Հեպատոցիտներ թմրամիջոցների մետաբոլիզմի եւ Sirna Drug Delivery. Մոդելի համակարգերի գնահատումը տեսակների գնահատման մեջ

Նշում. Կասեցման հեպատոցիտները պետք է օգտագործվեն հալեցման միջին եւ ինկուբացիոն միջավայրով. Pot նջելի հեպատոցիտները պետք է օգտագործվեն հալեցման միջով, Լողացող միջոց, սպասարկում միջին եւ կոլագենի պատված ափսե: CYP- ի ինդուկցիան պահանջում է նաեւ MRNA ինդուկցիայի փորձարկման հավաքածու:

Հեպատոցիտներ

ՀեպատոցիտներԼյարդի առաջնային ֆունկցիոնալ բջիջներն են, կենտրոնական դեր են խաղում նյութափոխանակության, դետոքսիզացիայի, լեղու արտադրության եւ սպիտակուցների սինթեզի մեջ: Դրանք ձեւավորում են լյարդի գործառույթի կառուցվածքային եւ կենսաքիմիական հիմքը, հանդես գալով որպես հիմնական միջնորդներ `տարբեր էնդոգեն եւ էկզոգեն միացությունների փոխարկման մեջ, ավելի քիչ վնասակար նյութերի եւ դյուրացնում են դեղերի եւ տոքսինների նյութափոխանակությունը: Քիմիական նյութերը վերամշակելու համար հեպատոցիտների այս ներքին ունակությունը նրանց անփոխարինելի է դարձրել ինչպես կլինիկական, այնպես էլ հետազոտական ​​պարամետրերում, մասնավորապես թմրամիջոցների նյութափոխանակության եւ լյարդի թունավորության մեջ ներգրավված ուղիները ուսումնասիրելիս:

Առաջնային հեպատոցիտներ

Առաջնային հեպատոցիտները վերաբերում են այն բջիջներին, որոնք թարմ մեկուսացված են լյարդի հյուսվածքից. Անկախ նրանից, թե մարդկային կամ կենդանին `առանց երկարաձգված Vitro Propation- ի: Քանի որ այս բջիջները պահպանում են լյարդի բնորոշ ֆիզիկական գործունեության եւ ֆիզիոլոգիական գործառույթների մեծ մասը, դրանք հաճախ համարվում են լյարդի ուսումնասիրության ուսումնասիրության ոսկու ստանդարտը: Հետազոտության մեջ դրանց օգտագործումը առանցքային է հասկանալու ինչպես նյութափոխանակության կայունությունը, այնպես էլ թմրամիջոցների ներքին կարողությունը `վերափոխման ենթարկվելու կամ դրանց սկզբնական ձեւով կշարունակվի:

Ճնշելի հեպատոցիտներ եւ կասեցման հեպատոցիտներ

Փորձարարական շրջանակներում հեպատոցիտները կարող են հետագայում դասակարգվել `հիմնվելով իրենց կուլտուրական պայմանների վրա: Cl անապարհելի հեպատոցիտներ են այն, ինչը հավատարիմ է մշակույթի ենթաշերտին, ինչը թույլ է տալիս կայուն կցորդ եւ մորֆոլոգիա, որոնք սերտորեն ընդօրինակում են VIVO միջավայրում: Այս հավելվածը ոչ միայն աջակցում է այս բջիջների բեւեռացված կառուցվածքին, այլեւ երկար է ապահովում - Կենսաքիմիական ուղիների տերմինների ուսումնասիրություններ, ինչպիսիք ենCYP450 ֆերմենտի ինդուկցիաՄի շարք Ընդհակառակը, կասեցման հեպատոցիտները պահպանվում են ոչ-ոքի, որոնք սովորաբար օգտագործվում են կարճատեւ վիճակագրության մեջ: Կասեցման մշակույթները հեշտացնում են բջիջների ավելի միասնական ազդեցությունը `միացություններ ստուգելու համար, դրանք իդեալական դարձնելով նյութափոխանակության կայունության եւ սուր հեպոտոքսիկ պատասխանների արագ գնահատման համար:

