P: Kepiye cara milih mikrosom lan hepatosit kanggo pasinaon stabilis metabolisme? Apa bisa milih mung siji kanggo ngrampungake syarat kasebut?
A: Ing panaliten stabilis, pilihan saka mikrosom ati utawa hepatosit utamane gumantung saka sifat metabolisme senyawa, ing endi sing duwe tingkat metabolik sing dhuwur dipilih. Umumé, mikrosom ati luwih disenengi, utamane nalika molekul senyawa luwih banyu - larut lan siji - metabolisme fase minangka jalur metabolik utama (utamane liwat cyp). Hepatosit bisa digunakake kanggo eksperimen nalika ana bukti loro - metabolisme fase, hidrolisis minangka protein sing paling dhuwur, lan metabolisme ing ati, lan metabolisme ing mikrosom ati ora nyata. Biasane, siji sistem metabolik bisa dipilih kanggo nyukupi kebutuhan; Yen kahanan ing kabeh aspek ngidini, mesthi paling apik kanggo milih loro sistem ing wektu sing padha.
P: Napa sampeyan kudu nggunakake hepatosit utama kanggo Asuksi Induksi Enzim?
A: Cyp enzim - Asuh sing kudu didhukung kudu pindhah saka "Transkrip", "terjemahan" kanggo "modifikasi protein" kanggo entuk protein cyp enzim sing aktif. Mula, sistem tes kudu dadi sel ati, ora ati mikrosom utawa ati S9.
P: Napa aku kudu milih telung hepatosit utama sumbangan kanggo Asuksi Induksi Enzim?
A: Miturut introduksi pedoman kanggo interaksi obat, paling ora telung donor kudu digunakake, lan asil induksi saben donor kudu dinilai kanthi kapisah. Saliyane ngasilake asil statistik sing signifikan, pilihan saka telung donor kanggo eksperimen kasebut uga luwih penting kanggo netepke Inter - Variasi Individu. Yen asil saka paling ora siji donor ngluwihi amba sing wis ditemtokake, calon tamba bisa uga induktif lan tindakake - munggah evaluasi dibutuhake.
P: Napa fokus mung kanggo induksi enzim Cyp lan ora incium inzim?
A: Alesan kanggo fokus ing induksi cypase yaiku mekanisme induksi cypase wis sinau kanthi luwih jelas. Kanthi tembung liyane, alesan kanggo ora mbutuhake sinau babagan induksi UGTAS yaiku mekanisme kasebut isih durung jelas; Nanging, iki ora ateges UGTAS ora bakal kena pengaruh. Pandhuan uga nyatakake yen ora ana sistem klasifikasi standar kanggo inhicer utawa inhibitor saka transporter lan Enzim metabolisme Fase II II.
P: Suwene bisa ngetrapake hepatosit utama sing bisa urip sawise resusitasi, lan suwene suwene Hepatosit bisa dijaga tanpa nahan budaya sawise resusitasi?
A: Hepatosit utama pasteurized umume digunakake kanggo Assay Inzim Invation. Sawise pemulihan sel, sel dilereni ing piring nyebar medium, diatur konsentrasi sing cocog, lan berbudaya ing kolagen - lakon sing dilapisi; Banjur sel bisa pasteurized sajrone 4 ~ 6 jam. Sawise sel kasebut dipasang ing tembok, medium pangopènan diganti lan dijaga 18 h kanggo njamin pemulihan maksimal negara sel. Sabanjure, Assay Induksi Enzim bisa ditindakake kanggo ndeteksi kegiatan metabolik lan tingkat indhuksi mrna. Saka perspektif siklus kabeh, hepatosit bisa dijaga nganti 6 ~ 7 dina sawise penuh. Nalika wektu kasebut, negara kethekatan Cell ngrusak, lan sel bakal dicopot lan nundha.
Yen hepatosit sing penting dibudakake, kita wis verifikasi manawa bisa dijaga ing negara sing apik sajrone 4 ~ 6 jam. Kita durung nindakake verifikasi kanggo wektu sing luwih suwe.
P: Hepatosit bisa digunakake minangka loro penundaan lan sel-sel gumantung saka media budaya sing beda digunakake?
A: Umume sel saka jaringan lan organ sing padhet dipasang, nanging ora kabeh sel sing dipasang nalika berbudur - vitro. Apa sel kasebut tembok - adhine utawa ora gumantung saka negara sel dhewe; Ing wektu sing padha, tembok - Sel sing wis nyebabake butuh medium budaya khusus lan pro copy cell (e.gnonectin, faktor ekspansi serum) sing bisa melu proses lampiran sel. Kesimpulane, sel sing adil bisa digunakake minangka sel suspensi, nanging sel penundaan ora kudu digunakake kanggo panggunaan sing cukup.
P: Apa kaluwihan / kekurangan nggunakake hepatosit penundaan hepatonion? Apa kritik keputusan kasebut?
A: Sawise hepatosit diisolasi, bisa dikembangake nalika penundaan utawa ing tembok sing adhi. Kegiatan enzim Cytochrome P450 saka penundaan sing diterbitake Hepattion sing paling konsisten karo ing - Vivo kanggo 4 ~ 6h pisanan, banjur suda kanthi cepet kanthi tlutuh. Mula, hepatosit penundaan umume digunakake kanggo panaliten stabilitas metabolisme utawa sinau profil metabolit. Hepatosit utama sing budayaan ing tembok sing wis cukup kanggo pulih saka karusakan kanggo njaga ciri khas biologis lan kegiatan metabolisme hipatosit normal. Mula, umume digunakake kanggo studi invisi enzim, studi cytotoxicity obat, stabilitas metabolik obat metabolisasi utawa pasinaon inferensi produk.
