Periferik kan mononükleer hücrelerinin (PBMC'ler) karşılaştırmalı analizi: immünoloji ve terapötik araştırmalarda tür uygulamaları arasında

IFaz ürünleri

Periferik kan mononükleer hücreleri (PBMC'ler)

Periferik kan mononükleer hücreleri (PBMC'ler)tek yuvarlak bir çekirdek ile karakterize edilen periferik kanda bulunan heterojen bir bağışıklık hücresi popülasyonudur. Bunlar, granülositler (örn., Nötrofiller) ve eritrositler hariç tutarken, T hücreleri, B hücreleri ve doğal katil (NK) hücreleri gibi lenfositler ve monositler içerir. PBMC'ler tipik olarak, hücreleri yüzdürmeye dayalı olarak ayıran Ficoll gibi ortam kullanılarak yoğunluk gradyan santrifüjleme yoluyla izole edilir. Bu - invaziv olmayan yöntem, kritik bağışıklık bileşenlerine kolay erişim sağlar, bu da PBMC'leri immünoloji araştırmalarında ve terapötik gelişimde paha biçilmez hale getirir.

PBMC Isolation

Tek çekirdeklenmiş hücrelerin boyutu, morfolojisi ve özgül ağırlığı, periferik kandaki diğer hücrelerden farklıdır. Kırmızı kan hücrelerinin ve polimorfonükleer lökositlerin özgül ağırlığı 1.080'i aşar, bireysel çekirdeklenmiş hücrelerin yaklaşık 1.070 ve trombositlerin yaklaşık 1.030'dur. Bu nedenle, çeşitli kan hücrelerinin spesifik ağırlığı ile bireysel çekirdekli hücreler arasındaki fark, çeşitli kan hücrelerini bireysel çekirdeklenmiş hücrelerden ayırmak için kullanılabilir. Ficoll Yoğunluk Gradyan Santrifüjleme, en yaygın kullanılan yöntemdirPBMC izolasyonuve saflaştırma. Ficoll, ortalama moleküler ağırlık 400.000 olan bir sükroz multimer, nötrdür ve yoğunluk 1.2 g/ml olduğunda, normal fizyolojik ozmotik basıncını aşmaz ve biyolojik membranlardan geçmez, bu nedenle PBMC için yaygın olarak kullanılır. Bu nedenle, genellikle PBMC ayırma için ayırma çözeltisi olarak kullanılır. Eritrositler ve granülositler, santrifüjlemeden sonra tüpün altına büyük bir özgül ağırlığa ve lavaboya sahiptir; Lenfositler ve monositler, ayırma çözeltisinin spesifik ağırlığından daha az veya eşit bir özgül ağırlığa sahiptir ve santrifüjden sonra ayırma çözeltisinin yüzeyinde yüzer ve hücrelerin küçük bir kısmı da ayırma çözeltisinde asılabilir. Beyaz membran tabakası hücrelerini ayırma çözeltisinin sıvı yüzeyinde aspire ederek ve uygun şekilde yıkayarak, daha yüksek saflıkta tek çekirdeklenmiş hücreler, yani PBMC periferik kandan izole edilebilir.

Farklı türlerde PBMC'ler

İnsan olmayan primatlarda, özellikle sinomolgus maymunları ve rhesus maymunlarında, PBMC araştırmaları insanlarla paylaştıkları fizyolojik benzerlikler nedeniyle çok değerlidir. AraştırmaCynomolgus Monkey PBMCVeRhesus maymun PBMCbağışıklık mekanizmaları hakkında ayrıntılı çalışmalar sağladı ve maymun PBMC kullanan çok sayıda çalışma, insan immünoterapisi için çeviri potansiyellerinin altını çizmiştir. Monkey PBMC'nin aşı testi, ilaç taraması ve bağışıklık modülasyonunda kullanımı hem klinik öncesi hem de klinik araştırmalarda bir temel taşı haline gelmiştir.

