Immunologik tadqiqotlar bo'yicha splenokitlar: turlar va izolyatsiya, muzlash, qadamlar

Kalit so'zlar:Sprenokitlar (SplSlar); SynoLollsus Monki Spenotsitlar; Rheus Monkey Spenotsitlar; It dumlari; Kanon tzenositlari; Rath spiklastitlar; Sichqoncha bo'linish; Sichqonlarning splenokitlari; Quyon splenlastitlari; Sprenokitlar izolyatsiya; Muzlash sprenzitlari; Eritish spenokitlari

Iphaza mahsuloti

Sprenokitlar (SplS)Immunitet hujayralarining turli xil populyatsiyasi, taloq hujayralari, qonni filtrlash, immunitetni o'rnatish va xomeostazni saqlash bilan shug'ullanadigan hayotiy organ. Ushbu kattaroqlarda limfotsitlar (t hujramlar, b hujayralar), makrofalar, karron hujayralar va tabiiy qotillar va tabiiy qotil (Nk) hujayralar kiradi, ularda moslashuvchan va tug'ma immunitetda muhim rol o'ynaydi. Sprenokitlar immunitet funktsiyasi, vaktsinasi, avtotransport kasalliklarini o'rganish va saraton kasalligi bo'yicha immunoterapni o'rganish bo'yicha aniq va tarjimon tadqiqotlarda keng qo'llaniladi.

Sprenokitlarning roli va tarkibi (SplS)

Taloq ichidagi dumlenokitlar alohida hududlarda istiqomat qiladilar: qizil xamirturush, qonni filtrlaydi va eski qizil qon hujayralarini va oq pulpa boshlanadi, bu erda immunitet javoblari boshlanadi. Oq pulpa tal zonalar va b mobil follikulalarda tashkil etilgan, antigen o'rtasidagi o'zaro ta'sirlarni engillashtiradi. Hujayralar va limfotsitlar. Ushbu noyob arxitektura spmunologik istaklarda, masalan, plompot, oqim sitometriya va aralash limfotsitlar reaktsiyalari kabi kuchli vositani yaratadi.

Turlar - Muayyan tzenokitlar (SplS)

-Cyomoli Monki Spenotsitlar:Cynomolkus maymun tzyositlari printsipial tadqiqotlarda qo'llaniladi, chunki ular inson immunitetining javoblarini yanada taqlid qilib, Synomolga Monkey Spenotsitlar tarjimon uchun idealizatsiya qiladi.

-Rheus Monkey Spenotsitlar:Rhexus maymun tzyadilar shunga o'xshash odamlar uchun yaqin immunologik o'xshashliklari uchun qadrlanadi. Resus Monkey Spenotsitlardan foydalanib o'rganish hayvonlar modellari va klinik dasturlar orasidagi bo'shliqni ko'prikga olib keladi.

-It dumli splenotsitlar / kanon tzenositlari:Veterinariya tadqiqotlarida, it dzenotsitlari (yoki kanin spenlastitlari) kaninlardagi immunitet kasalliklarini o'rganish va inson immunitetining javoblari bilan taqqoslash uchun ishlatiladi.

-Quyon sprenokites: Quyon sprenokitlari antikod ishlab chiqarish va vaktsinani rivojlantirish bo'yicha tadqiqotlar olib boradi. Quyon splenokitlari sichqoncha dumbinlari yoki kalamush shprenokitsidan farq qilishi mumkin bo'lgan ma'lumotlarni aniqlashga yordam beradi.

-Sichqoncha splenotsitlari / sichqon dumbines:Sichqonchali dlenzitlar immunologiyada eng tez-tez o'rganilganlar (Splenokit) dan biridir. Sichqonchalardan izolyatsiyalash uchun protokollar yaxshi yo'lga qo'yilgan va ikkala sichqoncha bo'linishi va sichqon dumlari tsenzi va boshqa funktsional subyishlar uchun ishlatiladi.

-Rath tsikl:Rat-kalamush immunotoksikologiya va vaktsinani o'rganish uchun qo'shimcha modelni taqdim etadi. Ratlenoksitlar ko'pincha, chorakliklarning farqlarini tushunish uchun sichqonchaning splenokitlari bilan taqqoslanadi.

Sprenokitlar izolyatsiya

Sprenokitlar izolyatsiyaSpetometriya, Sitokin ishlab chiqarish va aralashtirish reaktsiyalari yoki aralash limfotsitlar reaktsiyalari kabi turli xil tadqiqotlarda qo'llaniladigan immunitet hujayralarini qazib olish jarayoni.

Taloq aseptik sharoitlarda olib tashlandi, izolyatsiya eritmasida joylashgan va RPMI 1640 vositasini o'z ichiga olgan steril naychaga o'tkazildi. Centrifuguratsiyani leykotsitlar qatlami sinchkovlik bilan yig'ilgan. Hujayralar RPMI 1640 O'rta, santrifüy va g'ayritabiiy ravishda yuvilgan. Ushbu yuvish bosqichida 1 - takrorlandi 1 - 2 marta izolyator hujayralar qo'shimcha tajribalar uchun ishlatilgan.

Muzlatish splenokitlari

Muzlatish splenokitlarikelajakda foydalanish uchun hujayralarni saqlash uchun muhim qadamdir. Kikopreaklash tadqiqotchilarga o'zlarining hayotiyligi yoki funktsionalligini buzmasdan kengaytirilgan davrlar uchun sprenokitlarni saqlash imkoniyatini beradi.

Yaxshi san'ati bosqichidan yuqori darajadagi hujayralarni to'xtatib turish sulyatantini tashlatiladi va hujayra kontsentratsiyasi muzlash vositasida suyultirildi. Har bir muzlash naychasiga alicot qo'shing va muzlatgichga o'ting, hujayralar to'xtatib turilishini ta'minlash. Muzlangan idishlarni tezda muzlatib qo'ying O'tkazma - 150 ° C muzlatgich idishi (yoki suyuq azot idishi) uzoq muddatli saqlash uchun.

Eritish spenokitlari

Eritish spenokitlariKvopreatsiyadan keyin yuqori hujayralarning hayotiyligi va funksiyasini ta'minlash uchun ehtiyotkorlik bilan amalga oshirilishi kerak. Eritish jarayoni odatda dmso va muz kristalli shakllanishining zararli ta'sirini minimallashtirish uchun odatda tezroq.

Qoniqalar 37 ° C suvi vannaga o'tkaziladi va muzlik kristallariga qadar eritiladi. 0,5 - 1 - 1 mln. Muzlatilgan trubkaga mozorni qayta tiklash, qayta tiklang va hujayra madaniyati o'rtalariga to'lgan 15ml naychaga diskvalifikatsiya qilinadi. Sentrifture, o'ta ozuqani olib tashlang va hujayralarni bo'shatish uchun naychani bosing. 1ml hujayraning madaniyati, zarbasi va pipetka bilan qayta tiklash, 15 ml hajmga qo'shing. Centrifture, de - Supergare, 1ml hujayra madaniyati vositalarini qo'shing, chunki kutilgan katak kontsentratsiyaga muvofiq o'rtada qo'shing. Hujayralarni qopqoqda bir oz nariri bilan CO2 inkubator va inkubator-da joylashtiring. Inkubatsiya oxirida qayta sotish va birlashtirilgan hujayra tubini cho'ktirishga imkon berish uchun 1minga qoldiring. Yog'ingarchilik yoki yog'ingarchiliksiz havo to'xtatilishi yangi 15ml naychaga ehtiyotkorlik bilan o'tkazildi. Hujayralar hujayra faoliyatini aniqlashga hisoblangan.

Xulosa

Spenotitlar, ularning turli xil tarkibi va xalqaro miqyosli rol bilan, immunologik tadqiqotlar bo'yicha bebaho vositalardir. Rangententlar, primatlar yoki boshqa turlardan olinganmi yoki yo'qligi, immunitet funktsiyasi, kasallik mexanizmlari, vaktsinasi va saraton kasalligi bo'yicha tanqidiy tadqiqotlar. Izolyatsiya, muzlatish va eritish jarayonlari tendentsiyasini va hayotiyligini saqlash uchun zarurdir, tadqiqotchilarga turli modellar bo'ylab uyali dinamikani o'rganishga imkon beradi. Immunologiyani chuqurlashtirishni chuqur anglashimiz davomida, dlinik tadqiqotlar va klinik dasturlar o'rtasidagi tafovut va klinik dasturlar orasidagi bo'shliqni bartaraf etishda instrumental olib boriladi.