రోగనిరోధక పరిశోధనలో స్ప్లెనోసైట్లు: జాతులు మరియు ఒంటరితనం, గడ్డకట్టే, కరిగించే దశలు

కీవర్డ్లు:స్ప్లెనోసైట్లు (SPL లు); సైనోమోల్గస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు; రీసస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు; కుక్క స్ప్లెనోసైట్లు; కనైన్ స్ప్లెనోసైట్లు; ఎలుక స్ప్లెనోసైట్లు; మౌస్ స్ప్లెనోసైట్లు; ఎలుకల స్ప్లెనోసైట్లు; కుందేలు స్ప్లెనోసైట్లు; స్ప్లెనోసైట్స్ ఐసోలేషన్; గడ్డకట్టే స్ప్లెనోసైట్లు; కరిగించే స్ప్లెనోసైట్లు

ఐఫేస్ ఉత్పత్తి

ప్లీహమునకు సంబంధించినప్లీహము నుండి వేరుచేయబడిన రోగనిరోధక కణాల యొక్క భిన్నమైన జనాభా, రక్తాన్ని ఫిల్టర్ చేయడం, రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలను పెంచడం మరియు హోమియోస్టాసిస్‌ను నిర్వహించడం వంటి ముఖ్యమైన అవయవం. ఈ కణాలలో లింఫోసైట్లు (టి కణాలు, బి కణాలు), మాక్రోఫేజెస్, డెన్డ్రిటిక్ కణాలు మరియు సహజ కిల్లర్ (ఎన్‌కె) కణాలు ఉన్నాయి, ఇవన్నీ అనుకూల మరియు సహజమైన రోగనిరోధక శక్తిలో క్లిష్టమైన పాత్రలను పోషిస్తాయి. రోగనిరోధక పనితీరు, టీకా అభివృద్ధి, ఆటో ఇమ్యూన్ వ్యాధులు మరియు క్యాన్సర్ ఇమ్యునోథెరపీని అధ్యయనం చేయడానికి స్ప్లెనోసైట్లు ప్రిలినికల్ మరియు అనువాద పరిశోధనలో విస్తృతంగా ఉపయోగించబడతాయి.

స్ప్లెనోసైట్స్ (SPL లు) యొక్క పాత్ర మరియు కూర్పు

ప్లీహము లోపల, స్ప్లెనోసైట్లు విభిన్న ప్రాంతాలలో నివసిస్తాయి: ఎరుపు గుజ్జు, ఇది రక్తాన్ని ఫిల్టర్ చేస్తుంది మరియు పాత ఎర్ర రక్త కణాలను రీసైకిల్ చేస్తుంది మరియు తెల్లటి గుజ్జు, ఇక్కడ రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలు ప్రారంభించబడతాయి. తెలుపు గుజ్జును టి సెల్ జోన్లు మరియు బి సెల్ ఫోలికల్స్ గా నిర్వహించారు, యాంటిజెన్ మధ్య పరస్పర చర్యలను సులభతరం చేస్తుంది - కణాలు మరియు లింఫోసైట్లు ప్రదర్శిస్తుంది. ఈ ప్రత్యేకమైన నిర్మాణం ఎలిస్పాట్, ఫ్లో సైటోమెట్రీ మరియు మిశ్రమ లింఫోసైట్ ప్రతిచర్యలు వంటి రోగనిరోధక పరీక్షలలో స్ప్లెనోసైట్లు (SPL లు) శక్తివంతమైన సాధనంగా చేస్తుంది.

జాతులు - నిర్దిష్ట స్ప్లెనోసైట్లు (SPL లు)

-సైనోమోల్గస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు:సైనోమోల్గస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు ప్రిలినికల్ పరిశోధనలో ఉపయోగించబడతాయి ఎందుకంటే అవి మానవ రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలను మరింత దగ్గరగా అనుకరిస్తాయి, ఇది సైనోమోల్గస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు అనువాద అధ్యయనాలకు అనువైనదిగా చేస్తుంది.

-రీసస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు:రీసస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు మానవులకు వారి దగ్గరి రోగనిరోధక సారూప్యతలకు సమానంగా ఉంటాయి. రీసస్ మంకీ స్ప్లెనోసైట్లు ఉపయోగించే అధ్యయనాలు జంతు నమూనాలు మరియు క్లినికల్ అనువర్తనాల మధ్య అంతరాన్ని తగ్గించడంలో సహాయపడతాయి.

-కుక్క పళ్ళెం:పశువైద్య పరిశోధనలో, కుక్కల స్ప్లెనోసైట్లు (లేదా కుక్కల స్ప్లెనోసైట్లు) కుక్కలలో రోగనిరోధక రుగ్మతలను అధ్యయనం చేయడానికి మరియు మానవ రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలతో పోలికలను గీయడానికి ఉపయోగిస్తారు.

