Mchanganuo wa kulinganisha wa seli za damu za pembeni (PBMCs): matumizi ya spishi katika chanjo na utafiti wa matibabu

IBidhaa za Awamu

Seli za damu za pembeni za mononuclear (PBMCs)

Seli za damu za pembeni za mononuclear (PBMCs)ni idadi kubwa ya seli za kinga zinazopatikana katika damu ya pembeni, inayoonyeshwa na kiini kimoja cha pande zote. Ni pamoja na lymphocyte -kama vile seli za T, seli za B, na seli za muuaji wa asili (NK) -na monocytes, wakati ukiondoa granulocytes (k.v. neutrophils) na erythrocyte. PBMC kawaida hutengwa kupitia wiani wa gradient centrifugation kwa kutumia media kama Ficoll, ambayo hutenganisha seli kulingana na buoyancy. Njia hii isiyo ya kuvamia inaruhusu ufikiaji rahisi wa vifaa muhimu vya kinga, na kufanya PBMCs kuwa muhimu sana katika utafiti wa chanjo na maendeleo ya matibabu.

PBMC isolation

Saizi, morphology na mvuto maalum wa seli moja zilizo na seli hutofautiana na seli zingine kwenye damu ya pembeni. Nguvu maalum ya seli nyekundu za damu na leukocytes ya polymorphonuclear inazidi 1.080, ile ya seli za mtu binafsi ni karibu 1.070, na ile ya vidonge ni karibu 1.030. Kwa hivyo, tofauti kati ya mvuto maalum wa seli tofauti za damu na seli za mtu binafsi zinaweza kutumiwa kutenganisha seli kadhaa za damu kutoka kwa seli za mtu binafsi. Ficoll wiani gradient centrifugation ndio njia inayotumika sana kwaKutengwa kwa PBMCna utakaso. Ficoll ni multimer ya sucrose, upande wowote, na uzito wa wastani wa 400,000, na wakati wiani ni 1.2 g/mL, haizidi shinikizo la kawaida la kisaikolojia, na halipitii membrane ya kibaolojia, kwa hivyo hutumiwa kwa kawaida kwa PBMC. Kwa hivyo, mara nyingi hutumiwa kama suluhisho la kujitenga kwa kujitenga kwa PBMC. Erythrocyte na granulocyte zina mvuto mkubwa na kuzama chini ya bomba baada ya centrifugation; Lymphocyte na monocytes zina mvuto maalum chini ya au sawa na mvuto maalum wa suluhisho la kujitenga, na kuelea juu ya uso wa suluhisho la kujitenga baada ya centrifugation, na sehemu ndogo ya seli pia zinaweza kusimamishwa katika suluhisho la kujitenga. Kwa kutamani seli za safu nyeupe za membrane kwenye uso wa kioevu wa suluhisho la kujitenga na kuziosha ipasavyo, seli za juu zilizo na kiini, i.e., PBMC, zinaweza kutengwa na damu ya pembeni.

PBMCs katika spishi tofauti

Katika primates zisizo za kibinadamu, haswa nyani wa cynomolgus na tumbili ya rhesus, utafiti wa PBMC unathaminiwa sana kwa sababu ya kufanana kwa kisaikolojia wanayoshiriki na wanadamu. Utafiti wa kutumiaCynomolgus tumbili PBMCnaRhesus tumbili PBMCimewezesha tafiti za kina za mifumo ya kinga, na tafiti nyingi zinazotumia tumbili PBMC zimesisitiza uwezo wao wa kutafsiri kwa kinga ya binadamu. Matumizi ya tumbili PBMC katika upimaji wa chanjo, uchunguzi wa dawa za kulevya, na moduli ya kinga imekuwa msingi katika utafiti wa preclinical na kliniki.

Vivyo hivyo, uchunguzi unaohusishaMbwa PBMCwamechangia kwa kiasi kikubwa chanjo ya mifugo. Utafiti unaotumia mbwa PBMC umeangazia njia za kukabiliana na kinga katika canines, wakati utafiti unaohusishaCanine PBMCpia imeangazia kufanana na kazi ya kinga ya binadamu. Katika uwanja wa magonjwa ya zoonotic, utafiti wa mbwa wa PBMC na canine PBMC wametoa data muhimu juu ya maingiliano ya pathogen - mwenyeji, akisisitiza jukumu la seli hizi katika uchunguzi wa magonjwa na maendeleo ya matibabu. Matumizi ya mara kwa mara ya PBMC ya mbwa na canine PBMC katika masomo ya kulinganisha inasisitiza umuhimu wao kama mfumo wa mfano.

