Афизни разтвори за изследване на метаболизма на siRNA in vitro

Афизни разтвори за изследване на метаболизма на siRNA in vitro

Лекарствата на нуклеиновата киселина, поради техните уникални технологични характеристики, се превърнаха в фокус на новото развитие на лекарствата през последните години. Лекарствата с нуклеинова киселина включват малки интерфериращи РНК (siRNA), антисенс олигонуклеотиди (ASO), микроРНК (miRNA), малка активираща РНК (SARNA), РНК на пратеник (мРНК), аптамери и антитяло - лекарствени конюгати (ADC), са форми на генна терапия. Сред тях лекарствата на siRNA, като гореща точка в изследванията и развитието на лекарства с нуклеинова киселина, се използват широко при разработването на нови лекарства поради високата им ефективност на заглушаване на ген, контролируеми странични ефекти и лесен синтез. Очаква се те да бъдат най -обещаващите лекарства за ново развитие на лекарството след лекарства с малки молекули и антитела.

1. 1. Механистичен поглед върху лекарственото действие на siRNA

Малката намеса на РНК (siRNA), наричана още заглушаваща РНК, къса интерферираща РНК или не - кодираща РНК, се състои от къси двойни - наведени РНК молекули, обикновено 21–25 базови двойки с дължина. След синтеза, siRNA навлиза в клетката чрез ендоцитоза. Фракция от siRNA избяга от лизозомно разграждане и влиза в цитоплазмата, където тя е включена в индуцирания от РНК - Индуциран заглушаващ комплекс (RISC). В рамките на RISC, siRNA се отменя на две единични нишки: Sense Strand и Antisense Strand. Странната верига бързо се разгражда в цитоплазмата, докато RISC, обвързан с антисенс веригата, се активира. След това комплексът селективно се свързва с целевата тРНК, улеснявайки разцепването му и последващото разграждане. В резултат на разграждането на мРНК, нивото на експресия на целевия ген е значително намалено, в крайна сметка води до заглушаване на ген и инхибиране на транслацията на протеин.

1. 2. Стратегия за изследване на метаболизма на лекарството siRNA

In vivo, лекарствата на siRNA се метаболизират предимно от нуклеази и екзонуклеази, присъстващи в плазмените и тъканите, а не от метаболитни ензими от фаза I и II в черния дроб. След структурните модификации, понастоящем предлаганите на пазара лекарства SiRNA показват намален метаболизъм в кръвта. Обикновено по -голямата част от лекарствата на siRNA бързо се поемат от черния дроб, с по -малка фракция, разпределена на други тъкани, където впоследствие се метаболизират от нуклеази в черния дроб или други тъкани. За изследвания на метаболизма in vivo на лекарства с siRNA, метаболитните продукти обикновено се идентифицират и количествено се анализират в плазмата, урината, изпражненията и целевите тъкани (като черния дроб или бъбреците) от животински модели.

Въпреки това, по време на ранните етапи на развитие на лекарствата, големият брой съединения, разширените експериментални срокове и високите разходи, свързани с in vivo проучвания, представляват значителни предизвикателства за големи - мащабни съединения и структурна оптимизация. В резултат на това изследванията на метаболизма in vitro са от особено значение по време на фазата на ранния скрининг на развитието на лекарствата SiRNA. Тези проучвания предлагат забележителни предимства, като висока пропускателна способност и по -кратки експериментални цикли, които могат значително да повишат ефективността на скрининга на лекарството siRNA.

Таблица 1: Изследователски системи за метаболизъм in vitro за лекарства на siRNA

1. 3. Iphase съответни продукти