-కుందేలు స్ప్లెనోసైట్లు: యాంటీబాడీ ఉత్పత్తి మరియు టీకా అభివృద్ధిపై అధ్యయనాలలో కుందేలు స్ప్లెనోసైట్లు ముఖ్యమైనవి. కుందేలు స్ప్లెనోసైట్లు మౌస్ స్ప్లెనోసైట్లు లేదా ఎలుక స్ప్లెనోసైట్ల నుండి భిన్నంగా ఉండే వివరాలను బహిర్గతం చేయడంలో సహాయపడతాయి.

-మౌస్ ప్లీహము:మౌస్ స్ప్లెనోసైట్లు రోగనిరోధక శాస్త్రంలో ఎక్కువగా అధ్యయనం చేయబడిన స్ప్లెనోసైట్లు (SPL లు). ఎలుకల నుండి ఐసోలేషన్ స్ప్లెనోసైట్ల కోసం ప్రోటోకాల్‌లు బాగా స్థాపించబడ్డాయి మరియు మౌస్ స్ప్లెనోసైట్లు మరియు ఎలుకల స్ప్లెనోసైట్లు రెండూ ఫ్లో సైటోమెట్రీ, ఎలిస్పాట్ మరియు ఇతర ఫంక్షనల్ అస్సేస్ కోసం ఉపయోగించబడతాయి.

-ఎలుక స్ప్లెనోసైట్లు:ఎలుక స్ప్లెనోసైట్లు ఇమ్యునోటాక్సికాలజీ మరియు వ్యాక్సిన్ అధ్యయనాలకు పరిపూరకరమైన నమూనాను అందిస్తాయి. ఇంటర్‌స్పెసిస్ తేడాలను అర్థం చేసుకోవడానికి ఎలుక స్ప్లెనోసైట్లు తరచుగా మౌస్ స్ప్లెనోసైట్‌లతో పోల్చబడతాయి.

స్ప్లెనోసైట్స్ ఐసోలేషన్

స్ప్లెనోసైట్స్ ఐసోలేషన్ఫ్లో సైటోమెట్రీ, సైటోకిన్ ఉత్పత్తి పరీక్షలు లేదా మిశ్రమ లింఫోసైట్ ప్రతిచర్యలు వంటి వివిధ పరిశోధన అనువర్తనాలలో ప్లీహము నుండి రోగనిరోధక కణాలను తీసే ప్రక్రియ.

ప్లీహాన్ని అసెప్టిక్ పరిస్థితులలో తొలగించారు, ఐసోలేషన్ ద్రావణంలో గ్రౌండ్ మరియు RPMI 1640 మాధ్యమం కలిగిన శుభ్రమైన గొట్టానికి బదిలీ చేయబడింది. సెంట్రిఫ్యూగేషన్ తర్వాత ల్యూకోసైట్ పొరను జాగ్రత్తగా సేకరించారు. కణాలు RPMI 1640 మాధ్యమంతో కడిగి, సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడ్డాయి మరియు సూపర్నాటెంట్ విస్మరించబడ్డాయి. వివిక్త కణాలు తదుపరి ప్రయోగాల కోసం ఉపయోగించబడటానికి ముందు ఈ వాషింగ్ దశ 1 - 2 సార్లు పునరావృతమైంది.

గడ్డకట్టే స్ప్లెనోసైట్లు

గడ్డకట్టే స్ప్లెనోసైట్లుభవిష్యత్ ఉపయోగం కోసం కణాలను సంరక్షించడానికి కీలకమైన దశ. క్రియోప్రెజర్వేషన్ పరిశోధకులకు వారి సాధ్యత లేదా కార్యాచరణను రాజీ పడకుండా స్ప్లెనోసైట్లను ఎక్కువ కాలం నిల్వ చేయడానికి అనుమతిస్తుంది.

ఐసోలేషన్ స్టెప్ నుండి బావి సెంట్రిఫ్యూజ్డ్ సెల్ సస్పెన్షన్ యొక్క సూపర్నాటెంట్ విస్మరించబడుతుంది మరియు కణ ఏకాగ్రత గడ్డకట్టే మాధ్యమంలో కరిగించబడుతుంది. ప్రతి గడ్డకట్టే గొట్టానికి ఆల్కాట్ వేసి గడ్డకట్టే కంటైనర్‌కు బదిలీ చేయండి, కణాలు సస్పెన్షన్‌లో ఉండేలా చూస్తాయి. - 80 ° C ఫ్రీజర్‌లో గడ్డకట్టే కంటైనర్లను త్వరగా స్తంభింపజేయండి. - 150 ° C ఫ్రీజర్ కంటైనర్ (లేదా ద్రవ నత్రజని ట్యాంక్) కు బదిలీ చేయండి - టర్మ్ స్టోరేజ్.

