Вступ доМіксома печінкиі дроби S9
У галузі метаболізму та фармакокінетики лікарських засобів розуміння тонкощів мікросом печінки та фракцій S9 є вирішальним. Ці системи in vitro є важливими на ранніх стадіях виявлення наркотиків, що дає зрозуміти, як нові хімічні утворення (NCE) метаболізуються печінкою. Здатність прогнозувати метаболічну стабільність та потенційну взаємодію з наркотиками є неоціненною, заощаджуючи час та ресурси в розробці нових фармацевтичних препаратів. Ця стаття заглиблюється у відмінності між мікросомами печінки та дробами S9, досліджуючи їх склад, функціональність, переваги та обмеження.Склад і структура мікросом печінки
● Мікросоми як частина ендоплазматичного ретикулуму
Мікросоми печінки - це везикул - як артефакти, отримані з ендоплазматичного ретикулума в еукаріотичних клітинах. Вони утворюються, коли клітини розбиваються під час процесу гомогенізації, що призводить до осідання ендоплазматичного ретикулуму. Ця субклітинна фракція збагачена мембраною - пов'язаними ферментами і є першорядною для вивчення метаболізму препарату, зокрема реакцій фази I.● Ключові ферменти залучені: Цитохром P450 та UGT
Висока концентрація ферментів цитохрому Р450 (CYP) у мікросомах печінки є їх визначальною особливістю. Ці ферменти відіграють вирішальну роль в окислювальному обміні величезного спектру ксенобіотиків, включаючи наркотики та токсини навколишнього середовища. Також є уридин -дифосфат - глюкуронозилтрансферази (UGT), які сприяють кон'югації та подальшому усуненню метаболітів, що відзначає початковий крок до розуміння I фази та деяких реакцій фази II.Склад і структура фракцій S9
● S9 як комбінація мікросомних та цитозольних фракцій
Фракція S9, яку часто називають супернатантом 9000G, є субклітинним компонентом, отриманим з гомогенатів печінки за допомогою диференціального центрифугування. На відміну від мікросом, що містять переважно ендоплазматичний ретикулум - пов'язані ферменти, фракція S9 включає як мікросомальні, так і цитозольні ферменти, що представляє більш всебічний ферментативний профіль.● ферменти, присутні в S9, включаючи I та II фази
S9 фракції забезпечують більш багате ферментативне середовище, інкапсулюючи як ферменти фази I, такі як CYP, і набір ферментів фази II, такі як сульфотрансферази, глюкуронозилтрансферази та глутатіон - S - трансферази. Цей масив дозволяє більш обширні метаболічні перетворення, імітуючи середовище in vivo печінки, точніше, ніж мікросоми.Функціональність: метаболізм фази I та фази II
● Відмінності активності ферменту між мікросомами та S9
Різниця в ядрі полягає в ферментативному масштабі. Мікросоми печінки в першу чергу підтримують метаболічні реакції фази I, що включають окислення, відновлення та гідроліз. Ці реакції вводять або розкривають функціональні групи на молекулах лікарських засобів, прокладаючи шлях для реакцій фази II. На відміну від цього, фракції S9 охоплюють обидві фази I, і II, тим самим полегшуючи реакції кон'югації, які мікросоми не можуть самостійно виконувати.● Важливість I та II фази в метаболізмі наркотиків
Послідовна природа реакцій фази I та II підкреслює їх значення в метаболізмі препарату. Модифікації фази, як правило, готують сполуки до II фази, яка, як правило, включає кон'югацію для підвищення розчинності, сприяючи процесу виведення. Розуміння цих фаз є життєво важливим для прогнозування біодоступності, ефективності та потенційної токсичності препарату.Застосування в дослідженнях метаболізму наркотиків
● Використання в дослідженнях ADME: поглинання, розподіл, метаболізм, усунення
Мікросоми печінки та фракції S9 є ключовими в дослідженнях ADME, які оцінюють поглинання, розповсюдження, метаболізм та усунення кандидатів на наркотики. Ці дослідження мають вирішальне значення для визначення фармакокінетичного профілю лікарських засобів, надаючи істотні дані, які інформують дозування, потенційні взаємодії та побічні ефекти.● Порівняльні дослідження: Мікросоми проти S9 у виявленні наркотиків
Порівняльний аналіз між мікросомами та фракціями S9 виявляє, що, хоча обидва мають своє використання, фракції S9 пропонують більш цілісний погляд на метаболічну стабільність через включення ферментів фази II. Цей всебічний аналіз допомагає в ідентифікації метаболічних шляхів, які можуть бути не очевидними при використанні лише мікросом печінки.Переваги мікросом печінки
● Вартість - Ефективність та доступність
