الصفراء البشرية والحيوانية من المصفوفة البيولوجية الفارغة لتطوير الطريقة التحليلية الحيوية والتحليل الحيوي

1 منتجات iphase

2 biomatrix فارغة

أنواع مختلفة منالمصفوفات البيولوجية، بما في ذلك الدم الكامل الفارغ ، المصل ، البلازما ، الصفراء، ويشار بشكل جماعي إلى مصفوفات بيولوجية فارغة.

3 ضرورة استخدام المصفوفات البيولوجية الفارغة في الدراسات قبل السريرية

In البحوث قبل السريرية المخدرات، المصفوفة البيولوجية الفارغة هي حجر الزاوية لإنشاء والتحقق من التحققطرق التحليل البيولوجي. باستخدام المصفوفات الفارغة من الموضوعات الصحية أو الحيوانات التجريبية ، يمكن للباحثين إعداد معايير المعايرة بدقة وعينات مراقبة الجودة ، وتقييم خصوصية ، والحساسية ، والدقة ، ومصفوفة الأساليب التحليلية ، وضمان موثوقية نتائج تحديد تركيز الدواء.

4 التحقق من صحة الطريقة البيولوجية وإنشاء وتطبيق المصفوفة البيولوجية الفارغة

كما هو مطلوب من قبل إرشادات FDA/EMA ، في إنشاء والتحقق من طرق تحليل المصفوفة البيولوجية ، يجب استخدام المصفوفات البيولوجية الفارغة لضمان دقة وموثوقية طريقة التحليل. خاصة في تحليل LC - MS/MS ، قد تؤثر الاختلافات في مكونات المصفوفة من مصادر مختلفة بشكل كبير على كفاءة التأين. تُستخدم المصفوفة الفارغة بشكل أساسي لإعداد معايير المعايرة ، وإعداد عينات مراقبة الجودة لفحص الخصوصية ، والانتقائية ، والدقة ، والدقة ، وتأثيرات المصفوفة ، ومعدل الاسترداد ، والاستقرار ، وخطية التخفيف ، وتأثيرات التداخل ، وما إلى ذلك من الطرق التحليلية. يتطلب تأثير الانتقائية وتأثير المصفوفة لطريقة الكشف متطلبات أعلى للمصفوفة الفارغة.

5 سيناريوهات تطبيق مصفوفة فارغة الصفراء في تطوير الدواء

مصفوفة الصفراء الاصطناعية (مصفوفة الصفراء محاكاة)هو حل اصطناعي يحاكي مكونات الصفراء الطبيعية ويستخدم في استقلاب الأدوية ، علم السموم ، وأبحاث التحليل البيولوجي.مصفوفة فارغة الصفراءله قيمة تطبيق مهمة في سيناريوهات تطوير الأدوية التالية: دراسات الدوائية (PK) لأدوية الجهاز الكبدي ، والامتصاص ودراسات التمثيل الغذائي الأولى للأدوية عن طريق الفم ، ودراسات التفاعل عن حمض المخدرات ، وتقييم السمية الكبدية ودراسات ركود الصفراء ، وتطوير طرق التحليل البيولوجي (LC - MS/MS).

6 أدوية نظام الكبد

في تطور الأدوية للنظام الكبدي ، تلعب المصفوفة الفارغة الصفراء دورًا لا يمكن الاستغناء عنه باعتباره نظام محاكاة في المختبر في الأدوية الدوائية (PK) ، وأبحاث التحليل السمي والبيولوجي.

6.1 تقييم خصائص إفراز الصفراء للعقاقير

الأبحاث حول الدورة الدموية الكبدية: الصفراء هي واحدة من المسارات المهمة لإفراز الأدوية ومستقلباتها. باستخدام مصفوفة الصفراء الاصطناعية ، يمكن محاكاة التغييرات في تركيز الأدوية في الصفراء لتقييم ما إذا كانت يتم امتصاصها من خلال الدورة الدموية الكبدية.

تحديد معدل خلوص الصفراء: بالنسبة للعقاقير التي تفرز بنشاط من خلال الصفراء (مثل الستاتين وبعض المضادات الحيوية) ، يمكن أن تساعد الصفراء الاصطناعية (الصفراء المحاكاة) في تحديد كفاءة الخلوص وتحسين نظام الجرعات.

6.2 دراسة تأثير الأحماض الصفراوية على امتصاص المخدرات

تأثير الذوبان: يمكن للأحماض الصفراوية أن تعزز الذوبان والامتصاص المعوي للأدوية الدهنية مثل فيتامين D. الصفراء الاصطناعية يمكن أن تحاكي تركيبات حمض الصفراء المختلفة وتقييم تأثيرها على التوافر البيولوجي للمخدرات.

تفاعلات حمض الصفراء المخدرات: قد تتنافس بعض الأدوية (مثل Liraglutide) مع ناقلات حمض الصفراء (مثل BSEP ، MRP2) ، ويمكن استخدام الصفراء الاصطناعية لدراسة هذه التفاعلات لتجنب مخاطر الركود الصفراء المحتملة.

6.3 تقييم المخاطر من تسمم الكبد والكولستاس

نموذج الصفراوي الناجم عن الدواء: يمكن للصفراء الاصطناعية محاكاة الحالات المرضية مثل انسداد القناة الصفراوية وفرط بيليروبين الدم ، ويستخدم لاكتشاف ما إذا كانت الأدوية تتداخل مع تدفق الصفراء أو تلف خلايا القناة الصفراء.

تحليل العلامات الحيوية: بإضافة مكونات محددة مثل البيليروبين ، والأحماض الصفراوية ، والعوامل الالتهابية ، يمكن تقييم تأثير الأدوية على مكونات الصفراء ويمكن التنبؤ بالسلامة السريرية.

