درمان نوآورانه CGT - لنتی ویروس - ماشین بسته بندی - سلولهای ایمنی T

درمان نوآورانه CGT - لنتی ویروس - ماشین بسته بندی - سلولهای ایمنی T

سلولهای ایمنی درمانی یک درمان نوآورانه سرطان است که سیستم ایمنی بدن بدن را برای هدف قرار دادن و از بین بردن سلولهای سرطانی تقویت می کند. اشکال کلیدی شامل سیتوکین - سلولهای قاتل ناشی از آن ، T - سلول درمانی و سلول درمانی T Car - T است. درمان CAR - T شامل برنامه ریزی مجدد سلولهای T برای بیان گیرنده های آنتی ژن کیمریک (CAR) است که به طور خاص سلولهای تومور را هدف قرار می دهند و موفقیت قابل توجهی در سرطانهای خون شناسی مانند لوسمی و لنفوم نشان می دهند.

واژه‌های کلیدی: ماشین - T ، لنتی ویروسی ، بردار عدسی ، لنتی ویروس ردیاب

تهیه اتومبیل - سلول درمانی T

به طور کلی ، مراحل کلیدی برای تهیه سلولهای T - T به شرح زیر است:

منبع شکل: دانا - موسسه سرطان Farber - CAR T - آزمایشات بالینی سلول کمک می کند تا بیماران مبتلا به میلوما به سلامتی بازگردند

1. 1. مقدار (انزوا سلول T -)

اولین قدم برای تهیه سلولهای CAR - T جداسازی سلول های T - از گلبول های سفید در خون محیطی بیمار است. تکنیک هایی مانند جداسازی مهره ایمونومغناطیسی یا فلوسیتومتری جریان به طور معمول برای استخراج سلول های CD3+- غنی T - از خون استفاده می شود. برای اطمینان از خلوص سلولی ، فرایند مرتب سازی باید بسیار دقیق باشد ، و اطمینان حاصل می کند که تعداد کافی از سلولهای T - با کیفیت بالا به دست می آیند.

2. 2. تحریک (T - فعال سازی سلول)

سلولهای T - استخراج شده در شرایط آزمایشگاهی فعال می شوند ، معمولاً با استفاده ازCD3 /CD28 T - کیت فعال سازی /گسترش سلول هابشر سلولهای T فعال شده وارد یک حالت فعال می شوند و آنها را برای ترانسفکشن ژن آماده می کنند. از طریق این فرآیند ، عملکرد سلول T افزایش یافته و به اصلاح و تقویت ژنتیکی بعدی کمک می کند.

3. 3.Transfection (ویرایش ژن)

سلولهای T فعال شده تحت انتقال ژن برای بیان یک گیرنده آنتی ژن کیمریک (CAR) قرار می گیرند. این فرآیند به طور معمول استفاده می کندبردار عدسیبرای معرفی ژن های اتومبیل به سلولهای T. لنتی ویروس یک ابزار انتقال ژن مؤثر است ، با این مزیت که به طور پایدار ژن هدف (مانند ژن CAR) را در ژنوم سلول ادغام می کند. لنتی ویروس با آلوده کردن سلولهای T و انتقال ژن CAR به DNA سلول T ، سلولهای T را قادر می سازد تا اتومبیل های طولانی را بیان کنند. ژن CAR شامل یک قطعه متغیر زنجیره ای (SCFV) از یک آنتی بادی است که سلولهای T را قادر می سازد آنتی ژن های خاص را روی سطح سلولهای تومور تشخیص دهند و با فعال کردن مناطق سیگنالینگ سلولهای T ، پاسخ ایمنی را آغاز کنند. همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است. ترانسفکشن لنتی ویروسی دارای ویژگی های راندمان و پایداری بالا است ، به طوری که ژن CAR را می توان برای مدت طولانی در سلولهای T بیان کرد.