Saiki, kita ora menehi layanan tuku Online Webpage. Produk ditambahake ing Kréta Blanja sawise registrasi lan login mung kanggo referensi. Yen sampeyan kudu tuku produk, tinggalake informasi kontak liwat kontak US Channel, lan kita bakal ngubungi wektu kanggo ngrampungake layanan kita.
P: Kepiye cara naleni protein khusus sing nyebabake asil tes?
A: Yen calon tamba naleni non - khusus kanggo protein mikroomom, iki nyebabake paramèter kinetik. Minangka konsentrasi protein mundhak, nilai km mundhak, nyebabake reresik intrinsik sing murah. Uga, naleni calon tamba protein ing mikrosom bisa nyebabake variasi gedhe ing asil saka macem-macem laboratorium lan sistem sing beda.
P: Konsentrasi saka protein ati sing dianjurake ing manual instruksi fase utawa Kit Metabolik Fase II Fase II yaiku 0.1 mg / ml, apa tegese, apa tegese, apa tegese sampeyan kudu diencerake ing sistem kasebut?
A: Ora perlu dilute mikrosom hepatik dhisik; Konsentrasi mikrosom hepatic ing kit 20 mg / ml lan konsentrasi final mikrosom ing sistem tes yaiku 0.1 - 1 mg / ml, sing bisa ditambahake proporsi kanthi proporsi.
P: Kapadhetan sell sing disaranake kanggo tes stabilitas metabolisme metabolisme saka hepatosyte utama? Apa pitungan reresik padha kanggo mikrosom ati?
A: Kapadhetan sela sing disaranake kanggo stabilitas hepatocysto metabolisme utama yaiku 0,5 nganti 2 × 106 Sel / ml, lan petungan clearance lan pangolahan asil stabilitas metabolik hepatikal hepatical konsisten.
P: Apa bahan utama ing buffer PBS sampeyan? Apa ngemot KCL lan NACL?
A: Komponen utama PBS kita yaiku K2Hpo4 lan kh2PO4, lan bebas saka KCL lan Nacl.
P: Apa tujuane buffers fosfat? Napa sampeyan butuh fosfat?
A: Buffer fosfat dipilih kanggo niru lingkungan fisiologis, lan fosfat minangka salah sawijining pasangan buffer sing paling penting kanggo njaga lingkungan cairan awak.
P: Apa setelan sing biasa kanggo enzim - konsentrasi reseptor sing ndorong? Apa ana solusi yen kelarutan sistem sing bakal diuji yaiku miskin?
A: Assay Induksi Enzim kudu disetel karo 3 konsentrasi sing beda, tingkat konsentrasi kudu nutupi konsentrasi tamba getih getih sing ngarep-fokus ing manungsa, lan konsentrasi paling dhuwur dipilih dadi konsentrasi tamba getih sing efektif ing manungsa. Yen kelarutan ing fase banyu kurang, pelarut organik bisa dipilih minangka pelarut, kayata. DMSO, nanging jumlah pelarut organik sing ditambahake ing sistem kasebut kudu dikendhaleni.
P: Ing pasinaon stabilis metabolisme, kudu nggunakake rong sistem tes, mikrosom ati lan hepatosit utama, kanggo nyoba?
A: Microsom hepatik meh membran membran bircrane - kaya struktur sing dibentuk dening awake dhewe - Centricalismulasi jaringan hepatik, lan ngemot enzim bipusial lan sawetara enzim biphasik, e.g., Ugts, STS. Hepatosit utama (PhCS) minangka hepatosit kanthi langsung sawise ngisolasi langsung saka liar kewan, sing biasane njaga tingkat metabolik, utamane njaga tingkat enzim sing konsisten karo Vivo. Ing sinau stabilitas metabolisme, ora perlu nimbang biaya kasebut, lan rong sistem tes bisa dipilih kanggo tes ing wektu sing padha; Utawa sistem tes sing cocog bisa dipilih miturut sifat metabolik saka senyawa, lan prinsip yaiku sistem sing duwe tingkat metabolik sing dhuwur dipilih. Umumé, mikrosom ati minangka pilihan sing paling apik nalika molekul senyawa luwih akeh banyu - larut lan siji - metabolisme fase utama (utamane liwat cyp); Nalika loro - metabolisme fase minangka dalan utama, hidrolisis minangka jalur metabolis utama, protein sing ora jelas ing mikrosom ati sing dhuwur banget, tes bisa ditindakake kanthi nggunakake hepatosit utama.
P: Apa konsentrasi mikrosom ditliti ing tes stabilitas metabolisme? Apa efek sing dhuwur banget utawa sithik banget?
A: Ing tes stabilitas metabolisme, konsentrasi protein uga bakal mengaruhi konsentrasi protein, biasane milih konsentrasi protein microosom saka 0.1 mg / ml ~ konsentrasi protein kudu dipilih miturut sifat metabolik dhewe. Cantikan konsentrasi protein mikrosomal bakal nyebabake nom-noman obat kasebut menyang protein Microsomal; Nalika kurang konsentrasi protein Microsomal bisa nyebabake metabolisme obat sing ora pati penting.