6.4 المزايا الأخلاقية والعملية لاستبدال الصفراء الطبيعية

معالجة مسألة ندرة العينة: يجب الحصول على الصفراء الطبيعية من خلال طرق غازية مثل قسطرة القناة الصفراوية ، في حين أن الصفراء الاصطناعية يمكن إعدادها بشكل غير محدود لتجنب القيود الأخلاقية.

اتساق الدُفعات: يمكن التحكم في تكوين المصفوفة الاصطناعية (المصفوفة المحاكاة) ، مما يقلل من تأثير الفروق الفردية في الصفراء الطبيعية على النتائج التجريبية.

6.5 دعم تطور طرق التحليل البيولوجي LC - MS/MS

تصحيح تأثير المصفوفة: يمكن أن يؤدي التركيبة المعقدة للتصفرة الطبيعية (أملاح الصفراء العالية ، الفسفوليبيد ، الأصباغ) بسهولة إلى قمع أيون أو تعزيز في تحليل LC - MS/MS. يمكن أن توفر مصفوفة الصفراء الاصطناعية (مصفوفة الصفراء المحاكاة) خلفية مستقرة ، وتحسين حساسية الطريقة ودقة.

7 أبحاث الأنواع المتقاطعة

يختلف تكوين الصفراء اختلافًا كبيرًا بين الحيوانات المختلفة (الفئران ، والكلاب ، والقرود) ، والصفراء الاصطناعية يمكن أن توحيد اختلافات الأنواع وتحسين قابلية ترجمة البيانات قبل السريرية.

7.1 Cynomolgus Monkey Pile (NHP Pile)

يتشابه صفراء قرد Cynomolgus إلى حد كبير مع البشر من حيث التكوين (مثل ملف تعريف حمض الصفراء) والتعبير عن ناقل الأدوية (مثل BSEP ، MRP2) ، مما يجعله النموذج الرئيسي غير البشري للمعيار الذهبي لتقييم إفراز الكبد الوبائي وتفاعلات حمض المخدرات.

7.2 بيجل الكلب الصفراء

محتوى الفسفوليبيد في بيجل الصفراء مرتفع نسبيًا ، مما يجعله مناسبًا لدراسة إفراز الصفراء والامتصاص المعتمد على الملح الصفراء للأدوية الدهنية. ومع ذلك ، فإن الاختلافات في تكوين حمض الصفراء بين بيغل والبشر تتطلب المعايرة من خلال المصفوفات الاصطناعية.

7.3 SD الفئران الصفراء

حجم جمع الصفراء من الفئران SD كبيرة نسبيا (~ 1 مل/الوقت) ، والذي يستخدم على نطاق واسع لدورة الدموية الكبدية ودراسات السمية الكبدية المخدرات. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن خط الأساس البيليروبين العالي قد يتداخل مع تحليل LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 الفأر الصفراء

يحتوي CD - 1 الماوس على حجم صغير من الصفراء (50 - 200 ميكرولتر لتر) ، مما يجعلها مناسبة لدراسة آليات نماذج تعديل الجينات (مثل مسار FXR/PXR) ، ولكن هناك حاجة إلى تقنيات القياس الكمي الدقيقة للتكيف.

7.5 C57BL/6 الماوس الصفراء

يتم استخدام الماوس C57BL/6 بشكل شائع في نماذج الأمراض الأيضية ، ويمكن أن تعكس التغييرات في تكوينها الصفراء الحالات المرضية ، مما يتطلب استخدام مصفوفة الصفراء الاصطناعية لمحاكاة علم الأمراض.

يجب دمج النماذج المذكورة أعلاه مع مصفوفة الصفراء الاصطناعية للتحكم في فروق الأنواع وتحسين قابلية المقارنة بين الأنواع المتقاطعة لطرق LC - MS/MS.

خاتمة

تلعب مصفوفة الصفراء الاصطناعية ، كأداة رئيسية لمحاكاة وظيفة الصفراء الطبيعية ، دورًا لا يمكن الاستغناء عنه في تطوير الأدوية الكبدية. من خلال توحيد التكوين الصفراء للأنواع المختلفة (مثل قرود Cynomolgus ، كلاب بيغل ، فئران SD ، CD - 1 الفئران ، C57BL/6 الفئران) ، تعالج مصفوفة الصفراء الاصطناعية بشكل فعال التحديات الأساسية مثل القيود الأخلاقية ، والاختلافات الفردية ، ومحاكاة الحالة الطبيعية بشكل فعال ، مما يعزز بشكل كبير من المساواة في مجال الأبحاث.

مع تطوير الطب الدقيق ، ستجمع مصفوفة الصفراء الاصطناعية مزيد من المكونات المحددة المرضية وتكنولوجيا الميكروفلويديك لمحاكاة البيئة المكروية للكبد والمرارة بشكل ديناميكي ، مما يوفر دعمًا أقوى لتطوير الأدوية المبتكر.

الكلمات الرئيسية:تحليل بيولوجي فارغ ، عينة المصفوفة البيولوجية ، تحليل Biomatrix ، الصفراء البشرية ، الصفراء الحيوانية ، عينة الصفراء ، الصفراء الاصطناعية ، صفراء محاكاة ، صفراء NHP ، Cynomolgus Monkey pile ، Rhesus Monkey Pile ، Beage Dog Pile ، Rat Pile ، Mouse Pile ، LC - MS/MS ، Mething Bioanalytical.

مرجع

لي تي ، تشيانغ جي. إشارات حمض الصفراء في مرض التمثيل الغذائي والعلاج الدوائي. Pharmacol Rev. 2014 Oct ؛ 66 (4): 948 - 83. doi: 10.1124/pr.113.008201. بميد: 25073467 ؛ PMCID: PMC4180336.