Q: Giunsa nako pagpili sa mga mikrosom ug mga hepatocytes alang sa mga pagtuon sa metaboliko nga lig-on? Mahimo ba ako makapili usa niini aron matuman ang kinahanglanon?
A: Sa pagtuon sa metaboliko nga kalig-on, ang pagpili sa mga microsom sa atay o mga hepatocytes nagdepende sa mga metaboliko nga kabtangan sa mga compound nga gipili. Sa kinatibuk-an, gipalabi ang mga microsom sa atay, labi na kung ang mga molekula sa compound labi pa nga tubig - matunaw ug usa - Phase Metabolismo ang nag-unang metabolic nga agianan (labi na pinaagi sa CYP). Ang mga hepatocytes mahimong gamiton alang sa mga eksperimento kung adunay ebidensya sa duha - Phase Metabolismo ingon ang panguna nga agianan, ang mga nag-unang metaboliko nga grosas sa atay, ug metabolismo sa mga microsom sa atay dili dayag. Kasagaran, usa ka sistema sa metaboliko ang mahimong mapili aron matubag ang mga panginahanglan; Kung gitugot sa mga kahimtang sa tanan nga mga aspeto, sigurado nga labing maayo nga pagpili sa parehas nga mga sistema sa parehas nga oras.
Q: Ngano nga kinahanglan nga gamiton ang mga nag-unang mga hepatocytes alang sa enzyme induction assay?
A: CYP Enzyme - Nadasig nga Assay Kinahanglan nga Maggikan sa "Transkripsyon", "Pag-post" sa pag-usab sa protina "aron makakuha usa ka aktibo nga protina nga protina. Busa, ang sistema sa pagsulay kinahanglan nga mga selula sa atay, dili mga microsom sa atay o atay S9.
Q: Ngano nga kinahanglan nako nga mopili sa tulo nga mga tag-iya sa tag-iya sa donor nga tag-iya sa mga hepatocytes alang sa enzyme induction assay?
A: Sumala sa pasiuna sa mga panudlo alang sa mga interaksyon sa droga, labing menos tulo nga mga donor ang kinahanglan gamiton, ug ang pag-uswag sa sangputanan sa matag donor kinahanglan nga susihon nga gilain. Agi og dugang sa paghimo sa mga sangputanan sa estadistika, ang pagpili sa tulo nga mga nagdonar alang sa eksperimento labi ka hinungdanon alang sa pagtimbang-timbang sa inter - indibidwal nga kalainan. Kung ang resulta gikan sa labing menos usa ka donor molapas sa usa ka gitakda nga threshold, ang kandidato sa droga mahimo'g dili ma-indigay ug sundon - kinahanglan ang pagsusi.
Q: Ngano nga naka-focus lang sa cyp enzyme induction ug dili sa UGT enzyme induction?
A: Ang hinungdan sa pag-focus sa induction sa cypase mao nga ang mekanismo sa induction sa cypase nga mas klaro nga gitun-an. Sa ato pa, ang hinungdan sa dili pagpangayo sa pagtuon sa pag-indasyon sa ugtase mao nga ang mekanismo dili pa klaro; Bisan pa, wala kini gipasabut nga ang ugtase dili maaghat. Giingon usab sa mga panudlo nga wala'y standard nga sistema sa pag-klasipikasyon alang sa mga inducer o inhibitors sa mga transporters ug Phase II metabolismo sa metabolismo.
Q: Unsa ka kadugay ang mga nag-una nga nag-una nga mga hepatocytes nga mabuhi human sa resuscitation, ug kung unsa ka kadugay nga mapadayon ang mga hepatocytes nga wala masunud nga kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura pagkahuman sa pagpahiuyon sa kultura?
A: Ang mga pasteurized Primary nga mga hepatocytes sagad gigamit alang sa enzyme induction assays. Pagkahuman sa pag-ayo sa cell, ang mga selyula gisuspenso sa plate splinging medium, nabag-o sa angay nga konsentrasyon, ug kulto sa Collagen - adunay sapaw nga mga plato; Pagkahuman ang mga cell mahimong pasteurized sa sulod sa 4 ~ 6 nga oras. Pagkahuman sa mga selyula nga gilakip sa dingding, ang medium nga maintenance gipulihan ug gipadayon alang sa 18 h aron masiguro ang labing taas nga pagpahiuli sa kahimtang sa cell. Sunod, ang induction sa enzyme nga assay mahimong buhaton aron mahibal-an ang metaboliko nga kalihokan ug lebel sa induction sa MRNA. Gikan sa panan-aw sa tibuuk nga siklo, ang mga hepatocytes mahimong mapadayon alang sa 6 ~ 7 nga adlaw pagkahuman sa pagsunod sa bungbong. Sa paglabay sa panahon, ang Cell Wall Secherence State nagkagrabe, ug ang mga selyula pag-agi ug pag-suspenso.