Benzer şekilde,Köpek PBMCveteriner immünolojisine önemli ölçüde katkıda bulunmuştur. Köpek PBMC'yi kullanan çalışmalar, köpeklerde bağışıklık tepkisi yollarını aydınlatırken,Köpek PBMCayrıca insan bağışıklık fonksiyonu ile paralellikleri vurgulamıştır. Zoonotik hastalıklar alanında, hem köpek PBMC hem de köpek PBMC araştırmaları, patojen - konak etkileşimleri hakkında kritik veriler sağlamıştır ve bu hücrelerin hastalık gözetimi ve tedavi gelişimindeki rolünü vurgulamıştır. Karşılaştırmalı çalışmalarda köpek PBMC ve Canine PBMC'nin tekrar eden kullanımı, bir model sistemi olarak önemlerinin altını çizmektedir.

Kemirgen modelleriSıçan PBMCVeFare PBMC, geleneksel olarak immünolojik araştırmaların ön saflarında yer almıştır. Sıçan PBMC kullanan araştırmalar, kronik inflamatuar durumlarda bağışıklık regülasyonu hakkında ayrıntılı bir bakış açısı sunmuştur ve fare PBMC'nin kapsamlı kullanımı, otoimmünite ve enfeksiyonun genetik ve mekanik çalışmaları için çok önemlidir. Araştırmacılar, karmaşık immünolojik süreçleri keşfetmek için hem sıçan PBMC hem de fare PBMC'ye güvenmeye devam ediyor ve bu modelleri vazgeçilmez hale getiriyor. Ayrıca, entegrasyonuhamster pbmcDeneysel kurulumlarda, hamster PBMC çalışmaları sıklıkla viral patogenez ve bağışıklık kaçırma stratejileri hakkında yeni bilgiler sağladığı için immünolojik araştırmalara başka bir boyut eklemiştir. Sıçan PBMC ve fare PBMC üzerindeki araştırmaları tamamlayan hamster PBMC ile, kemirgen modelleri toplu olarak bağışıklık çalışmaları için kapsamlı bir araç seti oluşturur.

Büyük hayvan modelleri de alanı zenginleştirdi,Minipig PBMCKlinik öncesi çalışmaların ve klinik uygulamaların köprülenmesinde çok önemli bir rol oynamak. Minipig PBMC'nin kullanımının, Minipig PBMC'nin yeni tedavileri test etmek için fizyolojik olarak ilgili bir platform sağladığı rejeneratif tıp ve organ nakli araştırmalarında faydalı olduğu kanıtlanmıştır. Dahası, araştırmalartavşan pbmcantikor üretiminde ve otoimmün bozuklukların incelenmesinde etkili olmuştur, tavşan PBMC araştırmaları sürekli olarak değerli immünolojik bilgiler vermektedir. Araştırmacılar, minipig PBMC ve tavşan PBMC'yi birlikte kullanarak, insan fizyolojisini yakından taklit eden sistemlerde yeni immünoterapilerin etkinliğini ve güvenliğini değerlendirebilirler.

Kedi veCAT PBMCAraştırmalar, retroviral enfeksiyonlar ve bağışıklık disfonksiyonu çalışmasında nişini ortaya koymuştur. Kullanan soruşturmalarkedi pbmckedi bağışıklık sistemi hakkındaki anlayışımızı geliştirirken, CAT PBMC ile yapılan çalışmalar, viral enfeksiyonlarla ilişkili bağışıklık tepkilerine bir pencere sunmuştur. Hem kedi PBMC hem de CAT PBMC, kedi ve insan immün yetmezlik virüsleri arasındaki paralellikleri araştıran araştırmalarda tekrar tekrar vurgulanmıştır, bu da kedi PBMC ve CAT PBMC'nin tekrar tekrar kullanımının etkili teşhis ve terapötik stratejiler geliştirmek için çok önemli olduğunu kanıtlamaktadır.

