Hepatocytes ибтидоӣ: Воситаи муҳим барои пешрафтҳои ғайридавлатӣ

Hepatocytes ибтидоӣ: Воситаи муҳим барои пешрафтҳои ғайридавлатӣ

Ҷод, ҳамчун узви ибтидоӣ барои хӯрдани маводи мухаддир, дар равандҳои маводи мухаддир ва токсикии онҳо нақши муҳим дорад. Гепатикҳои ибтидоӣ дорои спектри пурраи мобилӣ ва сатҳи физиологии ферментҳо ва кофонтҳо мебошанд, аз ҷумла мембрантҳо дар ретсиклумҳои ҳамвор) ва перколҳои спографӣ, ки дар ҷигар ҷой доранд, фаро мегирад. Аз ин сабаб, гепатикҳои ибтидоӣ ба таври васеъ ҳамчун стандарти тиллоии сохтани моделҳои ҷигар арзёбӣ шудаанд ва таҳқиқотчиёни ҳамкориҳои маводи мухаддир ва таҳқиқоти заҳролуд мебошанд. Моддаи мазкур аз рӯи моделҳои фарҳангӣ 2D ва 3D шарҳи моделҳои ибтидоӣ ва дархостҳои онҳо дар рушди маводи мухаддир оварда шудааст.

Калидвожаҳо: Гапатокитҳо, парвариши 2D, конгроидҳо, оргенедҳо, До-Фарҳанг.

1. 1. Ҷудо кардани гепатиктҳои ибтидоӣ

Ҷудокунии гепатиктҳои ибтидоӣ як қадами муҳим дар ташаккули моделҳои ҷигар мебошад, бо ин ду - қадами коллагенус коллагенус пур аз усули парастории комилтарин мебошад. Дар ҳайвонот хурдтар, метавонад тавассути лиҳол ё қисмҳои ҷигар, ки ҳайвоноти калонтар аз сар гузаронида шаванд, иҷро карда мешавад. Якчанд омилҳои асосӣ ба изолятсияи бомуваффақияти гепатикҳо таъсир мерасонанд: аввал, коллагеназ бояд ғайри - Cytotoxic бошад. Дуюм, вақти ҳозима муҳим астҲарду дар ҳоли ин - Ҳиссаҷо ва беш аз ин - ҳозима метавонад ҳосилнокии гепатикит ва қобилияти бадастомадаро зиёд кунад. Сеюм, ҳолати ҷигар бояд оптималӣ бошад, зеро гепатиктҳо ба зарари ишчия ҳассос мебошанд. Ҷод кардани ҷигар барои омодагӣ ба гепатиокит бояд то сатҳи метаболикӣ зуд сард шавад, то сатҳи метаболикӣ ва монеъ шудан гипаболикси метаболикӣ ва IsChandia.

Стандартҳои гепатиктҳои ибтидоӣ дар таҳқиқоти маводи мухаддир истифода мешаванд:

1. 2. Фарҳанги 2-и ибтидоии Hepatocityte

Модели таваққуфи гепатикит

Он дар бар мегирад Бо вуҷуди ин, қобилияти боздоштани гепатикҳои таваққуф ва фаъолияти маводи мухаддир тадриҷан пастравӣ паст мешаванд, ҳамчун вақти инкишофи витроэнергетикӣ, ки вақти исобро ба ҳадди аксар 4 соат маҳдуд мекунад. Ин модел одатан барои таъмини тозакунии маводи мухаддир бо суръати миёнравӣ ва баланд истифода мешавад. Вақте ки сатҳи тозакунӣ аз 20% камтар аст, арзишҳои дақиқи поксозӣ муайян карда намешаванд. Интиқоли анъанавии таваққуфи гепатикизми витроҷкушо барои тавлиди аксуламали мубодилаи моддаҳои мубодилаи моддаҳо барои эҷоди ширкатҳои метаболизатсия нокифоя аст, ки қобилияти пешгӯии сатҳи поксозӣ ва маҳсулоти мубодилаи моддаҳои ин пайвастагонро маҳдуд мекунанд. Усули Расади Гепатокитси (расми 1) метавонад барои дароз кардани вақти исоб ба 20 соат ё ҳатто дарозтар истифода шавад.