Aina za panya, ambazo ni pamoja napanya PBMCnaPanya PBMC, kwa jadi wamekuwa mstari wa mbele katika utafiti wa kinga. Uchunguzi kwa kutumia PBMC ya panya umetoa mtazamo wa kina juu ya udhibiti wa kinga katika hali sugu ya uchochezi, na utumiaji wa kina wa PBMC ya panya imekuwa muhimu kwa masomo ya maumbile na fundi ya autoimmunity na maambukizi. Watafiti wanaendelea kutegemea PBMC zote mbili na PBMC ya panya ili kuchunguza michakato tata ya kinga, na kufanya mifano hii kuwa muhimu. Kwa kuongezea, ujumuishaji waHamster PBMCKatika usanidi wa majaribio umeongeza mwelekeo mwingine kwa uchunguzi wa kinga, kwani masomo ya Hamster PBMC mara nyingi hutoa ufahamu wa riwaya ndani ya pathogenesis ya virusi na mikakati ya ukwepaji wa kinga. Na Hamster PBMC inayosaidia utafiti juu ya PBMC ya panya na PBMC ya panya, mifano ya panya kwa pamoja huunda zana kamili ya masomo ya kinga.

Aina kubwa za wanyama pia zimeimarisha shamba, naMinipig PBMCKucheza jukumu muhimu katika kufunga masomo ya preclinical na matumizi ya kliniki. Matumizi ya Minipig PBMC imeonekana kuwa ya faida katika dawa ya kuzaliwa upya na utafiti wa upandikizaji wa chombo, ambapo MiniPig PBMC hutoa jukwaa linalofaa kisaikolojia la kujaribu matibabu mpya. Kwa kuongeza, uchunguzi ukitumiaSungura PBMCzimekuwa muhimu katika uzalishaji wa antibody na utafiti wa shida za autoimmune, na utafiti wa sungura wa PBMC unatoa ufahamu muhimu wa kinga. Kwa kutumia Minipig PBMC na PBMC ya sungura katika tandem, watafiti wanaweza kutathmini ufanisi na usalama wa chanjo ya riwaya katika mifumo ambayo inaiga kwa karibu fiziolojia ya binadamu.

Feline naPaka PBMCUtafiti umetengeneza niche yake katika utafiti wa maambukizo ya retroviral na dysfunction ya kinga. Uchunguzi unatumiaFeline PBMCTumeendeleza uelewa wetu wa mfumo wa kinga ya feline, wakati masomo na CAT PBMC yametoa dirisha katika majibu ya kinga yanayohusiana na maambukizo ya virusi. PBMC zote mbili za PBMC na PBMC zimeonyeshwa mara kwa mara katika utafiti wa kuchunguza kufanana kati ya virusi vya feline na kinga ya binadamu, ikithibitisha kuwa matumizi ya mara kwa mara ya feline PBMC na PBMC ni muhimu kwa kukuza mikakati ya utambuzi na matibabu.

Immunology ya Avian haijaachwa nyuma, naKuku PBMCnabata PBMCMasomo yanayotoa ufahamu muhimu katika mifumo ya kinga ya ndege. Utafiti wa kutumia PBMC ya kuku umebaini mambo ya kipekee ya majibu ya kinga ya ndege, wakati uchunguzi unaohusisha bata PBMC umeimarisha zaidi uelewa wetu wa upinzani wa pathogen katika spishi za ndege. Matumizi ya mara kwa mara ya PBMC ya kuku na bata PBMC katika masomo yanayochunguza maambukizo ya virusi na ufanisi wa chanjo inaonyesha umuhimu wao katika kudhibiti magonjwa ambayo yanaathiri idadi ya wanyama na wanadamu.
Kwa kuongeza, masomo kwa kutumiaNguruwe ya Guinea PBMCwamekuwa katikati ya kifua kikuu na utafiti wa chanjo, ambapo nguruwe ya nguruwe PBMC mara kwa mara hutumika kama viashiria vya kuaminika vya majibu ya kinga. Sambamba, uchunguzi unaohusishaAlpaca PBMCnaKamera PBMCwamevutia umakini kwa sababu ya miundo ya kipekee ya antibody iliyopo katika spishi hizi. Utafiti unaohusisha Alpaca PBMC na Camel PBMC umefunua matumizi ya riwaya ya matibabu, na Alpaca PBMC na ngamia PBMC ikitumiwa mara kwa mara kuchunguza ubunifu wa teknolojia za nanobody na matibabu ya msingi.