Kuş immünolojisi geride kalmadı,Tavuk PBMCVeördek pbmcKuşların bağışıklık mekanizmalarına ilişkin eleştirel bilgiler sağlayan çalışmalar. Tavuk PBMC'yi kullanan araştırmalar kuş bağışıklık tepkilerinin benzersiz yönlerini ortaya çıkarırken, ördek PBMC'yi içeren araştırmalar, kuş türlerinde patojen direnci anlayışımızı daha da zenginleştirmiştir. Viral enfeksiyonları ve aşı etkinliğini inceleyen çalışmalarda tavuk PBMC ve Duck PBMC'nin tekrar tekrar kullanılması, hem hayvan hem de insan popülasyonlarını etkileyen hastalıkları kontrol etmede önemlerini göstermektedir.
Ayrıca, kullanan çalışmalarKobay PBMCkobay PBMC'nin sürekli olarak bağışıklık tepkisinin güvenilir göstergeleri olarak hizmet ettiği tüberküloz ve aşı araştırmalarının merkezinde yer almıştır. Paralel olarak,Alpaca PBMCVeDeve pbmcbu türlerde bulunan benzersiz antikor yapıları nedeniyle dikkat çekmiştir. ALPACA PBMC ve Camel PBMC'yi içeren araştırmalar, yeni terapötik uygulamaları tanıtmıştır, hem ALPACA PBMC hem de Camel PBMC, yenilikçi nanobod teknolojilerini ve bağışıklık tabanlı tedavileri keşfetmek için tekrar tekrar kullanılmaktadır.

Katkılarısığır pbmcVekoyun pbmcTarımsal immünolojiye de dikkat çekicidir. Sığır PBMC ile yapılan çalışmalar, sığır mastiti ve solunum hastalıkları hakkında derin bilgiler sağlamıştır ve sığır PBMC'yi kullanan kapsamlı araştırmalar, sığır sağlığını iyileştirmek için doğrudan stratejileri bilgilendirmiştir. Aynı şekilde, immünolojik araştırmalarda koyun PBMC'nin tekrar tekrar kullanılması, ruminant bağışıklık tepkileri anlayışımızı zenginleştirmiştir ve koyun PBMC araştırmaları, etkili aşıların ve hastalık yönetimi protokollerinin geliştirilmesine rehberlik etmeye devam etmektedir.

Bağışıklık araştırmalarında rol

PBMC, in vivo ortamı taklit edebilir ve ilaç geliştirme için etkili bir in vitro model sağlayabilir. İlaçların PBMC proliferasyonu, apoptoz ve sitotoksisite üzerindeki etkilerini gözlemleyerek, ilaçların etkinliği ve güvenliği başlangıçta değerlendirilebilir. İlaçların PBMC'nin eylem ve sinyal yolları üzerindeki etkilerini inceleyerek, ilaç eyleminin yeni hedeflerini keşfetmeye yardımcı olur ve bu bulgular ilaç geliştirme için yeni fikirler ve talimatlar sağlayabilir.

Antikorda Uygulamalar - Bağımlı Hücre - aracılı sitotoksisite (ADCC)

PBMC'nin ilaç keşfinde uygulanması,Antikor - Bağımlı Hücre - aracılı sitotoksisite (ADCC). Antikor - Bağımlı Hücre - Adı belirttiği gibi, aracılı sitotoksisite, hedef hücreleri öldürmek için antikor - aracılı hücre öldürmeye dayanır. Spesifik işlem aşağıdaki gibi anlaşılabilir: Antikorun FAB segmenti, hedef hücre üzerindeki bir antijenik epitopa bağlanır. Antikorun FC segmenti, NK hücresinin yüzeyindeki FCR'ye bağlanır (NK hücreleri ADCC rolünü oynayabilen ana hücreler olduğundan, bu bir örnek olarak kullanılır) ve böylece NK hücresi aktive edilir ve perforin ve granzim salınır. Perforin ve granzim, hedef hücre zarında oluşan gözenekten hücreye girer ve apoptoz - ilişkili enzimleri aktive ederek hedef hücrenin ölmesine neden olur.

UygulamalarOTHimmünoterapötik ilaç gelişimi

• - Karışık lenfosit reaksiyonu (MLR)

Birincil DC hücreleri ve T hücreleri, DC - aracılı T hücresi aktivasyonunu değerlendirmek için kullanılabilen bir sistemde kültürlenir. DC hücreleri, yüzeylerinde büyük miktarlarda Pd - L1'i ifade eder, bu da onu inhibe etmek için T hücrelerinin yüzeyinde Pd - 1'e bağlanır. İlaç ikisi arasındaki reaksiyon yolunu etkili bir şekilde bloke edebilirse, T hücrelerinin büyük miktarlarda çoğalmasını uyarabilir, böylece ilacın fonksiyonel aktivitesini doğrulayabilir.

