GirişKaraciğer mikrozomlarıve S9 fraksiyonları
İlaç metabolizması ve farmakokinetik alanında, karaciğer mikrozomlarının ve S9 fraksiyonlarının karmaşıklıklarını anlamak çok önemlidir. Bu in vitro sistemler, ilaç keşfinin ilk aşamalarında etkilidir ve yeni kimyasal varlıkların (NCES) karaciğer tarafından nasıl metabolize edildiğine dair bilgiler sağlar. Metabolik stabiliteyi ve potansiyel ilaç etkileşimlerini tahmin etme yeteneği paha biçilmezdir, yeni ilaçların geliştirilmesinde zaman ve kaynaklardan tasarruf sağlar. Bu makale, kompozisyonlarını, işlevselliklerini, avantajlarını ve sınırlamalarını araştırarak karaciğer mikrozomları ve S9 fraksiyonları arasındaki farkları araştırıyor.Karaciğer mikrozomlarının bileşimi ve yapısı
● Endoplazmik retikulumun bir parçası olarak mikrozomlar
Karaciğer mikrozomları, ökaryotik hücrelerde endoplazmik retikulumdan türetilen vezikül - gibi artefaktlardır. Homojenleştirme işlemi sırasında hücreler parçalandığında oluşurlar, bu da endoplazmik retikulumun sedimantasyonu ile sonuçlanır. Bu hücre altı fraksiyonu, membrana bağlı enzimler ile zenginleştirilir ve ilaç metabolizması, özellikle faz I reaksiyonlarının incelenmesinde çok önemlidir.● Anahtar Enzimler Dahil: Sitokrom P450'ler ve UGT'ler
Karaciğer mikrozomlarındaki yüksek sitokrom P450 enzimlerinin (CYP'ler) yüksek konsantrasyonu tanımlayıcı özelliğidir. Bu enzimler, ilaçlar ve çevresel toksinler de dahil olmak üzere çok çeşitli ksenobiyotiklerin oksidatif metabolizmasında önemli bir rol oynar. Ayrıca, metabolitlerin konjugasyonuna ve daha sonra ortadan kaldırılmasına katkıda bulunan, faz I ve bazı faz II reaksiyonlarını anlamaya yönelik bir adım işaretleyen üridin difosfat - glukuronosiltransferazlar (UGT'ler) mevcuttur.S9 fraksiyonlarının bileşimi ve yapısı
● Mikrozomal ve sitosolik fraksiyonların bir kombinasyonu olarak S9
Genellikle 9000g süpernatan olarak adlandırılan S9 fraksiyonu, diferansiyel santrifüj yoluyla karaciğer homojenatlarından elde edilen bir altı hücre bileşenidir. Baslı olarak endoplazmik retikulum - bağlı enzimler içeren mikrozomların aksine, S9 fraksiyonu daha kapsamlı bir enzimatik profil sunan hem mikrozomal hem de sitosolik enzimleri içerir.● Faz I ve II dahil olmak üzere S9'da bulunan enzimler
S9 fraksiyonları, her iki faz I enzimlerini CYP'ler ve sülfotransferazlar, glukuronosiltransferazlar ve glutatyon gibi bir dizi Faz II enzimleri kapsayan daha zengin bir enzimatik ortam sağlar. Bu dizi, karaciğerin in vivo ortamını sadece mikrozomlardan daha doğru bir şekilde simüle ederek daha kapsamlı metabolik dönüşümlere izin verir.İşlevsellik: Faz I ve Faz II metabolizması
● Mikrozomlar ve S9 arasındaki enzim aktivitesindeki farklılıklar
Temel fark enzimatik kapsamda yatmaktadır. Karaciğer mikrozomları öncelikle oksidasyon, azalma ve hidroliz içeren faz I metabolik reaksiyonları destekler. Bu reaksiyonlar, Faz II reaksiyonlarının yolunu açarak ilaç molekülleri üzerine fonksiyonel grupları ekler veya ortaya çıkarır. Buna karşılık, S9 fraksiyonları her iki aşamayı I ve II'yi kapsar, böylece mikrozomların bağımsız olarak gerçekleştiremediği konjugasyon reaksiyonlarını kolaylaştırır.● Faz I ve II'nin ilaç metabolizmasında önemi
