İnsan PBMC'leri ve bağışıklıktaki rolleri nelerdir?

İnsan PBMCS veya periferik kan mononükleer hücreleri, kan dolaşımınızda dolaşan kritik bir bağışıklık hücresi grubudur. Bu hücreler, her biri vücudunuzu savunmada benzersiz bir rol oynayan lenfositler, monositler ve dendritik hücreler içerir. PBMC'ler, bağışıklık dengesini korurken, bakteri ve virüsler gibi zararlı patojenleri tanımlayarak ve nötralize ederek sizi korur.

Araştırmalar, PBMC'lerin zamanla stabil kaldığını, çoğu örnekte% 85'in üzerinde hücre canlılığı olduğunu gösteriyor. Ek olarak, gen ekspresyonları hızlı bir şekilde adapte olabilir. Örneğin, TNFa ekspresyonu saatler içinde üç katın üzerinde artar. Bu tür çok yönlülük, bağışıklık tepkilerinin düzenlenmesinde önemlerini vurgular.

İnsan PBMC'lerinin bileşimi

Lenfositler: T hücreleri, B hücreleri ve NK hücreleri

Lenfositler insan PBMC'lerinin hayati bir bileşenidir. Bunlar, her biri bağışıklıkta belirgin rolleri olan T hücreleri, B hücreleri ve doğal katil (NK) hücreleri içerir. T hücreleri bağışıklık tepkilerini düzenlemeye yardımcı olur ve enfekte olmuş hücrelere doğrudan saldırır. B hücreleri, zararlı patojenleri nötralize eden antikorlar üretir. NK hücreleri ise virüsler veya kanserli hücrelerle enfekte olanlar gibi anormal hücreleri hedefler ve yok eder.

İlginç bir şekilde, CD3+ CD19+ hücreleri olarak tanımlanan insan PBMC'lerinde bazı lenfositler ikili işlevsellik sergiler. Bu hücreler hem T hücreleri hem de B hücreleri gibi davranabilir. T - hücre reseptörü (TCR) ve B - hücre reseptörü (BCR) sinyal yolları yoluyla tehditlere yanıt verirler. Bu ikili rol, hem humoral hem de hücresel bağışıklık tepkilerine katılmalarını sağlar. Örneğin, antijenleri geleneksel B hücrelerinden daha etkili bir şekilde bağlarlar ve T hücrelerine benzer seviyelerde interferon - gama (IFN - γ) üretirler.

Monositler ve bunların bağışıklık fonksiyonları

Monositler, insan PBMC'leri içindeki bir başka anahtar gruptur. Bu hücreler, enfeksiyon veya doku hasarı belirtileri arayarak kan dolaşımınızı devriye gezdirir. Bir problemi tespit ettikten sonra, etkilenen bölgeye göç ederler ve makrofajlara veya dendritik hücrelere dönüşürler. Makrofajlar patojenleri sarar ve sindirirken, dendritik hücreler diğer bağışıklık hücrelerine antijenler sunar.

Monositler ayrıca bağışıklık tepkisini koordine etmeye yardımcı olan molekülleri sinyal veren sitokinleri de serbest bırakır. Bunu yaparak, vücudunuzun enfeksiyonlara veya yaralanmalara etkili bir şekilde tepki vermesini sağlarlar.

Dendritik hücreler ve antijen sunumundaki rolleri

Dendritik hücreler, insan PBMC'leri içinde profesyonel antijen - sunan hücrelerdir (APC'ler). Yüzeylerinde antijenler sunarak T hücrelerinin aktive edilmesinde önemli bir rol oynarlar. Araştırmalar, dendritik hücrelerin hem CD4+ hem de CD8+ saf T hücrelerini aktive edebilen tek APC olduğunu göstermektedir. Verimlilikleri, MHC yüklemesi için peptitlerin mevcudiyetini arttıran antijen sindirimini yavaşlatma yeteneklerinden gelir.

Bu hücreler, bağışıklık sisteminizin tehditleri etkili bir şekilde tanımasını ve yanıtlamasını sağlar, bu da onları bağışıklıkta vazgeçilmez hale getirir.

İnsan PBMC'lerinin izolasyonu

PBMC kaynakları: periferik kan ve kemik iliği

İnsan PBMC'leri iki temel kaynaktan izole edilebilir: periferik kan ve kemik iliği. Periferik kan, erişilebilirliği ve minimal invazivliği nedeniyle en yaygın kaynaktır. Kemik iliği ise bağışıklık hücreleri için daha zengin bir ortam sağlar, ancak daha invaziv bir prosedür gerektirir.

