Наркотики ADC: поняття розщеплення лінкера та випуску корисного навантаження

Розщеплення лінкера та вивільнення корисного навантаження в препаратах АЦП

Антитіло - кон'югати наркотиків (АЦП) покладаються на спеціалізовані лінкери, які з'єднують націлюючі антитіла до невеликих - корисних навантажень токсину молекули. Ці лінкери класифікуються як розщеплені або не - розщеплені, залежно від того, як вони погіршуються всередині комірки.

Розрізані лінкери

Розрізані лінкери розроблені як хімічно нестабільні, скориставшись відмінностями між позаклітинними та внутрішньоклітинними умовами, такими як рівень рН та окислювально -відновлювальний потенціал. Їх також можна ферментативно деградувати в лізосомах.

Хімічно розщеплені лінкери в першу чергу включають кислотні - чутливі лінкери (такі як перилен або карбонатні зв’язки) та зменшені лінкери (такі як дисульфідні зв’язки). Кислота - Чутливі лінкери розбиваються в кислих середовищах, зокрема в ендосомах (pH 5,5–6,2) та лізосомах (pH 4,5–5,0), запускаючи випуск корисного навантаження.

Ще одним ключовим типом розщеплення лінкера є фермент - чутливий лінкер, який розбивається внутрішньоклітинними гідролітичними ферментами. Серед них пептид - на основі лінкерів полегшує інтерналізацію препарату АЦП за допомогою ендоцитозу та покладається на лізосомальні катепсини для розщеплення. Загальний фермент - Чутливі лінкери включають GGFG (Gly - Gly - Phe - gly) та vc (Val - cit). Linker GGFG особливо реагує на катепсин L, що дозволяє майже повне вивільнення DXD від його АЦП протягом 72 годин, тоді як катепсин В демонструє мінімальну активність у цьому процесі. Однак і лінкери GGFG, і VC зазнають розщеплення катепсином В у лізосомах або ендосомах пухлинних клітин, забезпечуючи ефективне вивільнення лікарських засобів.

Порівняно з кислотою - розщеплювальною та глутатіоном (GSH) - розщеплювальними лінкерами, лінкер GGFG пропонує більшу стабільність у крові, мінімізуючи ненавмисне вивільнення корисного навантаження та підвищення безпеки наркотиків. Аналогічно, лінкер ВК залишається стабільним у плазмі та ефективно звільняє препарат у пухлинних клітинах, забезпечуючи цільову доставку.

Оскільки розщеплення лінкерів змінюється в механізмі, вибір правильної системи розщеплення має вирішальне значення для ефективного тестування на наркотики. Поширені тестові системи in vitro для вивільнення корисної навантаження включають підкислений гомогенат печінки (pH 5,0–6,0), підкислену фракцію печінки S9 (pH 5,0–6,0), лізосоми печінки, пухлинні клітини та специфічні ферменти, такі як катепсини В, М і Л, глюкуронідаза, глутатіони (GSH) та нога. Вибір системи залежить від типу лінкера, що є тестом

Не - розрізані лінкери

Не - розщеплені лінкери залежать від повного розбиття антитіл до АЦП цитоплазматичними та лізосомальними протеазами, в кінцевому рахунку вивільняючи корисне навантаження, приєднане до продукту деградації антитіл. Однак їх ефективність значною мірою спирається на високу експресію антигену в пухлинних клітинах та сильну можливості інтерналізації кон'югованого препарату для забезпечення ефективного вивільнення корисного навантаження.

Для досліджень in vitro тестові системи, такі як підкислений гомогенат печінки, підкислена фракція печінки S9 та лізосоми можуть ефективно погіршити компонент антитіла, полегшуючи вивільнення корисного навантаження. Ці системи є важливими для оцінки фармакокінетичних властивостей АЦП за допомогою не - розщеплених лінкерів.

Ключові слова: Лінкер ADC, випуск корисної навантаження, Лізосома печінки, лізосомальна стабільність, катаболізм лізосоми, катепсин В, DS8201A, GGFG - DXD