IPhaas -liuokset siRNA -lääkkeelle in vitro -metabolian tutkimus

IPhaas -liuokset siRNA -lääkkeelle in vitro -metabolian tutkimus

Nukleiinihapposääkkeistä on viime vuosina tullut ainutlaatuisten teknologisten ominaisuuksiensa vuoksi uusien lääkkeiden kehityksen painopiste. Nukleiinihapposääkkeitä ovat pienet häiritsevät RNA (siRNA), antisense -oligonukleotidit (ASO), mikroRNA (miRNA), pieni aktivoiva RNA (SARNA), lähettiläs RNA (mRNA), aptameerit ja vasta -aine - lääkekonjugaatit (ADC), ovat geeniterapian muotoja. Näistä siRNA -lääkkeitä, jotka ovat nukleiinihappopuhelututkimuksen ja kehityksen hotspotia, on käytetty laajasti uudessa lääkekehityksessä niiden korkean geenin vaimennustehokkuuden, hallittavien sivuvaikutusten ja helpon synteesin vuoksi. Niiden odotetaan olevan lupaavimpia lääkkeitä uuden lääkkeen kehitykselle pienten molekyylin ja vasta -ainelääkkeiden jälkeen.

1. 1. Mekaaniset näkemykset siRNA -lääkkeen vaikutuksesta

Pieni häiritsevä RNA (siRNA), jota kutsutaan myös äänenvaimentimeksi, lyhyeksi häiritseväksi RNA: ksi tai ei -- koodaavaksi RNA: sta, koostuu lyhyestä kaksinkertaisesta - juostetusta RNA -molekyylistä, jotka ovat tyypillisesti 21–25 emäsparia. Synteesin jälkeen siRNA tulee soluun endosytoosin kautta. Murto siRNA: sta pakenee lysosomaalisen hajoamisen ja menee sytoplasmaan, missä se sisällytetään RNA: n indusoituun vaimennuskomplekseen (RISC). RISC: n sisällä siRNA rentoutuu kahteen yksittäiseen säikeeseen: Sense -juoste ja antisense -juoste. Sense -juoste hajoaa nopeasti sytoplasmassa, kun taas antisense -juosteen sitoutunut RISC on aktivoitu. Sitten kompleksi sitoutuu selektiivisesti kohteen mRNA: hon helpottaen sen pilkkoutumista ja sitä seuraavaa hajoamista. MRNA: n hajoamisen seurauksena kohdegeenin ekspressiotaso on merkittävästi vähentynyt, mikä johtaa lopulta geenien vaimennukseen ja proteiinin translaation estämiseen.

1. 2. siRNA -lääkkeen aineenvaihdunnan tutkimusstrategia

In vivo siRNA -lääkkeet metaboloivat pääasiassa plasmassa ja kudoksissa esiintyviä nukleaaseita ja eksonukleaaseja kuin vaiheen I ja II metabolisia entsyymejä maksassa. Rakenteellisten modifikaatioiden jälkeen tällä hetkellä markkinoiduilla siRNA -lääkkeillä on vähentynyt aineenvaihdunta verenkiertoon. Tyypillisesti maksa ottaa suurimman osan siRNA -lääkkeistä nopeasti, ja pienempi fraktio jakautuu muihin kudoksiin, joissa nukleaasit metaboloivat niitä myöhemmin maksassa tai muissa kudoksissa. SIRNA -lääkkeiden aineenvaihduntatutkimuksissa aineenvaihduntatuotteet tunnistetaan tyypillisesti ja analysoidaan kvantitatiivisesti plasmassa, virtsassa, ulosteissa ja kohdekudoksissa (kuten maksassa tai munuaisissa) eläinmalleista.

Lääkkeen kehityksen varhaisessa vaiheessa kuitenkin suuri määrä yhdisteitä, pidennettyjä kokeellisia aikatauluja ja korkeita kustannuksia, jotka liittyvät in vivo -tutkimuksiin, aiheuttavat kuitenkin merkittäviä haasteita suurille - mittakaavan yhdisteiden seulontaan ja rakenteelliseen optimointiin. Seurauksena on, että in vitro -metaboliatutkimukset ovat erityisen tärkeitä siRNA -lääkkeen kehityksen varhaisessa seulontavaiheessa. Nämä tutkimukset tarjoavat merkittäviä etuja, kuten korkeat läpäisy- ja lyhyemmät kokeelliset syklit, jotka voivat merkittävästi parantaa siRNA -lääkkeiden seulonnan tehokkuutta.

Taulukko 1: In vitro -metabolian tutkimusjärjestelmät siRNA -lääkkeille

1. 3. Iphase -asiaankuuluvat tuotteet