Faz I ve II reaksiyonlarının ardışık doğası, ilaç metabolizmasındaki önemlerinin altını çizmektedir. Faz I modifikasyonları genellikle bileşikleri, tipik olarak çözünürlüğü arttırmak için konjugasyonu içeren ve atılım sürecine yardımcı olan Faz II için hazırlar. Bu aşamaları anlamak, bir ilacın biyoyararlanımını, etkinliğini ve potansiyel toksisitesini tahmin etmek için hayati önem taşır.İlaç Metabolizması Çalışmalarında Uygulamalar
● ADME çalışmalarında kullanım: emilim, dağılım, metabolizma, eliminasyon
ADME çalışmalarında karaciğer mikrozomları ve S9 fraksiyonları, ilaç adaylarının emilimini, dağılımını, metabolizmasını ve ortadan kaldırılmasını değerlendiren çok önemlidir. Bu çalışmalar, dozlama, potansiyel etkileşimler ve yan etkiler bilgilendiren temel veriler sağlayarak ilaçların farmakokinetik profilinin belirlenmesinde kritik öneme sahiptir.● Karşılaştırmalı çalışmalar: ilaç keşfinde mikrozomlara karşı S9
Mikrozomlar ve S9 fraksiyonları arasındaki karşılaştırmalı analiz, her ikisi de kullanımları olsa da, S9 fraksiyonlarının faz II enzimlerinin dahil edilmesi nedeniyle metabolik stabilitenin daha bütünsel bir görünümünü sunduğunu ortaya koymaktadır. Bu kapsamlı analiz, tek başına karaciğer mikrozomlarını kullanırken belirgin olmayan metabolik yolların tanımlanmasına yardımcı olur.Karaciğer mikrozomlarının avantajları
● Maliyet - Etkinlik ve Kullanılabilirlik
Karaciğer mikrozomları maliyetleri için tercih edilir - etkinlik ve yaygın kullanılabilirlik. Hazırlık ve kullanım süreçleri iyi -● Yüksek verim ve otomasyon uyumluluğu
Mikrozom tahlillerinin sadeliği, büyük bileşik kütüphanelerinin hızla taranması için önemli bir özellik olan yüksek verim ve otomasyona uygun hale getirir. Bu avantaj, umut verici adayların erken tanımlanmasına izin vererek ilaç keşif boru hattının düzenlenmesinde çok önemlidir.Karaciğer S9 fraksiyonlarının avantajları
● Kapsamlı metabolik temsil
Hem faz I hem de II enzimleri ile S9 fraksiyonları, bir bileşiğin metabolik kaderinin daha eksiksiz bir değerlendirmesini sunar. Bu kapsamlı temsil, özellikle ilaç geliştirme sürecinin başlarında potansiyel metabolitlerin belirlenmesi için yararlıdır.● Faz II metabolizmanın ve maliyet hususlarının dahil edilmesi
Faz II enzimleri dahil, S9 fraksiyonlarının konjugasyon reaksiyonları hakkında bilgi verebileceği ve ilaçların vücutta nasıl işleneceğini tahmin edebileceği anlamına gelir. Belirli reaksiyonlar için ek kofaktörlere ihtiyaç duysa da, yine de yüksek verim ayarlarında uygun bir maliyet ve fayda dengesi sunarlar.Karaciğer mikrozomlarının sınırlamaları
● Tam metabolizma verilerini etkileyen sitosolik enzimlerin olmaması