منبع شکل: ماشین سنگاپور - سلول درمانی T

4. 4. تقویت (تکثیر سلولی)

پس از ترانسفکشن ، سلولهای CAR - T وارد مرحله تقویت می شوند ، جایی که فاکتورهای رشد مانندIL - 2برای ترویج تکثیر سلولی اضافه می شوند. هدف از این فرایند اطمینان از تعداد کافی سلولهای CAR - T برای تزریق نهایی به بیمار است. فرآیند تقویت باید در شرایط استریل انجام شود تا کیفیت و کمیت سلول تضمین شود.

5. 5. کنترل کیفیت (QC)
6. قبل از مجدداً به بیمار ، کنترل کیفیت در طی فرآیند آماده سازی بسیار مهم است. سلولهای T آماده شده - T تحت آزمایش دقیق قرار می گیرنداز خلوص ، فعالیت ، بهره وری ترانسفکشن و رعایت استانداردهای درمانی آنها اطمینان حاصل کنیدبشر علاوه بر این ، آزمایش آلودگی سلول یا عوارض جانبی برای اطمینان از ایمنی و اثربخشی درمانی سلول ها پس از مجدداً به بیمار ضروری است.

Iاهمیت ترانسفکشن لنتی ویروس در سلولهای ایمنی

فناوری ترانسفکشن لنتی ویروسی در درمان سلولهای ایمنی به ویژه برای ویرایش ژن و مهندسی سلول بسیار مهم است. بردارهای لنتی ویروسی ، حاصل از HIV - 1 اصلاح شده ، به دلیل توانایی آنها در ادغام ژن ها در ژنوم میزبان ، از بیان پایدار و طولانی - مدت زمان استفاده می شود. آنها می توانند سلولهای تقسیم کننده و غیر تقسیم کننده را آلوده کنند و ایمنی آنها با اصلاح ژنهای کلیدی برای جلوگیری از تکثیر بهبود یافته است. این بردارها اکنون معمولاً در ژن درمانی ، ویرایش ژن و تحقیقات زیست شناسی سلولی برای بهره وری و دوام در زایمان ژن مورد استفاده قرار می گیرند.

منبع شکل: obiosh.com/product/ نمودار شماتیک بسته بندی لنتی ویروس و فرآیند ترانسفکشن لنتی ویروس در سلول های 293T

1. انتقال ژن کارآمد

وکتور لنتی ویروسی می تواند به طور مؤثر ژنهای هدف مانند ژن CAR را به سلولهای ایمنی منتقل کند و این ژن ها را به طور پایدار در ژنوم سلولی ادغام کند و اطمینان حاصل کند که ژن CAR به طور مداوم در طول تقسیم سلولی و تکثیر بیان می شود. این قابلیت انتقال بالا - بهره وری برای موفقیت ایمونوتراپی اساسی است.

2. ایمنی زایی 

در مقایسه با سایر بردارهای ویروسی ، لنتی ویروس دارای ایمنی کمتری هستند. در نتیجه ، هنگامی که از لنتی ویروس ها برای انتقال سلولهای ایمنی استفاده می شود ، سیستم ایمنی بدن یک پاسخ ایمنی نسبتاً ضعیف تر به ویروس ایجاد می کند. این به به حداقل رساندن عوارض جانبی ، به ویژه در بقای طولانی - مدت زمان سلولها پس از تزریق کمک می کند ، در نتیجه مانع از رد ایمنی بیش از حد می شود.

3. سازگاری با سلولهای ایمنی

وکتور لنتی ویروسی قادر به انتقال کارآمد انواع مختلف سلولهای ایمنی است ،به خصوص سلولهای T و سلولهای NKبشر از طریق انتقال لنتی ویروسی ، سلولهای ایمنی بدن می توانند تومور را به دست آورند - توانایی های تشخیص خاص ، از این طریق ظرفیت آنها برای هدف قرار دادن و از بین بردن سلول های تومور افزایش می یابد.

4. پیش بینی سلولهای مؤثر انتقال یافته در تشخیص سلول هدف 

در ایمونوتراپی ،سلولهای مؤثر انتقال یافتهبه سلولهای ایمنی مراجعه کنید که پس از انتقال ، خودرو را بیان کرده و فعالیت ضد تومور را اعمال کنید. بردارهای لنتی ویروسی دقیقاً می توانند ژن CAR را در این سلولهای مؤثر قرار دهند و آنها را قادر می سازد سلول های توموری را تشخیص و هدف قرار دهند.سلولهای هدفسلولهای توموری هستند که توسط این سلولهای ایمنی شناسایی و از بین می روند. از طریق انتقال لنتی ویروسی ، سلولهای ایمنی می توانند ویژگی آنها را در شناخت و کشتن سلولهای تومور تقویت کنند و از این طریق اثربخشی درمانی را بهبود بخشند.

در این زمینه ، Iphase ، یک رهبر در معرفهای تحقیقاتی آزمایشگاهی ، یک کیت بسته بندی لنتی ویروس و معرف غلظت لنتی ویروس را برای ساده کردن پیچیدگی انتقال برای مشتریان ایمونوتراپی و بهبود میزان موفقیت ترانسفکشن ژن پایدار تهیه کرده است. این محصولات یک راه حل یکپارچه برای مشتریان ارائه می دهند.

لنتی ویروسPغده

کیت بسته بندی لنتی ویروس iphaseشامل تمام معرفهای اساسی مورد نیاز برایبسته بندی لنتی ویروس، به طور قابل توجهی روند آزمایش و صرفه جویی در وقت و تلاش را ساده می کند. این کیت شامل:

• مخلوط پلاسمید بسته بندی لنتی ویروس
• معرف
• پلاسمید EGFP
• معرف غلظت لنتی ویروس iphase

این کیت واقعاً آزمایش را ساده تر می کند! بدون نیاز به تهیه معرف پیچیده ، بسته بندی لنتی ویروس می تواند به سادگی با پیروی از دستورالعمل های موجود ، به طور مؤثر تکمیل شود.مزایای منحصر به فرد کیت شامل زمان بسته بندی کوتاه ، تیتر ویروسی بالا و عملکرد آسان است و آن را برای مبتدیان در بسته بندی لنتی ویروس ایده آل می کند. هر مجموعه ای از معرفها برای اطمینان از نتایج دقیق ، قابل اعتماد و قابل تکرار ، تحت کنترل کیفیت دقیق قرار می گیرند ، به طور قابل توجهی بازده ترانسفکشن و پایداری بردارهای ویروسی را بهبود می بخشند و از این طریق پشتیبانی فنی قدرتمندی را برای تهیه سلول های ایمنی فراهم می کنند.

علاوه بر این ، برای کمک به مشتریان در صرفه جویی در هزینه ها ، Iphase همچنین معرف غلظت لنتی ویروس را توسعه داده و تولید کرده و یک راه حل غلظت سریع و ساده را ارائه می دهد.با مخلوط کردن مایع رویی لنتی ویروس با معرف غلظت ، و به دنبال آن یک جوجه کشی مختصر و سانتریفیوژ با استفاده از یک سانتریفیوژ استاندارد ، ذرات عدسی می توانند به سرعت متمرکز شوند. این فرآیند نیازی به یک اولتراسانتریفیوژ ندارد و آن را به یک گزینه مناسب و هزینه - گزینه ای مؤثر برای اکثر کاربران آزمایشگاهی تبدیل می کند.

به طور خلاصه ، معرف غلظت لنتی ویروس iphase نه تنها به طور قابل توجهی راندمان ترانسفکشن را بهبود می بخشد بلکه پشتیبانی وکتور ویروسی با کیفیت بالا را برای تهیه سلول های ایمنی فراهم می کند. این یک محصول اساسی برای آزمایش های روتین ، تحقیقات بالینی و سایر زمینه های کاربردی است.

به طور خلاصه ، ایمونوتراپی ، به ویژه CAR - T CELL و CAR - NK Cell Cell ، جهت جدیدی در درمان مدرن سرطان را نشان می دهد. از طریق فرآیندهای دقیق مانند مرتب سازی سلول ، فعال سازی ، انتقال ، انبساط و کنترل کیفیت ، دانشمندان می توانند محصولات سلول ایمنی کارآمد و ایمن را برای بیماران تهیه کنند و امکان درمان هدفمند سرطان را فراهم کنند.انتقال عدسی ، به عنوان یک فناوری اصلی ، به دلیل راندمان و ثبات بالا ، نقش مهمی در تهیه سلولهای CAR - T و CAR - NK دارد.ایمونوتراپی با پیشرفت های مداوم تکنولوژیکی ، می تواند گزینه های درمانی نوآورانه را برای بیماران بیشتر ارائه دهد و ارزش بالینی بیشتری را ارائه دهد. در آینده انتظار می رود ایمونوتراپی امید درمانی انقلابی را برای بیماران مبتلا به سرطان بیشتر به ارمغان بیاورد.

برای پاسخگویی به نیازهای انتقال ژن ، بیان و تحقیقات بیماری ، Iphase کیت های بسته بندی لنتی ویروس ، معرفهای غلظت لنتی ویروس و لنتی ویروس های ردیاب را ارائه می دهد. این لنتی ویروس های ردیاب با پروتئین فلورسنت سبز (GFP) ، پروتئین فلورسنت قرمز Mcherry و لوسیفراز بسته بندی شده اند و ردیابی آسان سلولهای هدف را هم در شرایط آزمایشگاهی و هم در داخل بدن امکان پذیر می کنند.

علاوه بر این ، Iphase همچنین می تواند دو لنتی ویروس ردیاب بسته بندی شده را ارائه دهد: GFP & Luciferase و Mcherry & Luciferase. این ردیاب ها می توانند بر اساس نیازهای آزمایشی ، جریان کار و افزایش کارآیی برای ردیابی واقعی - زمان و نظارت بر سلولهای هدف ، انتخاب یا ترکیب شوند.

ایفازIدرمانRپرهیزگارPغده

علاوه بر لنتی ویروس - محصولات مرتبط با استفاده از روشهای درمانی CAR - T یا CAR - NK ، Iphase ، به عنوان یک رهبر در معرفهای تحقیقاتی آزمایشگاهی ، همچنین در حمایت از نوآوری در CGT (سلول و ژن درمانی) و سایر زمینه ها سهم بسزایی داشته است. iphase لکوسیت ها و PBMC (سلولهای تک هسته ای خون محیطی) که از طریق لکوفریس جدا شده و به همراه کیت های مختلف جداسازی سلولهای ایمنی ایجاد و تولید کرده اند ، تولید و تولید کرده است.، برای حمایت از پیشرفت سریع ایمونوتراپی.

محصولات iphase مزایای زیر را ارائه می دهند ، وگواهی تجزیه و تحلیل (COA)تأیید شده توسط iphase برای هر دسته در دسترس است.

امنیت 

محصولات iphase از اهدا کنندگان سالم/حیوانات که تحت غربالگری کامل قرار گرفته اند ، با نتایج منفی برای آزمایش ویروسی (HIV - 1/2 ، HBV ، HCV ، سفلیس) تهیه می شوند.

رعایت  

Iphase فرم های رضایت آگاهانه امضا شده توسط اهدا کنندگان را با تأیید منبع واضح و قابل ردیابی ارائه می دهد.

حرفه ای بودن

محصولات ارائه شده توسط iphase ، که از طریق لکوفریس به دست می آیند ، توسط متخصصان آموزش دیده اداره می شوند. هر دسته با یک COA مربوطه همراه است و محصولات برای اطمینان از ایمنی ، تحویل سریع و تضمین کیفیت تحت یک زنجیره سرد سخت حمل می شوند.

خدمات مشتری

Iphase ارائه می دهد - کیفیت بالا پس از - خدمات فروش ، اطمینان از یک تجربه صاف و بدون وقفه در طول فرآیند آزمایشی.