Kung ang mga masunud nga hepatocytes dili kultura, gipamatud-an namon nga sila mapadayon sa usa ka maayong kahimtang sa sulod sa 4 ~ 6 nga oras. Wala pa kami nagdala sa pag-verify sa mas taas nga panahon.
Q: Ang mga hepatocytes mahimong magamit ingon nga suspension ug mga sunud-sunod nga mga selyula depende sa lainlaing media sa kultura nga gigamit?
A: Kadaghanan sa mga selyula gikan sa solidong mga tisyu ug mga organo napuno, apan dili tanan nga mga selyula nga gipuno kung kultura sa - vitro. Kung ang mga selyula bungbong - sunud-sunod o wala magdepende sa kahimtang sa mga selula sa ilang kaugalingon; Sa parehas nga oras, dingding - Ang mga Sinugdan nga Mga Sinugdan Kinahanglan nga Piho nga Medium nga Kultura ug Pipila ka Espesyal nga Pro - Rhamnogelinogen, Lamin Sa konklusyon, ang mga selula sa Sayo mahimong magamit ingon mga cells sa suspensyon, apan ang mga cell sa suspensyon dili kinahanglan nga magamit alang sa paggamit sa mga sunud-sunod nga paggamit.
Q: Unsa ang mga bentaha / disbentaha sa paggamit sa mga sunud nga mga bersikulo sa mga bersikulo sa Wall Spender Unsa man ang mga pamantayan sa desisyon?
A: Pagkahuman sa mga hepatocytes ang pag-inusara, mahimo silang kultura sa pagsuspinde o sa masaw nga paril. Ang kalihokan sa Cytochrome P450 nga enzyme gikan sa Spiness Cultured Pangulo nga mga hepatocytes mao ang labing nahiuyon sa kana sa - vivo alang sa una nga paglugsong sa oras. Busa, ang suspensyon nga mga hepatocytes sa kasagaran gigamit alang sa pagtuon sa metaboliko nga kalig-on o pagtuon sa profiling sa metabolite. Ang Panguna nga mga Hepatocytes nga Kultura sa Segree Severent Wall adunay igong oras aron mabawi gikan sa kadaot aron mapadayon ang mga kinaiya sa biological ug metaboliko nga kalihokan sa normal nga mga hepatocytes. Busa, sa kasagaran gigamit kini alang sa mga pagtuon sa enzyme induction, mga pagtuon sa cytotoxicity sa droga, metabolic nga kalig-on sa hinay nga pag-metabolize sa mga tambal o pagtuon sa produkto.
Sa pagkakaron, wala kami naghatag serbisyo sa pagpalit sa online nga pagpalit sa online. Ang mga produkto nga gidugang sa shopping cart pagkahuman sa pagrehistro ug pag-login alang lamang sa pakisayran. Kung kinahanglan nimo paliton ang among mga produkto, palihug ibilin ang imong kasayuran sa pagkontak pinaagi sa kontak sa US Channel, ug magkontak kami kanimo sa oras aron makompleto ang among mga serbisyo.
Q: Giunsa ang pag-- piho nga pagbugkos sa protina makaapekto sa mga resulta sa pagsulay?
A: Kung ang kandidato sa drug nagbugkos nga dili - piho nga mga protina sa mikrosomal, kini moresulta sa mga nausab nga kinetic parameter. Samtang nagdugang ang konsentrasyon sa protina, ang kantidad sa KM nagdugang, nga miresulta sa usa ka ubos nga gihunahuna nga clearance sa intrinsic. Ingon usab, ang pagbugkos sa drug kandidato sa mga protina sa mga mikrosomes mahimong moresulta sa daghang mga kalainan sa mga resulta gikan sa lainlaing mga laboratoryo ug lainlaing mga sistema.
Q: Ang girekomenda nga konsentrasyon sa atay nga protina sa pag-instrukto sa pahimangno sa Phase I o Phase II Metabolic Stability Kit mao ang pag-ayo sa wala pa kini madugangan sa sistema?