Karaciğer mikrozomlarının önemli bir sınırlaması, tam metabolik bir resim için gerekli olan sitosolik enzim eksikliğidir. Bu yokluk, bazı metabolitlerin göz ardı edilebileceği ve ilaç güvenliğini ve etkinliğini anlamak için önemli olan kritik yolların eksik olabileceği anlamına gelir.● Faz II çalışması için ek sistemler gereksinimi
Faz II reaksiyonlarını kapsamlı bir şekilde incelemek için, mikrozomlar kullanılırken ek sistemler veya harici enzimler/kofaktörlerle takviye gereklidir. Bu gereksinim tahlil tasarımını ve yorumunu karmaşıklaştırabilir.Karaciğer S9 fraksiyonlarının sınırlamaları
● Co - faktörleri ve olası enzim seyreltme ihtiyacı
Kapsamlı doğalarına rağmen, S9 fraksiyonları genellikle belirli enzimatik aktiviteleri desteklemek için kofaktörlerin eklenmesini gerektirir. Bu ihtiyaç deneylere değişkenlik ve karmaşıklık getirebilir. Ek olarak, S9 fraksiyonlarındaki enzimlerin izole edilmiş preparatlara kıyasla seyreltilmesi, bazı metabolik reaksiyonlar için tespitin duyarlılığını etkileyebilir.● Mikrozomlara kıyasla depolama ve hazırlık zorlukları
S9 fraksiyonlarının hazırlanması ve depolanması, mikrozomlardan daha zor olabilir. Dikkatli kullanım ve depolama yoluyla enzimatik aktivitenin uygun şekilde bakımı, güvenilir sonuçlar elde etmek için çok önemlidir, bu da büyük ölçekli çalışmalarda kullanımlarını biraz karmaşık hale getirir.Sonuç ve öneriler
● En İyi Özeti - Her yöntem için senaryoları kullanın
Karaciğer mikrozomlarının ve S9 fraksiyonlarının her biri farklı güçlü ve zayıf yönlere sahiptir. Karaciğer mikrozomları en iyi maliyet - etkili, hızlı faz I metabolizma taraması gerektiğinde kullanılır. Buna karşılık, S9 fraksiyonları hem faz I hem de II metabolizması hakkında bilgi gerektiren kapsamlı çalışmalar için daha uygundur. Uygun sistemi seçmek, araştırmanın özel gereksinimlerine ve mevcut kaynaklara bağlıdır.● İlaç geliştirme süreçlerinde optimal kullanım için öneriler
Erken ilaç geliştirme aşamalarında olanlar için, saygın bir karaciğer mikrozomu tedarikçisinden veya karaciğer mikrozomlarından yüksek - kaliteli karaciğer mikrozomları kullanımı ilk taramaları kolaylaştırabilir. Araştırma ilerledikçeKaraciğer S9Muhtemelen güvenilir bir karaciğer mikrozomları fabrikasından kaynaklanan fraksiyonlar, sağlam ilaç adayı değerlendirmesi sağlayarak metabolik stabilitenin daha dolu bir resmini sağlayacaktır.● Girişİpaz
Merkezi North Galler, Pennsylvania'da bulunan Iphase Biosciences, yenilikçi biyolojik reaktiflerin araştırma, geliştirme, üretim, satış ve teknik hizmetlerini entegre eden "uzmanlaşmış, yeni ve yenilikçi" yüksek - teknoloji işletmesidir. Bilimsel araştırmalar için kapsamlı bilgi ve tutkudan yararlanan bilimsel ekibimiz, dünya çapında bilim adamlarına kaliteli yenilikçi biyolojik reaktifler sağlamaya ve araştırmacılarına araştırma hedeflerine ulaşmalarına yardımcı olmak için araştırmacılara yardımcı olmaya kararlıdır. "Yenilikçi Reaktifler, Geleceği Araştırma" ın Ar -Ge idealini takip eden Iphase, dünya çapında birden fazla Ar -Ge tesisi, satış merkezleri, depolar ve dağıtım ortakları kurdu.
Gönderme Zamanı: 2024 - 11 - 26 16:50:02