PBMC'lerin verimi ve saflığı, kaynak ve izolasyon yöntemine bağlı olarak değişebilir. Örneğin, çalışmalar standart Ficoll yönteminin CPT (hücre hazırlama tüpü) yöntemlerine kıyasla daha yüksek bir verim ve saflık sağladığını göstermektedir. Aşağıdaki tablo şu farklılıkları vurgulamaktadır:

PBMC izolasyonu için ficoll bindirme tekniği

Ficoll bindirme tekniği, PBMC'leri izole etmek için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Bu işlem, kanın bir ficoll - paque çözeltisi üzerine yerleştirilmesini ve yoğunluğa göre ayrı hücrelere santrifüjlenmeyi içerir. PBMC'ler, plazma ve ficoll arasında farklı bir tabaka oluşturur, bu da onları toplamalarını kolaylaştırır.

Çalışmalar, tutarlı sonuçlar sağlamak için bu süreç sırasında uygun kullanımın önemini vurgulamaktadır. Örneğin, bir çalışma, Ficoll'un doğru şekilde kullanılmasının minimal değişkenlik ile% 97'ye varan bir saflık elde edebileceğini bulmuştur. Aşağıdaki tablo, PBMC izolasyonu için farklı inkübasyon yöntemlerini karşılaştırıyor:

İmmünomanyetik ayırma yöntemleri

İmmünomanyetik ayırma, PBMC'leri izole etmek için bir başka gelişmiş tekniktir. Bu yöntem, spesifik hücre tiplerini hedeflemek için antikorlarla kaplanmış manyetik boncuklar kullanır. Pozitif sıralama, hücreleri boncuklara bağlayarak izole eder, negatif sıralama istenmeyen hücreleri giderir ve istenen popülasyonu el değmemiş bırakır.

Araştırmalar, negatif sırlamanın hücre canlılığını koruduğunu ve IL - 2R (CD25) gibi aktivasyon belirteçlerini etkilemediğini göstermektedir. Buna karşılık, pozitif sıralama, özellikle stimülasyondan sonra yaşayabilirliği ve aktivasyon kapasitesini azaltabilir. Aşağıdaki tablo şu bulguları özetlemektedir:

Bu yöntem, araştırma veya terapötik uygulamalar için oldukça spesifik hücre popülasyonlarına ihtiyacınız olduğunda özellikle yararlıdır.

Araştırma ve tıpta insan PBMC'lerinin uygulamaları

Arabada rol - T hücre terapisi gelişimi

İnsan PBMC'leri, bazı kanserler için çığır açan bir tedavi olan CAR - T hücre tedavisini ilerletmede çok önemli bir rol oynar. Bu hücreler, kanser hücrelerini hedeflemek ve yok etmek için tasarlanmış CAR - T hücreleri üretmek için başlangıç ​​malzemesi görevi görür. PBMC'lerin bu süreçte ne kadar etkili olduğunu merak edebilirsiniz. Çalışmalar etkileyici sonuçlar ortaya koyuyor:

• 11 günlük kültürden sonra, 1 × 10^7 dondurulmuş PBMC'ler,% 30'dan fazla CAR+ hücresi ile en az 1.48 × 10^9 mezokar - T hücreleri üretebilir.

• Sitotoksisite testleri, taze ve kriyo -arınmış PBMC'lerden türetilen mezokar - T hücrelerinin benzer şekilde performans gösterdiğini göstermektedir. Bir efektör - 4: 1 hedef oranında sitotoksisiteleri sırasıyla%91.02 -%100.00 ve%95.46 -

• 2: 1 daha düşük bir oranda bile, sitotoksisitede anlamlı bir fark gözlenmez.

Bu bulgular, uzun süreli depolamadan sonra bile etkili CAR - T hücrelerinin üretilmesinde PBMC'lerin güvenilirliğini vurgulamaktadır.

İlaç Testi ve Toksisite Çalışmalarında Kullanım

PBMC'ler ilaç testi ve toksisite çalışmalarında paha biçilmezdir. İlaçların bağışıklık hücreleriyle nasıl etkileşime girdiğini değerlendirmek için insan - ilgili bir model sağlarlar. Örneğin, araştırmacılar toksisitesini değerlendirmek için PBMC'ler üzerindeki ilaç kinakrini test ettiler. Aşağıdaki tablo bulguları özetlemektedir:

Bu sonuçlar PBMC'lerin düşük toksisite seviyelerinde bile kinakrine aktif olarak yanıt verdiğini göstermektedir. Bu, onları yeni ilaçlara bağışıklık tepkilerini tahmin etmek için güvenilir bir araç haline getirir.