Мікросоми печінки надають перевагу за їх вартість - Ефективність та широка доступність. Процеси їх підготовки та використання добре встановлені, що робить їх практичним вибором для багатьох лабораторій.● Сумісність з високою пропускною здатністю та автоматизацією
Простота мікросомних аналізів робить їх придатними до високої пропускної здатності та автоматизації, що є важливою особливістю для швидкого скринінгу великих бібліотек сполук. Ця перевага має вирішальне значення для впорядкування трубопроводу виявлення наркотиків, що дозволяє ранній ідентифікацію перспективних кандидатів.Переваги дробів печінки S9
● Комплексне метаболічне зображення
З ферментами фази I, і II фракції S9 пропонують більш повну оцінку метаболічної долі сполуки. Це всебічне представлення особливо корисне для виявлення потенційних метаболітів на початку процесу розробки наркотиків.● Включення метаболізму та витрат фази II
У тому числі ферменти фази II означає, що фракції S9 можуть дати уявлення про реакції кон'югації, прогнозуючи, як ліки будуть оброблені в організмі. Незважаючи на те, що вони можуть вимагати додаткових кофакторів для певних реакцій, вони все ще пропонують сприятливий баланс витрат та корисності в умовах високої пропускної здатності.Обмеження мікросом печінки
● Відсутність цитозольних ферментів, що впливають на дані про повний метаболізм
Значним обмеженням мікросом печінки є їх відсутність цитозольних ферментів, які є важливими для повної метаболічної картини. Ця відсутність означає, що деякі метаболіти можуть бути помічені, відсутні критичні шляхи, важливі для розуміння безпеки та ефективності наркотиків.● Вимога до додаткових систем для дослідження II фази
Для всебічного вивчення реакцій фази II всебічно необхідно додаткові системи або доповнення із зовнішніми ферментами/кофакторами при використанні міксом. Ця вимога може ускладнити дизайн та інтерпретацію аналізу.Обмеження печінки S9 фракцій
● Потреба в CO - факторів та можливого розведення ферментів
Незважаючи на їх всебічний характер, фракції S9 часто вимагають додавання кофакторів для підтримки певних ферментативних дій. Ця потреба може ввести мінливість та складність у аналізи. Крім того, розведення ферментів у фракціях S9, порівняно з ізольованими препаратами, може впливати на чутливість виявлення для деяких метаболічних реакцій.● Проблеми зберігання та підготовки порівняно з мікросомами
Підготовка та зберігання фракцій S9 може бути складнішою, ніж для міксом. Правильне обслуговування ферментативної активності шляхом ретельного поводження та зберігання має вирішальне значення для отримання надійних результатів, дещо ускладнюючи їх використання у великих - масштабних дослідженнях.Висновок та рекомендації
● Підсумок найкращих - Використовуйте сценарії для кожного методу
Мікросоми печінки та фракції S9 мають чіткі сильні та слабкі сторони. Мікросоми печінки найкраще використовуються, коли вартість - ефективна швидка скринінг фази I метаболізму. На відміну від цього, фракції S9 краще підходять для комплексних досліджень, що вимагають розуміння метаболізму фази I та II. Вибір відповідної системи залежить від конкретних вимог досліджень та наявних ресурсів.● Пропозиції щодо оптимального вживання в процесах розробки наркотиків
Для тих, хто на ранніх стадіях розробки лікарських засобів, використовуючи високі - якісні мікросоми печінки від авторитетного постачальника мікросом печінки або виробника мікросом печінки, можуть впорядкувати початкові екранізації. У міру просування досліджень, включенняпечінка S9Фракції, можливо, отримані з надійної фабрики печінкових мікросом, забезпечать більш повну картину метаболічної стабільності, забезпечуючи надійну оцінку кандидата на наркотики.● Вступ доIphase
Штаб -квартира в Північному Уельсі, Пенсильванії, Biosciences Iphase - це "спеціалізована, нова та інноваційна" висока - техніка, що інтегрує дослідження, розробки, виробництво, продаж та технічні послуги інноваційних біологічних реагентів. Використовуючи широкі знання та пристрасть до наукових досліджень, наша наукова команда зобов’язана постачати якісні інноваційні біологічні реагенти вченим у всьому світі та допомагати дослідникам у всьому науковому прагненні, щоб допомогти досягти своїх дослідницьких цілей. Дотримуючись науково -дослідного ідеалу "інноваційних реагентів, досліджуючи майбутнє", IPHASE встановив кілька засобів науково -дослідної роботи, центри продажів, складів та партнерів з дистрибуції по всьому світу.
Час посади: 2024 - 11 - 26 16:50:02