Michango yaBovine PBMCnaKondoo PBMCKwa chanjo ya kilimo pia imekuwa ya kushangaza. Utafiti na bovine PBMC umetoa ufahamu wa kina ndani ya ugonjwa wa magonjwa ya bovine na magonjwa ya kupumua, na utafiti wa kina kwa kutumia PBMC ya bovine umearifu moja kwa moja mikakati ya kuboresha afya ya ng'ombe. Vivyo hivyo, utumiaji wa mara kwa mara wa PBMC ya kondoo katika uchunguzi wa kinga imeongeza uelewa wetu wa majibu ya kinga ya nguvu, na utafiti wa kondoo wa PBMC unaendelea kuongoza maendeleo ya chanjo na itifaki za usimamizi wa magonjwa.

Jukumu katika utafiti wa kinga

PBMC inaweza kuiga katika mazingira ya vivo na kutoa mfano mzuri wa vitro kwa maendeleo ya dawa. Kwa kuona athari za dawa juu ya kuongezeka kwa PBMC, apoptosis na cytotoxicity, ufanisi na usalama wa dawa zinaweza kutathminiwa hapo awali. Kwa kusoma athari za dawa kwenye malengo ya hatua na njia za kuashiria za PBMC, inasaidia kugundua malengo mapya ya hatua za dawa, na matokeo haya yanaweza kutoa maoni na mwelekeo mpya kwa maendeleo ya dawa.

Maombi katika Antibody - Kiini cha Kutegemea - Cytotoxicity iliyoingiliana (ADCC)

Matumizi ya PBMC katika ugunduzi wa dawa inawakilishwa naAntibody - Kiini cha Kutegemea - Cytotoxicity iliyoingiliana (ADCC). Antibody - Kiini cha kutegemewa - cytotoxicity iliyoingiliana, kama jina linavyoonyesha, hutegemea antibody - upatanishi wa seli kuua kuua seli zinazolenga. Mchakato maalum unaweza kueleweka kama ifuatavyo: sehemu ya Fab ya antibody inafunga kwa epitope ya antigenic kwenye kiini cha lengo. Sehemu ya FC ya antibody inafungamana na FCR kwenye uso wa seli ya NK (kwa kuwa seli za NK ndio seli kuu ambazo zinaweza kuchukua jukumu la ADCC, hii inatumika kama mfano), na kwa hivyo seli ya NK imeamilishwa, na perforin na granzyme hutolewa. Perforin na granzyme huingia kwenye seli kupitia pore iliyoundwa kwenye membrane ya seli inayolenga na kusababisha kiini cha lengo kufa kwa kuamsha apoptosis - Enzymes zinazohusiana.

Maombi katikaothMaendeleo ya dawa ya immunotherapeutic

• - Majibu ya lymphocyte iliyochanganywa (MLR)

Seli za msingi za DC na seli za T zimefungwa - zilizowekwa katika mfumo ambao unaweza kutumika kutathmini uanzishaji wa seli ya DC - upatanishi wa T. Seli za DC zinaonyesha PD - L1 kwa idadi kubwa juu ya uso wao, ambayo inafunga kwa PD - 1 juu ya uso wa seli za T ili kuizuia. Ikiwa dawa inaweza kuzuia kwa ufanisi njia ya athari kati ya hizo mbili, inaweza kuchochea kuongezeka kwa seli za T kwa idadi kubwa, na hivyo kuthibitisha shughuli za dawa.