Biyomarker keşfi ve bağışıklık izleme

PBMC'ler biyobelirteçleri tanımlamak ve bağışıklık sağlığını izlemek için gereklidir. Biyobelirteçler biyolojik süreçlerin veya hastalıkların ölçülebilir göstergeleridir. PBMC'leri analiz ederek, bağışıklık aktivitesini, hastalık ilerlemesini veya tedavi etkinliğini ortaya çıkaran biyobelirteçleri ortaya çıkarabilirsiniz. Örneğin, araştırmacılar genellikle enfeksiyonlar veya tedaviler sırasında bağışıklık tepkilerini izlemek için PBMC'lerde sitokin seviyelerini ölçerler. Bu yaklaşım, tedavilerin bireysel hastalara uyarlanmasına yardımcı olur ve sonuçları iyileştirir.

PBMC'ler ayrıca uzun - bağışıklık izleme terimini etkinleştirir. Kararlılıkları ve uyarlanabilirlikleri, onları zaman içinde bağışıklık fonksiyonundaki değişiklikleri izlemek için ideal hale getirir. Bu özellikle kronik hastalıklarda veya uzun süreli tedaviler sırasında yararlıdır.

İnsan PBMC'leri immünolojiyi anlamada ve ilerletmede vazgeçilmezdir. Çeşitli kompozisyonları - likfositler, monositler ve dendritik hücreler - kritik bağışıklık fonksiyonları gerçekleştirmelerini sağlar. Ficoll bindirme ve immünomanyetik ayırma gibi izolasyon teknikleri, araştırma veya terapötik kullanım için yüksek saflık PBMC'ler elde edebilmenizi sağlar.

Uygulamaları çok çeşitli alanları kapsamaktadır:

• Binlerce çalışma, son 50 yılda klinik araştırmalarda PBMC'leri kullanmıştır.

• Car - t hücre tedavisi, ilaç gelişimi ve bağışıklık tepki analizi için hayati önem taşırlar.

• PBMC'ler biyobelirteç keşfine, hasta tabakalaşmasına ve nadir hastalık araştırmalarına katkıda bulunur.

PBMC'lerden yararlanarak, immünolojideki yeni olasılıkların kilidini açabilir ve sağlık hizmetlerini dönüştüren yenilikçi tedaviler geliştirebilirsiniz.

SSS

Tıbbi araştırmalarda kullanılan PBMC'ler nelerdir?

PBMC'ler, araştırmacıların bağışıklık tepkilerini incelemelerine, yeni ilaçları test etmelerine ve araba - t hücre tedavileri gibi tedaviler geliştirmelerine yardımcı olur. Uyarlanabilirlikleri ve stabilitesi onları insan bağışıklık hücreleri gerektiren deneyler için ideal hale getirir.

PBMC'leri ileride kullanılmak üzere nasıl saklıyorsunuz?

PBMC'leri sıvı azot içinde kriyopreserleyerek saklayabilirsiniz. Bu yöntem, yıllarca yaşayabilirlik ve işlevselliklerini korur ve bunları uzun vadeli çalışmalarda veya terapötik uygulamalarda kullanmanıza olanak tanır.

PBMC'ler beyaz kan hücreleriyle aynı mı?

Tam olarak değil. PBMC'ler, lenfositler, monositler ve dendritik hücreleri içeren beyaz kan hücrelerinin bir alt kümesidir. Beyaz kan hücrelerinin bir parçası olan nötrofiller gibi granülositleri hariç tutarlar.

PBMC'ler otoimmün hastalıkları incelemek için kullanılabilir mi?

Evet! PBMC'ler otoimmün hastalıkları incelemek için değerlidir. Bağışıklık hücresi davranışını, sitokin üretimini ve genetik belirteçleri analiz etmenize, hastalık mekanizmaları ve potansiyel tedaviler hakkında bilgi vermenize yardımcı olurlar.

PBMC izolasyonu karmaşık bir süreç mi?

Tam olarak değil. Ficoll bindirme yöntemi veya immünomanyetik ayırma gibi teknikler PBMC izolasyonunu basit hale getirir. Uygun eğitim ve ekipmanlarla, araştırmanız için yüksek saflık örnekleri elde edebilirsiniz.