Ариза:Фаъолияти ферментҳо ва таҳқиқоти устувори метаболикӣ барои доруҳои молекулаи хурд.

Тасвири 1

Манбаъ: Филиали маводи мухаддир fips, 2012.40 (9): 1860-1865

Модели hepatocytes

Гепатикҳои ибтидоӣ дар системаи 2D фарҳангӣ доранд, ки дар коллеген - зарраҳои фарҳангҳои резиденталӣ фарҳанг шудаанд. Гепатикҳо як морфилологияи эпителияро, ки ядригенсипардорро ба вуҷуд меоранд, аксар вақт дар шакли бинкасфашуда пешниҳод мекунанд. Далелҳои фарҳанги ягонаи Monolyer Monolyer инҳоро дар бар мегиранд: 1. Тағйир додани полярати ҳуҷайра ва функсияи.2. Набудани дигар намудҳои дигари ҳуҷайра (I.E., ғайр аз ҳуҷайраҳои паренсолӣ), ки барои функсияи муқаррарӣ талаб карда мешаванд.3. Қобилияти таъмини омилҳои кофии ғизоӣ ва парвариш барои дастгирии шахсе, ки вазифаҳои гепатикҳо ҳангоми иҷрои вазифаҳои худ (ба монанди BISENYNYNINTERSSSISSISSISSIASSESSESSESSESSESSICESS мебошанд.

Барномаҳо:

1). Арзёбии муомилоти маводи мухаддир:Ин дар бар мегирад: Аввалан, вақте ки маводи мухаддир ҳамчун ғаввосӣ амал мекунад, он метавонад боиси афзоиши изҳори маводи мухаддир оварда расонад - мубодилаи ферментҳо ва нақлиёт. Наҷотдиҳандаҳои қавӣ метавонанд гендаҳои чандинаро ба монанди нишондиҳандаи PyP2B6, ба монанди нишондиҳандаи Pyp2B6, CYY2A4, Cyp3a4, Cyp2c9, UGT ба монанди MRP2. Дуюм, намудҳо мавҷуданд. Масалан, Рифччикин як мафҳуми муассир барои гепатиокитҳои инсон ва харгӯш аст, аммо на ба калати гепатикҳои калатуро надорад. Дар ниҳоят, зичии зеризаминии гепатикҳои қитъаи пешбинишуда метавонад ба паст шудани ифодаи базавии P450s ва аксуламали сунъии интерактивӣ оварда расонад. Чӣ тавре ки дар расми 3, гепатикҳо дар доираи зичии поёнӣ нишон дода шудааст, ки фаъолияти пурраи CYP1A2, Cyp2B6 ва Cyp3a4-ро нишон медиҳанд, аммо аксуламали мустаҳками индуктӣ. Аз ин рӯ, гепатикҳои солим дар зичии даъвати мувофиқ барои гирифтани маълумоти физиологӣ заруранд.

Тасвири 2

Манбаъ: Технологияҳои ҳозира ёфтани маводи мухаддир, 2010, 7: 188 - 198

2). Арзёбии гепатикоксикӣ: Нашрияи тағиротҳои морфологӣ дар зери махлуқи сабук, аз қабили морфология, вакусуз ва ҷамъоварии дӯкони дўшоза ва барҳам додани дўша ва замимаи ҳуҷайра / in in in in in inction. Муайян кардани некрозии гепатикии гепфокитӣ (тавре ки аз ҷониби Ҷпафтсияи Арамттария Aminotrrogenase нишон дода шудааст, деггрогеназаи ширмаки ва Alantine Aminotransferene) ва апоптозҳо (тақсимоти ДНК). Барои Cytokine - Ветотоксикии миёнаравӣ, фарҳангҳои мукаммалии Monoloceer бо назардошти моддаҳои аз ғайримуқаррарӣ озод карда мешаванд.

3). "Усули умед" барои омӯзиши тозакунии мураккабии метабелии суст ва мубодилаи синдолитҳои он: Фаъолияти маводи мухаддир - мубодилаи фермисикаҳои мубодилаи асъоршаванда пас аз 24 соати табақ кай коҳиш меёбад. Пас аз он, ки гепатикҳои қафоро бо хунобае, ки аз доираи таваҷҷӯҳе барои 24 соат истифода мебаранд, миёна ҷамъоварӣ ва омехта карда мешавад, пас ба гепатикитҳои нав интиқол дода мешаванд (Расми 3).

Дар тасвири 3

Манбаъ: Мактубҳои мубодилаи маводи мухаддир, 2016, 10: 3 - 15 - 15 - 15 - 15 - 15 - 15 -

3). Элементҳои мобилӣ, эндоцитситоз, фирори эндосомалӣ ва эффектҳои серу сано ба гени ҳадафи Ҳалатокит, доруи кислотаи хурд нигаронида шудаанд.

Модели парвариши сандвич

Дар VINRO, Hepatocytes метавонад дар байни ду қабати коллаген ё матрител ба таҷдиди сохторҳои Vivo фарҳангӣ кунад, ки бо парвариши сандвич маъруф аст. Гепатокитетҳо дар ду қабати Gel - Cockaragen (сохтори Sandwich) метавонанд морфология ва ҳомияти чашмакҳоро беҳтар кунанд ва функсияҳои худро дар давраи дарозтар нигоҳ доранд. Ғайр аз он, гепатикитҳо дар фарҳанги сэндвич метавонанд поляризатсияро барқарор кунанд, ки ба маҳаллисозии техникии мустақил ва ҳамоҳангсоз, инчунин ташаккули шабакаҳои вазифаи нисолаи функсионалӣ (расми 4).

Тасвири 4

Манбаъ: Технологияҳои ҳозира ёфтани маводи мухаддир, 2010, 7, 78 - 198

Барномаҳо:

1. 1). Эчод кардани ихроҷи беасосии пайвастагиҳо.
2. 2). Арзёбии тақсимоти HEPCACT ва BIRION аз пайвастагиҳои эндогенӣ ва эпогенизатсия ва метаболеҳ.
3. 3). Барасмиятдарории ҳисобкунӣ, ки аз ҷониби мубодилаи моддаҳо ва ҳамлу нақли физиология сохта шудааст - модели фармакиносӣ.
4. 4). Омӯзиши гепатиксикӣ ва фароҳам овардани механизмҳои маводи мухаддир клиникӣ - ҷароҳати ҷигарро ба вуҷуд овард. Маълумот ба моделҳои фармакогологӣ ворид карда мешавад, то пешгӯии нашри маводи мухаддирро пешгӯӣ кунад - дарди ҷигар дар одамон.
5.  
   1. 3. Фарҳанги 3D ибтидоии Hepatocityte

6. Дар системаҳои фарҳанги 3D, гепатикеттҳо дар се - Матритсаи андоза фарҳангӣ доранд, ки дар муқоиса бо фарҳангҳои дуввум меъёри ҷигари vivo меъмории ҷигарро беҳтар мекунанд. Ин системаҳо ба ҳуҷайра - ҳуҷайра ва ҳуҷайра - Матритс - Матритсҳо, ки метавонанд шумораи функсияҳои физиологии ҷигарро барқарор кунанд, аз ҷумла мубодилаи маводи мухаддир, Пропритозии протеикӣ ва ташаккули гил. Фарҳангҳои 3-юми ибтидоӣ метавонанд барои омӯзиши ҷигар истифода шаванд.

   Модели Сфероид

Тавассути усулҳо, ба монанди Ultra - фарҳанги ками замимашуда, фарҳанги афтиданӣ ва фарҳанги магникӣ метавонад ба агрегатҳои Spheroidal расонида шавад (Расми 5) бо диаметри то 150 - 175 мктр бидуни такрорӣ ба матриторҳои берунӣ. Як бартарии фарҳанги SPHERID ин аст, ки ҳар сатрҳо танҳо 1,330 - 2,000 ҳуҷайраҳоро талаб мекунад, шумораи ҳуҷайраҳоро дар муқоиса бо дигар усулҳои фарҳанг ба таври назаррас коҳиш медиҳад. Таҳқиқоти охирин нишон доданд, ки фарҳангҳои сфериди ибтидоии гpatoide метавонанд бо фаъолияти протерейметҳо дар муқоиса бо ҷарроҳии Сандвич қарор гирифтанд. Аммо, ҷигар аз як агрегати ҳуҷайра мураккабтар аст. Ҷониби дуроии гепатикттҳо бо хун робита дорад, дар ҳоле ки исбот аз ҷониби апойорҳо мегузарад, ки хусусияти калидии сохтори мураккаб аст, ва ин наметавонад дар модели SPHEROID бошад.

Барномаҳо:

1. 1). Омӯзиши тозакунии мураккабии метабелии суст ва мубодилаи модетҳои он.
2. 2). Тадқиқоти гепатитоксикӣ.
3. 3). Арзёбии ҳуҷайраи мобилӣ, эндоцитситоз, фирори эндосомалӣ ва эффектҳои серодам ба истеъмоли генҳои мақсадноки гепатикет - доруҳои кислотаи хурд.

Тасвири 5. Усули фарҳанги Сфероид

Модели органоидҳои ҷигар

Мафҳуми консенсиҳои органоидҳо: сохторҳои 3D аз ҳуҷайраҳои пахтачинҳо, ҳуҷайраҳои гуногуни бофтаи ProgenON ё ҳуҷайраҳои гуногуни бофандагии Вило, ки ба таври муассир микрокунандаҳои ВИво ва ҳуҷайраҳо - ба - Ҳамкории ҳуҷайра дода мешаванд. Ташаккронии ҷигар ҳамчун модели пешрафта барои таҳқиқоти биологияи инсон муайян карда шудааст.

Манбаъҳои ҳуҷайра барои сохтмони ҷигар

① ҳуҷайраҳои плипаҳои plipotent (PSCS):

Ҳуҷайраҳои бунёди ҷоян (ESCS) ва ҳуҷайраҳои пӯлодҳои plipotent (ipccs) pluriptication баланд, пластикии баланд ва қобилияти номаҳдили номаҳдуд доранд. Зери таъсири омилҳои мушаххаси сигналҳо, онҳо ба Гепатокит, ба мисли ҳуҷайраҳо бо фаъолият ва функсия фарқ мекунанд. Аммо, оргеноидҳои ҷигаре, ки аз PSC гирифта шудаанд, метавонанд тағироти эпигенетикӣ ва генетикӣ гузаранд, ки дар вақти амбизатсия тағиротҳои профлолографии хромосомияро нишон медиҳанд.

Барномаҳо:

1. 1). Моделҳои бемории ҷигар
2. 2). Моделҳои бемориҳои сироятӣ
3. 3). Санҷиши Цистотоксикии маводи мухаддир

② бофтаҳои ҷигар - ҳуҷайраҳои бадастомада: Инҳо Чолангӣ ва гепатиоцитҳоро дохил мекунанд. Гепатикҳои баркамол потенсиали потенсиали потенсиали потенсиал ва аҳамияти prosolerative -ро дар муҳити мушаххас нигоҳ медоранд. Дар муқоиса бо PSC - Agenidoidsedsed, оргеноидҳо, оргеноидҳо, ки аз бофтаҳои ибтидоӣ гирифта шудаанд, бештар ба камолот бештаранд ва субъектҳои пиёз ва генетикиро дар тӯли дароз доранд - мӯҳлате дар Мӯҳлати фарҳанги vitro. Бо вуҷуди ин, тӯлонӣ - Истеҳсолоти шарҳи тарғиботи баркамол оргоқатҳои инсон, ки оргеноидҳои гепатикоидҳои гепатикоидҳои гепатикоидҳои инсониро дар муқоиса бо гепатиоцитҳои одамии одамӣ ё гепатикҳои ибтидоии муши худ маҳдуд мекунанд. Таъсис додани органоидҳои гепатикии Гепатокитҳо мушкил боқӣ мемонад.

Усули фарҳангӣ (Тасвири 6): бофтаҳои ҷигар ба ҳуҷайраҳои ягона ҳазм карда мешаванд ва омехтаи матригел ва ҳуҷайраҳо дар як 24 - Орзуи хуб барои ташаккули гунбази - сохторҳои шаклдор. Дар фарҳанги фарҳанги ҳуҷайравӣ (37 ° C) барои 15 дақиқа. Пас аз мустаҳкам шудан, илова маводи махсуси фарҳангӣ. Баъд аз тақрибан 14 рӯз. Дар паси 7 - 10 рӯз воситаи аслиро бо фарқияти фарқкунанда иваз кунед.

Барномаҳо:

1. 1). Моделҳои гепатикоксикӣ
2. 2). Атро метаболизмро таҳқиқ мекунад
3. 3). Neb - бемории спиртӣ
4. 4). Рушди маводи мухаддир барои бемориҳои феълӣ ва вайронкунанда

Тасвири 6. Раванди фарҳанг ва гузариши матоъ - оргенедҳои ҷигар

Манбаъ: Кӯшиш & Bossosity (2023) 13: 197

Муқоисаи фарҳанги Spereroid ва фарҳанги оргеноид

4. Намунаи фарҳанги ибтидоии Hepatocityte

1. 1. 2D ибтидоии Hepatocityte Co - модели фарҳангӣ
      

      Модели фарҳангии аввалини Hepatocyte Hepatocyte, ду ё зиёда навъи гуногуни ҳуҷайра дар муҳити дугона омехта ва фарҳангӣ карда мешавад. Хусусияти калидии ин модел доимоамалкунии мустақим байни намудҳои гуногуни ҳуҷайра мебошад, ҳамкорӣ байни ҳуҷайраҳо ва матритсаи беруна ё интиқоли сигнали ғайримуқаррарӣ тавассути цитакинҳо ва алоқаҳои химиявӣ мебошад. Вазифаҳои ибтидоии HEPACOCTY, ба монанди қобилияти истеҳсолоти алоҳидавӣ ва пардохтҳои маводи мухаддир, ки метавонанд барои се ҳафта нигоҳ дошта шаванд.

      Барномаҳо:

      1. 1). Саҳифаи ибтидоӣ бо фибронаплҳо: Ин модел барои омӯзиши сатҳи тозакунии суст - мубодилаи пайвастагиҳои мубодила ва метаболитҳои онҳо истифода мешавад.
      2. 2). Саҳифаи аслӣ, ки бо ғайримуқаррарӣ парвариш карда шудааст, ячейкаи ҷигар, ҳуҷайраҳои тобеи зинанои зодгоҳӣ (DELELITILE): Ин модел барои таҳқиқоти маводи мухаддир муфид аст (DIVI), зеро ки он барои таҳқиқи нақши цимйҳо ва омилҳои афзоиш пас аз дучор шудан ба вокунишҳои марбутӣ муфид аст.
      3. 3). Саҳифаи ибтидоӣ Коуре, ки бо чашмакҳои TW: Ин модел барои ошкор кардани метаболизмҳои ҷигар маводи мухаддир - Ҷавобҳои мушаххаси ҳуҷайраҳо истифода мешавад.
      4. 4). Heptaste Gepatomax ™Системаи фарҳангӣ: iPhase як системаи фарҳанги муштаракро бо гепатикитҳои ибтидоӣ аз намудҳои гуногун таҳия кардааст•. Аз ҷониби CH - Гепатокитҳои асосии фаҳкии инсон бо ҳуҷайраҳои сахмашавӣ бо ҳуҷайраҳои сунъӣ бояд маводи мухаддирро нигоҳ доштан мумкин аст - мубодилаи фаъолиятҳои ферментӣ дар гепатипикҳои инсон то 3 ҳафта. Ин система барои омӯзиши сустӣ мувофиқ аст - мубодилаи сатҳҳои тозакунӣ ва мубодилаи мубодилаи онҳо.

      Ин модели фарҳангӣ як платформи дахлдори дахлдори эксаболизатсияи маводи мухаддирро барои арзёбии маводи мухаддир, ва ҷигарро - Равандҳои бемории марбут ба он, ки дар бораи чӣ навъҳои гуногуни ҳуҷайра ба функсия ва беморӣ мусоидат мекунанд, таъмин мекунад.
      
      

      3D ибтидоии Hepatocityte Co - модели фарҳангӣ

      Расмҳои мустақим 3D - фарҳанг: Ин модел омезиши ду ё зиёда намудҳои гуногуни ячейкаи ҷигарро дар бар мегирад (масалан, гепатикокс, чашмакҳои нафасгирифташуда, ҳуҷайраҳои зинои Steasodfer Фарҳанг 3D CO - фароҳам меорад, ки алоқаи зич байни ҳуҷайраҳои мухталиф тавассути механизмҳо ба монанди ҳуҷайраҳо - ба MADELINAL, ки алоқаи дастӣ ва матритсаи беруна ва матритсаи беруна мебошад, алоқаи муштариён байни гепатиоцитҳо.

      Барномаҳо:

      1. 1). Модели фиброзҳои ҷигар: Барои омӯзиши механизмҳо ва пешрафти фиброз ҷигар истифода мешавад.
      2. 2). Маводи мухаддир - Модели ҷароҳати ҷигар (DIVI): Ба тасвиб ва арзёбии зарари ҷигар тавассути маводи мухаддир кӯмак мерасонад.
      3. 3). Ҷавобдиҳии маводи мухаддир, мубодилаи маводи мухаддир ва фермент. Баҳодиҳӣ медиҳад, ки чӣ гуна маводи мухаддир фарқ мекунад, ки чӣ гуна табобат карда мешавад ва чӣ гуна онҳо ферментҳои ҷигарро мекунанд.

      Интиқоли 3D CO - фарҳанг: Ин усул як системаи ҷудии ҷисмонии (масалан, кӯчонидани масрафи ду ё дигар маводҳо) ба фарҳанги ду ё дигар намудҳо (ба монанди гепатикҳои ибтидоӣ) дар муҳити мустақим, ки дар он ҳуҷайраҳои бевоситаи - ба - Алоқаи ҳуҷайра пешгирӣ карда мешавад. Иқтибос байни ҳуҷайраҳо тавассути цимкҳои ҳалшаванда рух медиҳад.

      Барномаҳо:
      Барои омӯзиши ғайридавлатӣ истифода мешавад -

      
      Хулоса, iPheas, ҳамчун пешво дар таҳқиқоти биологии Vitro, ҳалли ҳамаҷонибаи санҷиши маводи мухаддирро пешниҳод мекунад. Аз Ҷудошавӣ ва фарҳанги асалҳои ибтидоӣ аз намудҳои дастгирии намудҳои дастгирӣ ба монанди васоити ахбори омма, ки iPhise, iPhise барои кашфи маводи мухаддир барои кашфи маводи мухаддир бахшида шудааст, бахшида шудааст. Мо шарики боварибахш барои мизоҷон дар саноати фармасевтӣ, ки бояд буришро, ки дар бораи буришҳои CEVERDER барои NON - Тадқиқоти клиникӣ бошад.