PengantarMikrosom Hatidan S9 fraksi
Di bidang metabolisme obat dan farmakokinetik, memahami seluk -beluk mikrosom hati dan fraksi S9 sangat penting. Sistem in vitro ini berperan dalam tahap awal penemuan obat, memberikan wawasan tentang bagaimana entitas kimia baru (NCE) dimetabolisme oleh hati. Kemampuan untuk memprediksi stabilitas metabolisme dan interaksi obat potensial sangat berharga, menghemat waktu dan sumber daya dalam pengembangan obat -obatan baru. Artikel ini menggali perbedaan antara mikrosom hati dan fraksi S9, mengeksplorasi komposisi, fungsionalitas, keunggulan, dan keterbatasan mereka.Komposisi dan struktur mikrosom hati
● Mikrosom sebagai bagian dari retikulum endoplasma
Mikrosom hati adalah vesikel - seperti artefak yang berasal dari retikulum endoplasma dalam sel eukariotik. Mereka terbentuk ketika sel dipecah selama proses homogenisasi, yang menghasilkan sedimentasi retikulum endoplasma. Fraksi subseluler ini diperkaya dengan enzim membran - terikat dan sangat penting dalam mempelajari metabolisme obat, terutama reaksi fase I.● Enzim kunci yang terlibat: sitokrom P450 dan UGT
Konsentrasi tinggi enzim sitokrom P450 (CYP) dalam mikrosom hati adalah fitur penentu mereka. Enzim ini memainkan peran penting dalam metabolisme oksidatif dari berbagai xenobiotik, termasuk obat -obatan dan racun lingkungan. Juga ada uridine difosfat - glucuronosyltransferases (UGT), yang berkontribusi pada konjugasi dan eliminasi metabolit berikutnya, menandai langkah awal menuju pemahaman fase I dan beberapa reaksi fase II.Komposisi dan struktur fraksi S9
● S9 sebagai kombinasi fraksi mikrosomal dan sitosolik
Fraksi S9, sering disebut sebagai supernatan 9000g, adalah komponen subseluler yang diperoleh dari homogenat hati melalui sentrifugasi diferensial. Tidak seperti mikrosom yang mengandung enzim terikat reticulum - endoplasma yang dominan, fraksi S9 mencakup enzim mikrosomal dan sitosolik, menghadirkan profil enzimatik yang lebih komprehensif.● Enzim hadir dalam S9 termasuk fase I dan II
Fraksi S9 memberikan lingkungan enzimatik yang lebih kaya, merangkum enzim fase I seperti CYP dan rangkaian enzim fase II, seperti sulfotransferase, transferase glucuronosyltransferases, dan glutathione - s - transferase. Array ini memungkinkan transformasi metabolisme yang lebih luas, mensimulasikan lingkungan in vivo hati lebih akurat daripada mikrosom saja.Fungsionalitas: Metabolisme Fase I dan Fase II
● Perbedaan aktivitas enzim antara mikrosom dan S9
Perbedaan inti terletak pada ruang lingkup enzimatik. Mikrosom hati terutama mendukung reaksi metabolisme fase I, yang melibatkan oksidasi, reduksi, dan hidrolisis. Reaksi ini memperkenalkan atau mengekspos gugus fungsi pada molekul obat, membuka jalan untuk reaksi fase II. Sebaliknya, fraksi S9 mencakup kedua fase I dan II, sehingga memfasilitasi reaksi konjugasi yang tidak dapat dilakukan secara mikrosom.● Pentingnya fase I dan II dalam metabolisme obat
Sifat berurutan dari reaksi fase I dan II menggarisbawahi signifikansinya dalam metabolisme obat. Modifikasi fase I umumnya menyiapkan senyawa untuk fase II, yang biasanya melibatkan konjugasi untuk meningkatkan kelarutan, membantu dalam proses ekskresi. Memahami fase -fase ini sangat penting untuk memprediksi bioavailabilitas obat, kemanjuran, dan potensi toksisitas.Aplikasi dalam Studi Metabolisme Obat
● Penggunaan dalam studi ADME: penyerapan, distribusi, metabolisme, eliminasi
Mikrosom hati dan fraksi S9 sangat penting dalam studi ADME, yang mengevaluasi penyerapan, distribusi, metabolisme, dan eliminasi kandidat obat. Studi -studi ini sangat penting dalam menentukan profil farmakokinetik obat, memberikan data penting yang menginformasikan dosis, interaksi potensial, dan efek samping.● Studi perbandingan: Mikrosom vs S9 dalam penemuan obat
Analisis komparatif antara mikrosom dan fraksi S9 mengungkapkan bahwa sementara keduanya memiliki kegunaannya, fraksi S9 menawarkan pandangan yang lebih holistik tentang stabilitas metabolisme karena dimasukkannya enzim fase II. Analisis komprehensif ini membantu dalam identifikasi jalur metabolisme yang mungkin tidak terlihat saat menggunakan mikrosom hati saja.Keuntungan dari mikrosom hati
● Biaya - Efektivitas dan Ketersediaan
Mikrosom hati lebih disukai karena biaya - keefektifan dan ketersediaan luas. Proses untuk persiapan dan penggunaannya telah ditetapkan dengan baik, menjadikannya pilihan praktis bagi banyak laboratorium.● Kompatibilitas throughput dan otomatisasi tinggi
Kesederhanaan tes mikrosom membuat mereka dapat menerima throughput dan otomatisasi tinggi, fitur penting untuk menyaring perpustakaan besar senyawa dengan cepat. Keuntungan ini sangat penting dalam merampingkan pipa penemuan obat, memungkinkan identifikasi awal kandidat yang menjanjikan.Keuntungan dari fraksi hati S9
● Representasi metabolisme yang komprehensif
Dengan enzim fase I dan II, fraksi S9 menawarkan penilaian yang lebih lengkap tentang nasib metabolisme senyawa. Representasi komprehensif ini sangat berguna untuk mengidentifikasi metabolit potensial di awal proses pengembangan obat.● Dimasukkannya metabolisme fase II dan pertimbangan biaya
Termasuk enzim fase II berarti bahwa fraksi S9 dapat memberikan wawasan tentang reaksi konjugasi, memprediksi bagaimana obat akan diproses dalam tubuh. Meskipun mereka mungkin memerlukan kofaktor tambahan untuk reaksi tertentu, mereka masih menawarkan saldo biaya dan utilitas yang menguntungkan dalam pengaturan throughput tinggi.Keterbatasan mikrosom hati
● Tidak adanya enzim sitosolik yang mempengaruhi data metabolisme penuh
Keterbatasan yang signifikan dari mikrosom hati adalah kurangnya enzim sitosolik, yang penting untuk gambaran metabolisme penuh. Ketidakhadiran ini berarti bahwa beberapa metabolit mungkin diabaikan, kehilangan jalur kritis yang penting untuk memahami keamanan dan kemanjuran obat.● Persyaratan untuk sistem tambahan untuk studi fase II
Untuk mempelajari reaksi fase II secara komprehensif, sistem tambahan atau suplementasi dengan enzim/kofaktor eksternal diperlukan saat menggunakan mikrosom. Persyaratan ini dapat memperumit desain dan interpretasi uji.Keterbatasan Fraksi S9 Hati
● Kebutuhan untuk CO - Faktor dan kemungkinan pengenceran enzim
Terlepas dari sifatnya yang komprehensif, fraksi S9 sering membutuhkan penambahan kofaktor untuk mendukung aktivitas enzimatik tertentu. Kebutuhan ini dapat memperkenalkan variabilitas dan kompleksitas menjadi tes. Selain itu, pengenceran enzim dalam fraksi S9, dibandingkan dengan persiapan yang terisolasi, dapat mempengaruhi sensitivitas deteksi untuk beberapa reaksi metabolisme.● Tantangan penyimpanan dan persiapan dibandingkan dengan mikrosom
Persiapan dan penyimpanan fraksi S9 bisa lebih menantang daripada mikrosom. Pemeliharaan aktivitas enzimatik yang tepat melalui penanganan dan penyimpanan yang cermat sangat penting untuk mendapatkan hasil yang dapat diandalkan, sedikit memperumit penggunaannya dalam studi skala - besar.Kesimpulan dan Rekomendasi
● Ringkasan terbaik - Gunakan skenario untuk setiap metode
Mikrosom hati dan fraksi S9 masing -masing memiliki kekuatan dan kelemahan yang berbeda. Mikrosom hati paling baik digunakan saat biaya - Skrining Metabolisme Fase I yang Efektif dan Cepat. Sebaliknya, fraksi S9 lebih cocok untuk studi komprehensif yang membutuhkan wawasan tentang metabolisme fase I dan II. Memilih sistem yang sesuai tergantung pada persyaratan spesifik penelitian dan sumber daya yang tersedia.● Saran untuk penggunaan optimal dalam proses pengembangan obat
Bagi mereka yang berada di tahap pengembangan obat awal, menggunakan mikrosom hati berkualitas tinggi dari pemasok mikrosom hati terkemuka atau produsen mikrosom hati dapat merampingkan pemutaran awal. Saat penelitian berlangsung, menggabungkanHati S9Fraksi, mungkin bersumber dari pabrik mikrosom hati yang andal, akan memberikan gambaran yang lebih lengkap tentang stabilitas metabolisme, memastikan evaluasi kandidat obat yang kuat.● PengantarIPhase
Berkantor pusat di Wales Utara, Pennsylvania, iPhase Biosciences adalah "khusus, novel, dan inovatif" Teknologi - Teknologi yang mengintegrasikan penelitian, pengembangan, produksi, penjualan, dan layanan teknis reagen biologis inovatif. Memanfaatkan pengetahuan dan hasrat yang luas untuk penelitian ilmiah, tim ilmiah kami berkomitmen untuk memasok reagen biologis inovatif yang berkualitas kepada para ilmuwan di seluruh dunia dan membantu para peneliti di seluruh upaya ilmiah mereka untuk membantu mencapai tujuan penelitian mereka. Mengejar cita -cita litbang "reagen inovatif, meneliti masa depan," iPhase mendirikan beberapa fasilitas R&D, pusat penjualan, gudang, dan mitra distribusi di seluruh dunia.
Waktu posting: 2024 - 11 - 26 16:50:02