- T Cellactivation Assays

T - uanzishaji wa seli ni moja wapo ya kawaida inayotumika kutathmini athari za dawa za immunotherapy. Katika uanzishaji wa seli ya T, seli za T Cultured T kawaida hutumiwa na kupewa kuchochea sahihi, kama vile antijeni au antibodies, kushawishi uanzishaji wa seli ya T

- T Assay ya Kuongeza Kiini

T - Kuongezeka kwa seli kunaweza kutumiwa kukagua wagombea wa dawa za kinga na kutathmini ufanisi wa dawa kwa kulinganisha kiwango cha kuongezeka kwa seli katika dawa tofauti - vikundi vilivyotibiwa dhidi ya kikundi cha kudhibiti

- Staphylococcal enterotoxin B kuchochea kwa PBMC

Staphylococcal enterotoxin B ni superantigen ambayo inafunga moja kwa moja kwa molekuli za MHC kwenye antigen - kuwasilisha seli na huwasilishwa kwa receptors za seli. Staphylococcal enterotoxin B ina uwezo wa kutokuwa - kuamsha seli t - na kusababisha kutolewa kwa pro - cytokines za uchochezi, kama vile il - 2, il - 6, nk.

Jukumu la PBMC katika ugonjwa wa kutolewa kwa cytokine

PBMC ina jukumu muhimu katika maendeleo yaDalili ya kutolewa kwa Cytokine(CRS), majibu ya papo hapo na ya maisha - ya kutishia mfumo wa uchochezi. Inapochochewa - iwe na chanjo kama seli za CAR - T, antibodies za monoclonal, au kwa maambukizo - seli hizi huamilishwa sana na huweka haraka anuwai ya cytokines kama vile IL - 6, IL - 1, IFN -, na TNF - α. Uzalishaji huu wa cytokine unaweza kusababisha kasino ya matukio ikiwa ni pamoja na homa, kuvuja kwa mishipa, hypotension, na dysfunction ya organ. Kuelewa mchango wa PBMCs katika CRS kumesababisha maendeleo ya uingiliaji uliolengwa, kama vile IL - 6 receptor inhibitors, kusaidia kupunguza dalili kwa kusukuma dhoruba ya cytokine wakati wa kuhifadhi athari za kinga.

ConKuingiliana

Kwa muhtasari, nakala hii inasisitiza jukumu muhimu ambalo PBMCs huchukua katika kukuza uelewa wetu wa mifumo ya kinga katika wigo mpana wa spishi. Kwa kuchunguza michango ya kipekee - kutoka kwa mifano ya hali ya juu ambayo inaangazia fiziolojia ya kibinadamu hadi panya, wanyama wakubwa, na mifumo ya ndege ambayo kila moja hutoa faida za utafiti tofauti - hakiki hii inaonyesha jinsi masomo ya kulinganisha hayasawazishi tathmini za mapema tu lakini pia huweka njia ya mikakati ya ubunifu ya kinga. Ujumuishaji wa utafiti wa PBMC katika vikoa mbali mbali kama vile maendeleo ya chanjo, upimaji wa ufanisi wa dawa, na uchunguzi wa njia za kinga za riwaya zinaonyesha jukumu lake muhimu katika sayansi ya msingi na matumizi ya kliniki. Mwishowe, uchambuzi wa spishi - za PBMCs zinathibitisha thamani ya mifano hii ya seli kama zana za msingi katika kutafsiri uvumbuzi wa benchi kuwa matibabu madhubuti kwa changamoto mbali mbali za kinga.

KManeno: Damu ya pembeni ya mononuclear, Cynomolgus tumbili PBMC, Rhesus tumbili PBMC, Mbwa PBMC, Canine PBMC, Panya PBMC, panya PBMC, Panya PBMC, Hamster PBMC, Minipig PBMC, Sungura PBMC, feline PBMC, Paka PBMC, Kuku PBMC, bata PBMC, Nguruwe ya Guinea PBMC, Alpaca PBMC, Kamera PBMC, Bovine PBMC, Kondoo PBMC, Antibody - Kiini cha Kutegemea - Cytotoxicity iliyoingiliana (ADCC), Dalili ya kutolewa kwa Cytokine, PBMC waliohifadhiwa, PBMC iliyohifadhiwa,Kutengwa kwa PBMC, Thawing PBMC, Ibada PBMC, Leukopak, Leukapheresis PBMC, HLA typed PBMC.