng studi kagiatan cyp450 pikeun janten minyak anu meryogikeun minyak anu merekkeun aktivasina. Aplikasi na mah penting pikeun hasil kasalametan narkoba anyar, bahan produksi konsumen. Kalayan peranna dina métabolisme ati manusa manusa, anu ngaguarkeun beurit alrac beuteung2 terus janten bagian anu penting dina bagian anu teratur sareng pamariksa kaamanan modéren sareng péta anu penting.