Cl անապարհափանում հեպատոցիտներ

Cl անապարհափանում հեպատոցիտներմեկուսացված լյարդի բջիջներ են, որոնք մշակվում են ծածկված կամ մասնագիտացված մշակույթի ուտեստների վրա: Այս հավելվածը բջիջներին թույլ է տալիս տարածել, բեւեռացնել եւ ստեղծել միջքաղաքային կապեր, պահպանելով շատերը in vivo - նման գործառույթների նման մի քանի օրվա կամ նույնիսկ շաբաթների ընթացքում: Քանի որ այս բջիջները հավատարիմ են, դրանք ժամանակի ընթացքում կարող են օգտագործվել քրոնիկ պատասխաններ, CYP450 ֆերմենտային ինդուկցիա եւ բազմաբնակարան - Օրվա տոքսիկության փորձարկումներ: Cl անապարհելի հեպատոցիտները նաեւ պահպանում են ավելի ամուր բջիջներ - Բջջային կապի եւ արտաբջջային մատրիցային փոխազդեցություններ, որոնք կարեւոր նշանակություն ունեն լյարդի պահպանման համար: Յուրաքանչյուր տեսակ, մարդկային, ոչ - մարդկային առաջնորդ, կրծող կամ այլ կարող է պահանջել օպտիմիզացված սալիկապատման պայմաններ (օրինակ, հատուկ ծածկույթներ կամ լրատվամիջոցներ) `լավագույնս կրկնօրինակելու ֆիզիոլոգիական պայմանները:

Կասեցման հեպատոցիտներ

Ի հակադրություն,Կասեցման հեպատոցիտներՄշակվում են ոչ-ոքի, հավատարիմ վիճակում, պահպանելով կլոր մորֆոլոգիա, միաժամանակ կենսունակ մնալով ավելի կարճ ժամանակահատվածների համար: Կասեցման հեպատոցիտները իդեալական են կարճ - Ժամկետային փորձերի համար, ինչպիսիք են թմրամիջոցների նյութափոխանակության նախնական ուսումնասիրությունները կամ արագ ֆերմենտային կինետիկայի գնահատումները: Քանի որ բջիջները չեն կաշկանդվում մատրիցային հավելվածներով, դրանք կարող են արագ պատրաստվել եւ օգտագործել ֆունկցիոնալ թեստերի համար `առանց բջիջների հավատարմության համար անհրաժեշտ հետաձգման: Կասեցման մշակույթները հատկապես օգտակար են տեսակների տարբերությունները համեմատելիս, քանի որ դրանք թույլ են տալիս ստանդարտացված արագ փորձարկումներ մարդկանցից կախոցների հեպատոցիտներ, ոչ - մարդկային պրիմատներ, կրծողներ եւ այլ տեսակներ:

Նյութափոխանակության կայունություն եւ հեպատոտոքսիկություն

Նյութափոխանակության կայունությունՀեպատոցիտի համատեքստում հետազոտությունը վերաբերում է մոլեկուլի, հաճախ թմրանյութերի թեկնածուի կարողությանը, որպեսզի դիմակայեն լյարդի ֆերմենտների կենսաքիմիական վերափոխմանը: Հեպատոցիտների հետ նյութափոխանակության կայունության հետաքննությունը հետազոտողներին հնարավորություն է տալիս կանխատեսել կիսով չափ - այս նյութերի կյանքի եւ հավանական տրոհման արտադրանքները, որոնք շատ կարեւոր են թմրանյութերի զարգացման մեջ: Մի բարդի նյութափոխանակության պրոֆիլը կարող է որոշել ոչ միայն դրա արդյունավետությունը, այլեւ իր անվտանգությունը, քանի որ նյութափոխանակությունները երբեմն կարող են ցուցադրել թունավոր ազդեցություն, որոնք չեն դիտվում ծնողական միացության մեջ:

Հեպատոտոքիկություն, մյուս կողմից, ընդգրկում է լյարդի բջիջների վրա քիմիական նյութերի վնասակար հետեւանքները: Թոքիզմի ուսումնասիրություններում ինչպես առաջնային, այնպես էլ մշակված հեպատոցիտների օգտագործումը օգնում է լյարդի վնասվածքների տանող մեխանիզմներին: Սա շատ կարեւոր է, քանի որ լյարդը, լինելով կենտրոնական նյութափոխանակության օրգան, խիստ ենթակա է ինչպես բնապահպանական քիմիական նյութերի, այնպես էլ դեղագործական գործակալների թունավոր վիրավորանքների: Այս բջիջները օգտագործող ուսումնասիրությունները կարող են հայտնաբերել բջջային վնասների կամ դիսֆունկցիայի ձեւերը, տրամադրել պատկերացումներ լյարդի վնասվածքի վաղ իրադարձությունների եւ կօգնեն կանխատեսել բացասական արդյունքները կլինիկական պայմաններում:

Fenzyme- ի ինդուկցիան եւս մեկ կարեւոր ասպեկտ է, որը կապված է հեպատոցիտի գործառույթի հետ, վկայակոչելով այն գործընթացին, որով որոշ նյութեր մեծացնում են դեղերի սինթեզը - Այս երեւույթը հատկապես նշանակալի է, քանի որ այն կարող է հանգեցնել CO- ի ներդրումային նյութափոխանակության աճող դեղամիջոցների, որոնք, հնարավոր է նվազեցնել դրանց արդյունավետությունը կամ վնասակար նյութափոխանակության արտադրությունը մեծացնելը: Close եղեւնվող հեպատոցիտների օգտագործմամբ հետազոտությունները հաճախ ուղղված են բացահայտող կարգավորիչ ուղիները, որոնք կառավարում են ֆերմենտային ինդուկցիան, դրանով իսկ լույս սփռում տարբեր քսենոտիկների եւ լյարդի նյութափոխանակության միջեւ բարդ փոխազդեցությունների վրա:

Hepatic Sirna Delivery եւ Targeting ռազմավարություններ

RNA միջամտության (RNAI) բուժման ոլորտում վերջին առաջընթացները ներկայացրել են նոր ռազմավարություններՀեպատիկ նպատակային առաքումօգտագործելով փոքր միջամտող rnas (sirnas): Հիմնական մոտեցումը ներառում է N - Acetylgalactosamine (Galnac) սողնայի մոլեկուլներ (GALNAC)Asgpr) ASGPR- ն բարձր է արտահայտվում հեպատոցիտների մակերեսին եւ կենտրոնական դեր է խաղում էնդոկիտիկ ինտեգրացման գործումGalnac - SirnaConjugates, այն դարձնելով լյարդի կարեւոր ուղի - Հատուկ դեղերի առաքում:

In vitro ուսումնասիրություններ սովորաբար աշխատում ենԱռաջնային հեպատոցիտի Sirna փոխանցումտեխնիկան `արդյունավետությունն ու առանձնահատկությունը գնահատելու համարSirna Galnac Hepatocyte ԱռաքումՄի շարք Այս մեթոդները հետազոտողներին թույլ են տալիս ուսումնասիրել գեների նոկաուտի հետեւանքները ֆիզիոլոգիական համապատասխան համատեքստում եւ օպտիմալացնել առաքման ձեւակերպումները առավելագույն ներբջջային աճի եւ գենի լռության արդյունավետության համար:

Ընդհանուր առմամբ, RNA թերապեւտիկների հիպատիկ նպատակային առաքում ASGPR- ի միջոցով - Միջնորդություն Galnac - Sirna Systems- ը ներկայացնում է գենետիկ լյարդի հիվանդությունների եւ նյութափոխանակության զարգացմանը, հետագա հեպատոկիտների մոդելների հետագա ամրապնդում:

