Mga Splenocytes sa Immunological Research: Sa kabuuan ng mga species at paghihiwalay, pagyeyelo, mga hakbang na lasaw

Mga keyword:Splenocytes (SPLS); Cynomolgus monkey splenocytes; Rhesus Monkey Splenocytes; Mga dog splenocytes; Canine splenocytes; Rat splenocytes; Mouse splenocytes; Mice splenocytes; Kuneho splenocytes; Splenocytes paghihiwalay; Nagyeyelong mga splenocytes; Thawing splenocytes

Produkto ng iphase

Splenocytes (SPL)ay isang heterogenous na populasyon ng mga immune cells na nakahiwalay mula sa pali, isang mahalagang organ na kasangkot sa pag -filter ng dugo, pag -mount ng mga tugon ng immune, at pagpapanatili ng homeostasis. Kasama sa mga cell na ito ang mga lymphocytes (T cells, B cells), macrophage, dendritic cells, at natural killer (NK) cells, na ang lahat ay naglalaro ng mga kritikal na tungkulin sa adaptive at likas na kaligtasan sa sakit. Ang mga Splenocytes ay malawakang ginagamit sa preclinical at translational research upang pag -aralan ang immune function, pag -unlad ng bakuna, mga sakit na autoimmune, at immunotherapy ng kanser.

Ang papel at komposisyon ng mga splenocytes (SPL)

Sa loob ng pali, ang mga spleencytes ay naninirahan sa mga natatanging rehiyon: ang pulang pulp, na nagsasala ng dugo at nag -recycle ng mga lumang pulang selula ng dugo, at ang puting pulp, kung saan sinimulan ang mga tugon ng immune. Ang puting pulp ay isinaayos sa mga T cell zone at B cell follicle, pinadali ang mga pakikipag -ugnayan sa pagitan ng antigen - na nagtatanghal ng mga cell at lymphocytes. Ang natatanging arkitektura na ito ay gumagawa ng mga splenocytes (SPL) ng isang malakas na tool sa mga immunological assays tulad ng ELISPOT, daloy ng cytometry, at halo -halong mga reaksyon ng lymphocyte.

Mga species - Tukoy na Splenocytes (SPL)

-Cynomolgus Monkey Splenocytes:Ang Cynomolgus monkey splenocytes ay ginagamit sa preclinical na pananaliksik dahil mas malapit silang gayahin ang mga tugon ng immune ng tao, na ginagawang mainam ang mga cynomolgus monkey splenocytes para sa mga pag -aaral sa pagsasalin.

-Rhesus Monkey Splenocytes:Ang Rhesus monkey splenocytes ay katulad na pinahahalagahan para sa kanilang malapit na pagkakapareho ng immunologic sa mga tao. Ang mga pag -aaral gamit ang Rhesus Monkey Splenocytes ay tumutulong sa tulay ang agwat sa pagitan ng mga modelo ng hayop at mga klinikal na aplikasyon.

-Dog splenocytes / canine splenocytes:Sa pananaliksik sa beterinaryo, ang mga dog splenocytes (o canine splenocytes) ay ginagamit upang pag -aralan ang mga karamdaman sa immune sa mga canine at upang gumuhit ng mga paghahambing sa mga tugon ng immune ng tao.

-Rabbit splenocytes: Mahalaga ang mga rabbit splenocytes sa mga pag -aaral sa paggawa ng antibody at pag -unlad ng bakuna. Ang mga kuneho na splenocytes ay tumutulong na magbunyag ng mga detalye na maaaring naiiba sa mga mouse splenocytes o rat splenocytes.

-Mouse splenocytes / mice splenocytes:Ang mga mouse splenocytes ay isa sa mga madalas na pinag -aralan na mga splenocytes (SPL) sa immunology. Ang mga protocol para sa paghihiwalay ng mga splenocytes mula sa mga daga ay maayos na naitatag, at ang parehong mga mouse splenocytes at mga daga ng splenocytes ay ginagamit para sa daloy ng cytometry, elispot, at iba pang mga functional assays.

-Rat splenocytes:Nagbibigay ang Rat splenocytes ng isang pantulong na modelo para sa immunotoxicology at pag -aaral ng bakuna. Ang mga rat splenocytes ay madalas na inihambing sa mga mouse splenocytes upang maunawaan ang mga pagkakaiba sa interspecies.

Ang paghihiwalay ng Splenocytes

Ang paghihiwalay ng Splenocytesay ang proseso ng pagkuha ng mga immune cells mula sa pali na gagamitin sa iba't ibang mga aplikasyon ng pananaliksik, tulad ng daloy ng cytometry, cytokine production assays, o halo -halong mga reaksyon ng lymphocyte.

Ang pali ay tinanggal sa ilalim ng mga kondisyon ng aseptiko, ground sa paghihiwalay na solusyon at inilipat sa isang sterile tube na naglalaman ng RPMI 1640 medium. Ang layer ng leukocyte ay maingat na nakolekta pagkatapos ng sentripugasyon. Ang mga cell ay hugasan ng RPMI 1640 medium, sentripuged at ang supernatant na itinapon. Ang hakbang sa paghuhugas na ito ay paulit -ulit na 1 - 2 beses bago ginamit ang mga nakahiwalay na mga cell para sa karagdagang mga eksperimento.

Nagyeyelong splenocytes

Nagyeyelong splenocytesay isang mahalagang hakbang para sa pagpapanatili ng mga cell para magamit sa hinaharap. Pinapayagan ng Cryopreservation ang mga mananaliksik na mag -imbak ng mga splenocytes para sa mga pinalawig na panahon nang hindi ikompromiso ang kanilang kakayahang umangkop o pag -andar.

Ang supernatant ng mahusay na sentripuged cell suspension mula sa hakbang na paghihiwalay ay itinapon at ang konsentrasyon ng cell ay natunaw sa nagyeyelong daluyan. Magdagdag ng isang aliquot sa bawat nagyeyelo na tubo at ilipat sa isang nagyeyelong lalagyan, tinitiyak na ang mga cell ay mananatiling suspensyon. Mabilis na i -freeze ang mga nagyeyelo na lalagyan sa isang - 80 ° C freezer. Lumipat sa - 150 ° C freezer container (o likidong nitrogen tank) para sa mahabang - term storage.

Thawing splenocytes

Thawing splenocytesdapat gawin nang maingat upang matiyak ang mataas na kakayahang kumita ng cell at pag -andar pagkatapos ng cryopreservation. Ang proseso ng pag -thawing ay karaniwang mabilis upang mabawasan ang mga nakakapinsalang epekto ng DMSO at pagbuo ng kristal ng yelo.

Ang mga cryotubes ay inilipat sa isang 37 ° C na paliguan ng tubig at natunaw hanggang sa mga pinong kristal na yelo ay nanatili sa mga tubo. Magdagdag ng 0.5 - 1ml ng cell culture medium sa frozen tube, resuspend at ilipat ang suspensyon sa isang 15ml tube na puno ng cell culture medium. Centrifuge, alisin ang supernatant at i -tap ang tubo upang paluwagin ang pag -aayos ng cell. Magdagdag ng 1ml ng cell culture medium, suntok at resuspend na may isang pipette, magdagdag ng daluyan sa isang dami ng 15 ml. Centrifuge, de - supernatize, magdagdag ng 1ml ng cell culture medium, pagdaragdag ng daluyan ayon sa inaasahang konsentrasyon ng cell. Ilagay ang mga cell sa isang CO2 incubator at incubate para sa 1H na may isang bahagyang agwat sa takip. Sa pagtatapos ng pagpapapisa ng itlog, mag -resuspend at umalis para sa 1min upang payagan ang pinagsama -samang mga labi ng cell. Ang suspensyon ng cell nang walang pag -ulan ay maingat na inilipat sa isang bagong 15ml tube. Ang mga cell ay binibilang upang matukoy ang aktibidad ng cell.

Konklusyon

Ang mga Splenocytes, kasama ang kanilang magkakaibang komposisyon at mahalagang papel sa mga tugon ng immune, ay napakahalaga na mga tool sa immunological na pananaliksik. Kung nagmula sa mga rodents, primates, o iba pang mga species tulad ng mga rabbits at aso, ang mga splenocytes ay nagpapadali ng mga kritikal na pag -aaral sa immune function, mga mekanismo ng sakit, pag -unlad ng bakuna, at immunotherapy ng kanser. Ang mga proseso ng paghihiwalay, pagyeyelo, at pag -thawing ay mahalaga para sa pagpapanatili ng kanilang integridad at kakayahang umangkop, na nagpapagana sa mga mananaliksik na galugarin ang mga cellular dynamics sa iba't ibang mga modelo. Habang lumalalim ang aming pag -unawa sa immunology, ang paggamit ng mga splenocytes ay magpapatuloy na maging instrumento sa pag -bridging ng agwat sa pagitan ng mga preclinical na pag -aaral at mga klinikal na aplikasyon, tinitiyak ang mga pagsulong sa parehong gamot sa tao at beterinaryo.