- T CellActivation Testleri

T - Hücre Aktivasyon Analizi, immünoterapi ilaçlarının etkilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan analizlerden biridir. T hücresi aktivasyon analizlerinde, in vitro kültürlü T hücreleri genellikle T hücresi aktivasyonunu indüklemek için antijenler veya antikorlar gibi uygun uyaranlar verilir ve verilir

- T hücre proliferasyon deneyi

T - Hücre proliferasyon deneyleri, immünoterapi ilaç adaylarını taramak ve farklı ilaçlardaki T - hücre proliferasyon derecesini karşılaştırarak ilaçların etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir -

PBMC'lerin Stafilokok Enterotoksin B Stimülasyonu

Stafilokokal enterotoksin B, antijen - sunan hücreler üzerinde doğrudan MHC moleküllerine bağlanan ve T - hücre reseptörlerine sunulan bir süperanjendir. Stafilokok enterotoksin B, t - hücreleri özellikle aktive etme ve IL - 2, IL - 6, vb.

Sitokin salınım sendromunda PBMC rolü

PBMC, gelişiminde önemli bir rol oynar.sitokin salınım sendromu(CRS), akut ve potansiyel olarak yaşamı tehdit eden sistemik enflamatuar yanıt. İster CAR - T hücreleri, monoklonal antikorlar veya enfeksiyonlar gibi immünoterapiler tarafından uyarıldığında - bu hücreler yüksek oranda aktive olur ve hızla IL - 6, IL - 1, IFN - y ve TNF - a gibi bir dizi sitokin salgılar. Bu aşırı sitokin üretimi, ateş, vasküler sızıntı, hipotansiyon ve çok organ disfonksiyonu gibi çeşitli olayları tetikleyebilir. PBMC'lerin CRS'ye katkısını anlamak, istenen immünoterapötik etkileri korurken sitokin fırtınasını temperleyerek sendromun hafifletilmesine yardımcı olmak için IL - 6 reseptör inhibitörleri gibi hedeflenen müdahalelerin geliştirilmesine yol açmıştır.

Vasiyetnameklişe

Özetle, bu makale PBMC'lerin geniş bir tür spektrumunda bağışıklık mekanizmaları anlayışımızı geliştirmede oynadıkları kilit rolün altını çizmektedir. İnsan fizyolojisini yansıtan primat modellerinden kemirgen, büyük hayvan ve kuş sistemlerine, her biri ayırt edici araştırma avantajları sunan benzersiz katkıları inceleyerek bu incelemenin, karşılaştırmalı çalışmaların sadece klinik öncesi değerlendirmeleri nasıl geliştirdiğini değil, aynı zamanda yenilikçi immünoterapötik stratejilerin yolunu nasıl açtığını vurgulamaktadır. PBMC araştırmasının aşı gelişimi, ilaç etkinliği testi ve yeni bağışıklık yollarının araştırılması gibi çeşitli alanlara entegrasyonu, hem temel bilim hem de klinik uygulamalardaki vazgeçilmez rolünü örneklemektedir. Nihayetinde, PBMC'lerin çapraz tür analizi, bu hücresel modellerin değerini, tezgah kenarındaki keşifleri çok çeşitli immünolojik zorluklar için etkili tedavilere dönüştürmede temel araçlar olarak yeniden teyit eder.

KEywords: Periferik kan mononükleer hücre, Cynomolgus Monkey PBMC, Rhesus maymun PBMC, Köpek PBMC, Köpek PBMC, Sıçan PBMC, Fare PBMC, Fareler PBMC, Hamster PBMC, Minipig PBMC, Tavşan pbmc, kedi pbmc, CAT PBMC, Tavuk PBMC, Ördek PBMC, Kobay PBMC, Alpaca PBMC, Deve PBMC, Sığır PBMC, Koyun pbmc, Antikor - Bağımlı Hücre - aracılı sitotoksisite (ADCC), Sitokin salınım sendromu, dondurulmuş PBMC, kriyo -arınmış PBMC,PBMC izolasyonu, PBMC'yi çözmek, Kültür PBMC, Lökopak, Lökaferez PBMC, HLA PBMC yazdı.