A: Dili kinahanglan nga matunaw ang mga hepatic microsome; Ang konsentrasyon sa mga microsom sa hepatic sa kit mao ang 20 mg / ml ug ang katapusang konsentrasyon sa mga hepatic microsomes sa sistema sa pagsulay.
Q: Unsa ang girekomenda nga cell density alang sa metabolic stability testing sa mga nag-unang hepatocytes? Ang pagkalkula ba sa clearance parehas sa alang sa mga microsom sa atay?
A: Ang girekomenda nga cell density alang sa nag-unang hepatocyte metabolic stability nga si Asay-0.5 hangtod 2 × 106 Ang mga cell / ml, ug ang mga kalkulasyon sa clearance ug ang pagproseso sa mga sangputanan sa hepatic microsomal metabolic stability area makanunayon.
Q: Unsa ang mga nag-unang sangkap sa imong PBS Buffer? Naglangkob kini sa KCL ug NACL?
A: Ang mga nag-unang sangkap sa among PBS Buffer mao ang K2Hop4 ug kh2PO4, ug gawasnon sa KCL ug NACL.
Q: Unsa ang katuyoan sa mga buffer sa phosphate? Ngano nga kinahanglan nimo si Phosphate?
A: Ang mga buffer sa Phosphate gipili alang sa ilang katuyoan sa pagsundog sa phostiological nga palibot, ug ang phosphate usa sa labing hinungdanon nga mga pares sa buffer alang sa pagpadayon sa likido sa lawas.
Q: Unsa ang naandan nga kahimtang alang sa enzyme - Nahiuyon nga Konsentrasyon sa Receptor? Aduna bay solusyon kung ang pagkalisud sa sistema nga pagasulayan dili maayo?
A: Ang enzyme induction assay kinahanglan nga ibutang sa 3 nga lainlaing mga konsentrasyon, ang lebel sa konsentrasyon kinahanglan nga tabunan ang usa ka epektibo nga konsentrasyon sa droga sa dugo sa mga tawo. Kung ang pag-usbaw sa tubigon nga yugto dili maayo, ang usa ka organikong solvent mahimong mapili ingon nga solvent, e.g. DMSO, apan ang kantidad sa organikong solvent nga gidugang sa sistema kinahanglan nga kontrolado.
Q: Sa metaboliko nga pagtuon sa metaboliko, kinahanglan nga gamiton ang duha nga mga sistema sa pagsulay, mga microsom sa atay ug panguna nga mga hepatocytes, alang sa pagsulay?
A: Ang mga microsom nga hepatic hapit sphherical membrane vesicle - sama sa mga istruktura nga giumol sa kaugalingon - fussial nga mga enzyulum sa HEPATOTION, E.g. Panguna nga mga hepatocytes (PHC) ang mga hepatocytes nga gikuptan dayon human sa pag-inusara gikan sa mga hayop sa hayop, nga labi ka labi nga pagpreserbar sa mga metaboliko nga lebel nga nahiuyon sa mga vivo. Sa pagtuon sa metaboliko nga kalig-on, dili kinahanglan nga hunahunaon ang gasto, ug ang duha nga mga sistema sa pagsulay mahimong mapili alang sa pagsulay sa parehas nga oras; O ang angay nga sistema sa pagsulay mahimong mapili sumala sa mga metabolic kabtangan sa compound, ug ang baruganan mao nga ang sistema adunay taas nga metaboliko nga rate nga gipili. Sa kinatibuk-an, ang mga microsom sa atay mao ang labing kaayo nga kapilian kung ang mga molekula sa compound labi pa nga tubig - matunaw ug usa - Phase Metabolics mao ang nag-unang metabolic nga agianan (labi na pinaagi sa CYP); Kung ang duha - Phase Metabolism mao ang panguna nga agianan, ang hydrolysis mao ang nag-unang metabolic nga agianan, dili - piho nga protina nga grorosomes, ug ang metabolismo dili madayag sa mga nag-unang mga hepatocytes.
Q: Gisusi ba ang konsentrasyon sa mga mikrosomes sa metabolic stability test? Unsa man ang epekto sa labi ka taas o ubos kaayo?
A: Sa metabolic stability test, ang konsentrasyon sa protina makaapekto usab sa metabolic rate, kasagaran pilia ang konsentrasyon sa protina nga 0.1 Mg Labing taas nga konsentrasyon sa microsomal protina ang modala ngadto sa dili - piho nga pagbugkos sa tambal sa protina sa mikrosomal; Samtang ubos kaayo ang usa ka konsentrasyon sa microsomal protina mahimong mosangput sa dili hinungdan nga metabolismo sa tambal.