కరిగించే స్ప్లెనోసైట్లు

కరిగించే స్ప్లెనోసైట్లుక్రియోప్రెజర్వేషన్ తర్వాత అధిక సెల్ సాధ్యత మరియు కార్యాచరణను నిర్ధారించడానికి జాగ్రత్తగా చేయాలి. DMSO మరియు ICE క్రిస్టల్ నిర్మాణం యొక్క హానికరమైన ప్రభావాలను తగ్గించడానికి కరిగించే ప్రక్రియ సాధారణంగా వేగంగా ఉంటుంది.

క్రియోట్యూబ్‌లు 37 ° C నీటి స్నానానికి బదిలీ చేయబడతాయి మరియు చక్కటి మంచు స్ఫటికాలు మాత్రమే గొట్టాలలో ఉండే వరకు కరిగించబడతాయి. ఘనీభవించిన గొట్టానికి 0.5 - 1 ఎంఎల్ సెల్ కల్చర్ మాధ్యమాన్ని జోడించి, సస్పెన్షన్‌ను సెల్ కల్చర్ మాధ్యమంతో నిండిన 15 ఎంఎల్ ట్యూబ్‌కు సస్పెన్షన్‌ను బదిలీ చేయండి. సెంట్రిఫ్యూజ్, సూపర్నాటెంట్ తీసివేసి, సెల్ అమరికను విప్పుటకు గొట్టాన్ని నొక్కండి. సెల్ కల్చర్ మాధ్యమం యొక్క 1 ఎంఎల్ వేసి, పైపెట్‌తో బ్లో మరియు రీసస్పెండ్, 15 ఎంఎల్ వాల్యూమ్‌కు మాధ్యమాన్ని జోడించండి. సెంట్రిఫ్యూజ్, డి - సూపర్నాటైజ్, సెల్ కల్చర్ మాధ్యమాన్ని 1 ఎంఎల్ జోడించండి, సెల్ గా ration త ప్రకారం మాధ్యమాన్ని జోడించండి. కణాలను CO2 ఇంక్యుబేటర్‌లో ఉంచండి మరియు మూతలో కొంచెం గ్యాప్‌తో 1H కు ఇంక్యుబేట్ చేయండి. పొదిగే చివరిలో, సమగ్ర సెల్ శిధిలాలను అవక్షేపించడానికి అనుమతించడానికి 1 నిమిషాలకు తిరిగి వెళ్లండి. అవపాతం లేకుండా సెల్ సస్పెన్షన్ కొత్త 15 ఎంఎల్ ట్యూబ్‌కు జాగ్రత్తగా బదిలీ చేయబడింది. కణ కార్యకలాపాలను నిర్ణయించడానికి కణాలు లెక్కించబడ్డాయి.

ముగింపు

స్ప్లెనోసైట్లు, వాటి విభిన్న కూర్పు మరియు రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలలో కీలకమైన పాత్రతో, రోగనిరోధక పరిశోధనలో అమూల్యమైన సాధనాలు. ఎలుకలు, ప్రైమేట్స్ లేదా కుందేళ్ళు మరియు కుక్కల వంటి ఇతర జాతుల నుండి ఉద్భవించినా, స్ప్లెనోసైట్లు రోగనిరోధక పనితీరు, వ్యాధి విధానాలు, టీకా అభివృద్ధి మరియు క్యాన్సర్ ఇమ్యునోథెరపీలో క్లిష్టమైన అధ్యయనాలను సులభతరం చేస్తాయి. ఐసోలేషన్, గడ్డకట్టడం మరియు కరిగించడం యొక్క ప్రక్రియలు వాటి సమగ్రతను మరియు సాధ్యతను కాపాడటానికి అవసరం, పరిశోధకులు వివిధ మోడళ్లలో సెల్యులార్ డైనమిక్స్‌ను అన్వేషించడానికి వీలు కల్పిస్తుంది. ఇమ్యునాలజీపై మన అవగాహన పెరిగేకొద్దీ, స్ప్లెనోసైట్ల వాడకం ప్రిలినికల్ అధ్యయనాలు మరియు క్లినికల్ అనువర్తనాల మధ్య అంతరాన్ని తగ్గించడంలో కీలక పాత్ర పోషిస్తుంది, మానవ మరియు పశువైద్య .షధం రెండింటిలోనూ పురోగతిని నిర్ధారిస్తుంది.