Տեսակներ - Հատուկ հեպատոցիտի մանրամասներ

Մարդկային հեպատոցիտներ

Բազմակի հեպատոցիտներ անհրաժեշտ են մարդու թմրամիջոցների նյութափոխանակությունը եւ թունավորությունը կանխատեսելու համար, առաջարկելով բարձր ֆունկցիոնալ արդիականություն: Մասնագիտացված թիթեղների վրա նրանց կպչումը թույլ է տալիս ուսումնասիրել մետաբոլիկ ֆերմենտային ինդուկցիան, I / II մետաբոլիզմը եւ փոխադրող գործունեությունը:

Ոչ - հավատարիմ ձեւաչափով,Կախում Մարդկային հեպատոցիտներ Արագորեն պատասխանեք քսենոբիոտիկներին, դրանք իդեալական դարձնելով նյութափոխանակության արագ գնահատականների, մաքրման ուսումնասիրությունների եւ կարճ - տերմինաբանական փորձարկում:

Ոչ - Մարդկային առաջատար հեպատոցիտներ

Մարդկանց ֆիզիոլոգիական նմանությունը դարձնում էCl անապարհազանգի Cynomolgus Monkey Hepatocytesմի քանազորՃնշելի ռեզուս կապիկ հեպատոցիտներ Արժեքավոր է մարդկային արդյունքների հետ նախնական ուսումնասիրությունները կամրջելու համար: Դրանք օգտագործվում են թմրամիջոցների նյութափոխանակությունը, ֆերմենտային ինդուկցիան եւ տեսակները գնահատելու համար - Հատուկ անվտանգության պրոֆիլներ:

Կասեցում Cynomolgus Monkey Hepatocytesմի քանազորԿասեցում Rhesus Monkey Hepatocytes Միացնել նյութափոխանակության գործառույթների եւ սուր պատասխանների արագ, համեմատական ​​գնահատականներ, օգտակար ժամանակ - Տերմինը անհրաժեշտ է ավելի երկար - տերմինների ուսումնասիրություններ:

Կենդանիներ հեպատոցիտներ

Հիմնականում օգտագործվում է անասնաբուժական եւ թարգմանական հետազոտություններում,Շների համարակի հեպատոցիտներմի քանազորFloeable Beagle HepatocytesMimo իվո լյարդի ֆիզիոլոգիան թմրամիջոց ուսումնասիրելու համար - լյարդի վնասվածք եւ անասնաբուժական դեղագործության նյութափոխանակություն:

Դրանք ապահովում են մետաբոլիզմի արագ ուսումնասիրություններ եւ աշխատում են վաղ առավոտյան - Բեմական զննումների փորձերը, որոնք օգուտ են տալիս կասեցման մոդելի արագ շրջանառությունից:

Sprague - Dawley Rat Hepatocytes

ՍրանքՇփվող սպիրա - Dawley Rat Hepatocytesմեկուսացված են Sprague- ից - Dawley առնետներ եւ մշակվում են հավատարիմ կամ aptifice եղեւանջի ձեւաչափով: Թարթելի եղանակով բջիջները կցվում են մշակույթի ուտեստին, ինչը նրանց թույլ է տալիս ձեւավորել կայուն միջքաղաքային փոխազդեցություններ եւ պահպանել լյարդը: Այս ձեւաչափը հատկապես հարմար է երկար ժամանակ ուսումնասիրելու համար - Մետաբոլիկ գործընթացները, ֆերմենտային ինդուկցիան եւ քրոնիկ տոքսիկոլոգիական գնահատականները, օգտագործելով Sprague - Dawley առնետի լյարդի բջիջները:

Երբ պահպանվում է ոչ-ոքի, հավատարիմ պետությունում,Կասեցման սպիրա - Dawley առնետի հեպատոցիտներօգտագործվում են հիմնականում կարճ - տերմինների փորձերը: Կասեցման ձեւաչափը հեշտացնում է արագ փորձերը, ինչպիսիք են սուր դեղամիջոցի նյութափոխանակության ուսումնասիրությունները եւ ֆերմենտային կինետիկայի գնահատումները, որտեղ անհրաժեշտ են անհապաղ ֆունկցիոնալ պատասխաններ: Այս ռեժիմը ձեռնտու է տարբեր տեսակների կամ պայմանների միջեւ սուր նյութափոխանակության պատասխանները համեմատելիս:

ICR / CD - 1 մկնիկի հեպատոցիտներ

Մեկուսացված ICR / CD- ից - 1 մկներ, սրանք Cl անապարհելի ICR / CD - 1 մկնիկի հեպատոցիտներՀավատարեք մշակույթի ուտեստին, ինչը թույլ է տալիս նրանց պահպանել առանցքային լյարդի գործառույթները ավելի երկար տեւողությամբ: Հետազոտողները կողմ են ICR / CD- ի համար անհրաժեշտ եղանակին - 1 մկնիկի հեպատոցիտներ, երբ փորձարարական դիտարկումների համար անհրաժեշտ է կայուն, ընդլայնված մշակույթի ժամկետ:

Ի հակադրություն, կասեցման ICR / CD - 1 մկնիկի հեպատոցիտները մշակվում են առանց հավատարմության, այդպիսով պահպանելով շուրջօրյա ուսումնասիրություններ:Կասեցումը ICR / CD - Մկնիկի հեպատոցիտներԹույլ է տալիս արագ գնահատել նյութափոխանակության արձագանքները եւ հատկապես օգտակար է նախնական ցուցադրություններում կամ երբ բարձր է: Կասեցման հեպատոցիտների օգտագործումը ICR / CD- ում - 1 մկները օգնում են արագորեն ստեղծել ելակետային նյութափոխանակության պրոֆիլներ եւ դրանք համեմատել այլ տեսակների կամ տարբեր փորձարարական պայմանների հետ:

Կատվային հեպատոցիտներ

Թարթելի ձեւաչափը հատկապես օգտակար է երկար - տերմինների ուսումնասիրություններ, որոնք պահանջում են կայուն լյարդ - հատուկ գործառույթներ, ինչպիսիք են քրոնիկ թունավորության գնահատումները եւ ֆերմենտային ինդուկցիայի փորձերը: Ուսումնասիրություններում կենտրոնացած են կատվային լյարդի հիվանդությունների, թմրամիջոցների վնասվածքների, եւ կատուների համար հատուկ նյութափոխանակության խանգարումներ,Cat նջելի կատու հեպատոցիտներԱռաջարկեք ուժեղ մոդել: Նրանց հավատարմությունը նաեւ ուժեղացնում է մորֆոլոգիական եւ ֆունկցիոնալ վերջնական կետերի վերարտադրությունը, նրանց նախընտրելի մոդել դարձնելով անասնաբուժական դեղագործության եւ հեպատոլոգիայի հետազոտության մեջ:

Կախովի ձեւաչափը հեշտացնում է քավուների անմիջական պատասխանների չափումը քսենոբիոտիկներին, որտեղ հավելվածի պակասը նվազագույնի է հասցնում ավելի երկար, նկատվող պատասխանը:Կասեցման կատվի հեպատոցիտներ Ուստի շատ կարեւոր են նոր միացությունների ազդեցության հետեւանքով վաղ կենսաքիմիական փոփոխությունները եւ հավանական անբարենպաստ ռեակցիաները հայտնաբերելու համար:

Հավի հեպատոցիտներ

Որպես թռչնիների ներկայացուցիչներ,Close եղի հավի հեպատոցիտներՕգտագործվում են համեմատական ​​ուսումնասիրություններում `հասկանալու լյարդի գործառույթների էվոլյուցիոն տարբերությունները, հատկապես էնդոկրին խանգարման գնահատականներում:

Կասեցում հավի հեպատոցիտներՀնարավորություն է տալիս արագ, սուր - թռչունների մեջ լյարդի նյութափոխանակության փուլային ուսումնասիրություններ եւ կարող է ուղղակիորեն համեմատվել մամալալ գործընկերների հետ:

Այլ տեսակներ

Այլ տեսակների համար, Cl անապարհային Minipig հեպատոցիտներ, Կասեցում Minipig հեպատոցիտներ, Cl անապարհափանում Նոր Զելանդիա սպիտակ նապաստակի հեպատոցիտներ, Կասեցում Նոր Զելանդիայի սպիտակ նապաստակի հեպատոցիտներ Բոլորը նույնպես տարածված մոդելներ են դեղամիջոցը կանխատեսելու եւ բացատրելու համար - Թմրամիջոցների փոխազդեցությունները եւ թմրամիջոցների ցիտոտոքսիզմը ուսումնասիրելը.

Եզրափակում

Հեպատոցիտները առանցքային դեր են խաղում լյարդի գործառույթի պահպանման գործում նյութափոխանակության, դետոքսիզացիայի, լեղու արտադրության եւ սպիտակուցների սինթեզի միջոցով: Հոդվածում ընդգծվում է առաջնային հեպատոցիտների եւ նրանց մշակված ձեւերի միջեւ տարբերությունները եւ կասեցման եւ կասեցման հեպատոցիտներ. Յուրաքանչյուր օպտիմիզացված տարբեր փորձարարական նպատակների համար: Լեւվող հեպատոցիտները, իրենց հավատարմությամբ եւ երկարատեւ կենսունակությամբ, շատ կարեւոր են քրոնիկ էֆեկտների ուսումնասիրման համար, ֆերմենտային ինդուկցիան եւ երկար - նյութափոխանակության գործընթացներ Բացի այդ, վերլուծությունը տարածվում է տեսակների համար - Հատուկ ծրագրեր, արտացոլելով հեպատոկիտի մոդելները մարդկային մինչեւ կենդանիների համակարգեր, որոնք կանխատեսում են թմրանյութերի նյութափոխանակությունը, օգտագործելով Հեպատոտոքսիկությունը: Այս համապարփակ ակնարկը ցույց է տալիս հեպատոցիտների անբաժանելի դերը ինչպես կլինիկական հետազոտությունների, այնպես էլ դեղագործական զարգացման մեջ, որն անհրաժեշտ է լյարդի ֆիզիոլոգիայի եւ թմրամիջոցների անվտանգությունն ու արդյունավետությունը հիմք ընդունող մեխանիզմների:

Keywords: հեպատոցիտներ, առաջնային հեպատոցիտներ, ցողանջի հեպատոցիտներ, կախոցներ հեպատոցիտներ, հեպատոցիտներ մետաբոլիկ կայունություն, հեպատոքսիկություն, Cyp450 ֆերմենտային ինդուկցիա (PHH), կենդանիների հեպատոցիտներ (PCH), կենդանիների հեպատոցիտներ Մարդկային հեպատոցիտներ, Clineable Cynomolgus Monkey Hepatocytes, appliable շան հեպատոցիտներ, համարի շան հեպատոցիտներ, համարի բոցաշերտ բաճկոն - Dawley Rat Hepatocytes, aptoard c57bl / 6 մկնիկի հեպատոցիտներ, Cl անապարհափանում Ոսկե, սիրիացի համստերներ հեպատոցիտներ, apply եղեւանջի մինի վրա հեպատոցիտներ, apply եղեւանջի նոր Զելանդիա Հեպատոցիտներ, կախոցներ Beagle Hepatocytes Հեպատոցիտներ, կախոցներ Sprague - Dawley Rat Hepatocytes Հեպատոցիտներ, կասեցում Նոր Զելանդիա Սպիտակ նապաստակի հեպատոցիտներ, կախոցներ Հավի հեպատոցիտներ,ASGPR, GALNAC - Սիրիա, առաջնային հեպատոցիտը Sirna փոխանցում Sirna Galnac Hepatocyte ԱռաքումՈճի լինելՀեպատիկ նպատակային առաքում: