صفراوی انسانی و حیوانات از ماتریس بیولوژیکی خالی برای توسعه روش bioanalytical و اعتبار روش bioanalytical

1 محصول iphase

2 بیوماتریکس خالی

انواع مختلفماتریس بیولوژیکی، از جمله خون کامل خون ، سرم ، پلاسما ، صفرا، شیر ، ادرار ، مدفوع ، محتویات روده ، اندام احشایی ، طنز زجاجیه ، طنز آبی ، مایع مغزی نخاعی و غیره ، که از افراد سالم یا حیوانات آزمایشی سالم جمع آوری شده است ، به طور جمعی به عنوان ماتریس بیولوژیکی خالی گفته می شود.

3 ضرورت استفاده از ماتریس های بیولوژیکی خالی در مطالعات بالینی

In تحقیقات بالینی دارویی، ماتریس بیولوژیکی خالی سنگ بنای ایجاد و اعتبار سنجی استروشهای تجزیه و تحلیل بیولوژیکیبشر محققان با استفاده از ماتریس خالی از افراد سالم یا حیوانات آزمایشی ، می توانند استانداردهای کالیبراسیون و نمونه های کنترل کیفیت را به طور دقیق تهیه کنند ، ویژگی ، حساسیت ، دقت و اثرات ماتریس روشهای تحلیلی را ارزیابی کرده و از قابلیت اطمینان نتایج اندازه گیری غلظت دارو اطمینان حاصل کنند.

4 اعتبار سنجی روش بیولوژیکی و تأسیس و کاربرد ماتریس بیولوژیکی خالی

همانطور که توسط دستورالعمل های FDA/EMA مورد نیاز است ، در تأسیس و اعتبارسنجی روشهای تجزیه و تحلیل ماتریس بیولوژیکی ، برای اطمینان از صحت و قابلیت اطمینان روش تجزیه و تحلیل باید از ماتریس های بیولوژیکی خالی استفاده شود. به خصوص در تجزیه و تحلیل LC - MS/MS ، تفاوت در اجزای ماتریس از منابع مختلف ممکن است به طور قابل توجهی بر راندمان یونیزاسیون تأثیر بگذارد. ماتریس خالی عمدتاً برای تهیه استانداردهای کالیبراسیون ، تهیه نمونه های کنترل کیفیت برای بررسی ویژگی ، انتخاب ، دقت ، دقت ، اثرات ماتریس ، میزان بازیابی ، ثبات ، خطی رقت ، اثرات تداخل و غیره از روشهای تحلیلی استفاده می شود. انتخاب و اثر ماتریس روش تشخیص نیاز به نیازهای بالاتری برای ماتریس خالی دارد.

5 سناریو کاربرد ماتریس خالی صفرا در توسعه دارو

ماتریس صفراوی مصنوعی (ماتریس صفراوی شبیه سازی شده)یک راه حل مصنوعی است که اجزای صفراوی طبیعی را شبیه سازی می کند و برای متابولیسم دارو ، سم شناسی و تحقیقات تجزیه و تحلیل بیولوژیکی استفاده می شود.ماتریس خالی صفرادارای ارزش کاربرد مهمی در سناریوهای توسعه داروهای زیر است: مطالعات فارماکوکینتیک (PK) داروهای سیستم کبدی ، جذب و مطالعات متابولیسم اولی از داروهای خوراکی ، مطالعات تعامل اسیدهای صفراوی دارویی ، ارزیابی کبدی و مطالعات پله های بیلی و توسعه روشهای تجزیه و تحلیل بیولوژیکی (LC - MS/MS).

6 داروی سیستم کبدی

در تهیه داروهای مربوط به سیستم کبدی ، ماتریس خالی صفرا نقش غیر قابل تعویض را به عنوان یک سیستم شبیه سازی در شرایط آزمایشگاهی استاندارد در فارماکوکینتیک (PK) ، سمی ، سمی و تجزیه و تحلیل بیولوژیکی ایفا می کند.

6.1 ویژگی های دفع صفرا را ارزیابی کنید

تحقیقات در مورد گردش خون کبدی: صفرا یکی از مسیرهای مهم برای دفع داروها و متابولیت های آنها است. با استفاده از ماتریس صفراوی مصنوعی ، تغییرات غلظت داروها در صفرا را می توان شبیه سازی کرد تا ارزیابی کند که آیا آنها از طریق گردش روده کبدی مجدداً جذب می شوند.

تعیین میزان میزان ترخیص صفرا: برای داروهایی که به طور فعال از طریق صفرا (مانند استاتین ها و آنتی بیوتیک های خاص) دفع می شوند ، صفرا مصنوعی (صفراوی شبیه سازی شده) می تواند به کمیت راندمان ترخیص کالا از گمرک و بهینه سازی رژیم دوز کمک کند.

6.2 تأثیر اسیدهای صفراوی بر جذب دارو را مطالعه کنید

اثر حلالیت: اسیدهای صفراوی می توانند باعث انحلال و جذب روده داروهای لیپوفیلی مانند ویتامین D. صفراوی مصنوعی شوند که می توانند ترکیبات مختلف اسیدهای صفراوی را شبیه سازی کرده و تأثیر آنها را بر فراه زیستی دارویی ارزیابی کنند.

فعل و انفعالات اسیدهای صفراوی دارویی: برخی از داروها (مانند لیراگلوتید) ممکن است با حمل و نقل اسید صفراوی (مانند BSEP ، MRP2) رقابت کنند و از صفرا مصنوعی می توان برای مطالعه چنین تعاملی برای جلوگیری از خطرات احتمالی صفراوی استفاده کرد.

6.3 ارزیابی ریسک از سمیت کبدی و کلستاز

مدل کلستاز ناشی از دارو: صفرا مصنوعی می تواند شرایط پاتولوژیک مانند انسداد مجرای صفراوی و هایپربیلیروبینمی را شبیه سازی کند و برای تشخیص اینکه آیا داروها با جریان صفراوی یا آسیب به سلول های مجرای صفراوی آسیب می رسانند ، استفاده می شود.

تجزیه و تحلیل نشانگرهای زیستی: با افزودن اجزای خاص مانند بیلی روبین ، اسیدهای صفراوی و عوامل التهابی ، تأثیر داروها بر روی اجزای صفراوی قابل ارزیابی است و می توان ایمنی بالینی را پیش بینی کرد.

6.4 مزایای اخلاقی و عملی جایگزینی صفراوی طبیعی

پرداختن به مسئله کمبود نمونه: صفرا طبیعی باید از طریق روشهای تهاجمی مانند کاتتریزاسیون مجرای صفراوی بدست آید ، در حالی که صفرا مصنوعی می تواند بی نهایت برای جلوگیری از محدودیت های اخلاقی آماده شود.

قوام دسته ای: ترکیب ماتریس مصنوعی (ماتریس شبیه سازی شده) قابل کنترل است و تأثیر تفاوتهای فردی در صفرا طبیعی بر نتایج تجربی را کاهش می دهد.

6.5 از توسعه روشهای تجزیه و تحلیل بیولوژیکی LC - MS/MS پشتیبانی کنید

تصحیح اثر ماتریس: ترکیب پیچیده صفراوی طبیعی (نمک های صفراوی بالا ، فسفولیپیدها ، رنگدانه ها) به راحتی می توانند منجر به سرکوب یون یا تقویت در تجزیه و تحلیل LC - MS/MS شوند. ماتریس صفراوی مصنوعی (ماتریس صفراوی شبیه سازی شده) می تواند زمینه ای پایدار را ارائه دهد ، حساسیت و دقت روش را بهینه سازی کند.

7 تحقیق گونه های متقابل

ترکیب صفرا در بین حیوانات مختلف (موش ، سگ ، میمون) بسیار متفاوت است و صفرا مصنوعی می تواند تفاوت های گونه ها را استاندارد کند و قابلیت ترجمه داده های بالینی را بهبود بخشد.

7.1 صفرا میمون Cynomolgus (صفراوی NHP)

صفراوی میمون سینومولگوس از نظر ترکیب (مانند مشخصات اسید صفراوی) و بیان حمل و نقل مواد مخدر (مانند BSEP ، MRP2) بسیار شبیه به انسان است ، و آن را به عنوان مدل اولیه غیر انسانی برای ارزیابی دفع صفراوی کبدی و تعامل اسید صفراوی دارویی تبدیل می کند.

7.2 صفرا

میزان فسفولیپید در صفرا بیگل نسبتاً زیاد است و این امر را برای مطالعه دفع صفرا و جذب وابسته به نمک صفراوی داروهای لیپوفیلی مناسب می کند. با این حال ، تفاوت در ترکیب اسید صفراوی بین بیگل و انسان نیاز به کالیبراسیون از طریق ماتریس های مصنوعی دارد.

7.3 صفراوی موش صحرایی

حجم جمع آوری صفرا از موش SD نسبتاً بزرگ است (1 میلی لیتر در زمان) ، که به طور گسترده برای گردش روده کبدی و مطالعات کبدی دارویی استفاده می شود. با این حال ، لازم به ذکر است که پایه بیلی روبین بالا ممکن است در تجزیه و تحلیل LC - MS/MS تداخل داشته باشد.

7.4 ICR/CD - 1 صفراوی موش

CD - 1 موش دارای حجم صفراوی کوچک (50 - 200 میکروگرم لیتر) است که آنها را برای مطالعه مکانیسم های مدل های اصلاح ژن (مانند مسیر FXR/PXR) مناسب می کند ، اما تکنیک های کمیت میکرو برای سازگاری مورد نیاز است.

7.5 C57BL/6 صفراوی موش

موش C57BL/6 معمولاً در مدل های بیماری متابولیک مورد استفاده قرار می گیرد و تغییر در ترکیب صفراوی آنها می تواند شرایط پاتولوژیک را منعکس کند و نیاز به استفاده از ماتریس صفراوی مصنوعی برای شبیه سازی آسیب شناسی دارد.

برای کنترل تفاوت گونه ها و بهینه سازی مقایسه گونه های متقابل روشهای LC - MS/MS ، مدل های فوق باید با ماتریس صفراوی مصنوعی ترکیب شوند.

پایان

ماتریس صفراوی مصنوعی ، به عنوان ابزاری اصلی برای شبیه سازی عملکرد صفراوی طبیعی ، نقش غیر قابل تعویض در توسعه داروهای کبدی دارد. با استاندارد سازی ترکیب صفراوی گونه های مختلف (مانند میمون های سینومولگوس ، سگهای بیگل ، موشهای صحرایی SD ، موشهای صحرایی CD - 1 ، موشهای صحرایی C57BL/6) ، ماتریس صفراوی مصنوعی به طور مؤثر به چالش های اصلی مانند محدودیت های اخلاقی ، تفاوت های فردی و شبیه سازی وضعیت آسیب شناختی نمونه های طبیعی می پردازد ، به طور قابل توجهی باعث افزایش ارزش تحقیق و ترجمه می شود.

با توسعه داروهای دقیق ، ماتریس صفراوی مصنوعی بیشتر اجزای خاص پاتولوژیک و فناوری میکروسیالی را برای شبیه سازی پویا ریز محیط زیست کبد و کیسه صفرا ترکیب می کند و پشتیبانی قوی تری برای توسعه داروهای نوآورانه ارائه می دهد.

کلمات کلیدی:تجزیه و تحلیل بیولوژیکی خالی ، نمونه ماتریس بیولوژیکی ، تجزیه و تحلیل بیوماتریکس ، صفراوی انسانی ، صفراوی حیوانات ، نمونه صفراوی ، صفرا مصنوعی ، صفراوی شبیه سازی شده ، صفراوی NHP ، سینومولگوس میمون میمون ، صفراوی میمون ، روسوس ، صفراوی سگ بیلی ، صفراوی موش ، بیلی موش ، LC - MS/MS ، Bioanalyticalticalticaltical Thetheration ، Bioanalytricalticalticalticalticalticalticte Tedication ، Bioanalyticalticaltical Thetheration.

مرجع

لی T ، Chiang Jy. سیگنالینگ اسید صفراوی در بیماری متابولیک و دارو درمانی. فارماکول Rev. 2014 اکتبر ؛ 66 (4): 948 - 83. doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467 ؛ PMCID: PMC4180336.