សំណួរគេសួរញឹកញាប់

សំណួរៈតើខ្ញុំគួរជ្រើសរើសមីក្រូទស្សន៍និង Hepatocytes យ៉ាងដូចម្តេចសម្រាប់ការសិក្សាអំពីស្ថិរភាពមេតាប៉ូលីស? តើខ្ញុំអាចជ្រើសរើសបានតែមួយប៉ុណ្ណោះដើម្បីបំពេញតាមតម្រូវការ?

ចម្លើយៈនៅក្នុងការសិក្សាអំពីស្ថិរភាពមេតាប៉ូលីសជម្រើសនៃមីក្រូសារីថ្លើមឬ Hepatocytes ភាគច្រើនគឺអាស្រ័យលើលក្ខណៈសម្បត្តិមេតាប៉ូលីសនៃសមាសធាតុដែលអត្រានៃការរំលាយអាហារខ្ពស់ត្រូវបានជ្រើសរើស។ ជាទូទៅមីក្រូសារជាតិត្រូវបានគេពេញចិត្តជាពិសេសនៅពេលដែលម៉ូលេគុលបរិវេណមានទឹកច្រើនពោលគឺរលាយហើយមួយ - មេតាប៉ូលីសដំណាក់កាលគឺជាផ្លូវមេតាប៉ូលីសសំខាន់ (ជាពិសេសតាមរយៈ Cyp) ។ Hepatocytes អាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការពិសោធន៍នៅពេលមានភ័ស្តុតាងនៃការរំលាយអាហារដំណាក់កាលដែលជាមាគ៌ាធំ ៗ ដែលជាមាគ៌ាដ៏សំខាន់ប្រូតេអ៊ីនដែលមិនមានជាតិខ្លាញ់ខ្ពស់និងការរំលាយអាហារក្នុងមីក្រូហ្វូនមិនមានភស្តុតាងទេ។ ជាធម្មតាប្រព័ន្ធមេតាប៉ូលីសមួយអាចត្រូវបានជ្រើសរើសដើម្បីបំពេញតម្រូវការ។ ប្រសិនបើលក្ខខណ្ឌនៅក្នុងគ្រប់ទិដ្ឋភាពទាំងអស់អនុញ្ញាតឱ្យវាពិតជាល្អបំផុតក្នុងការជ្រើសរើសប្រព័ន្ធទាំងពីរក្នុងពេលតែមួយ។

សំណួរ: ហេតុអ្វីបានជាចាំបាច់ត្រូវប្រើ Hepatocytes បឋមសម្រាប់អង់ហ្ស៊ីម almany assay?

ចម្លើយ: Cyp អង់ស៊ីម - ដែលបណ្តាលមកពីការអះអាងចាំបាច់ត្រូវចេញពី "ការផ្លាស់ប្តូរ" "ការបកប្រែ" ទៅ "ការកែប្រែការបកប្រែការកែប្រែប្រូតេអ៊ីន" ដើម្បីទទួលបានប្រូតេអ៊ីន Cypyme សកម្ម។ ដូច្នេះប្រព័ន្ធសាកល្បងគួរតែជាកោសិកាថ្លើមមិនមែនមីក្រូហ្វូនថ្លើមឬអេសអេសអេស 9 ទេ។

សំណួរៈហេតុអ្វីបានជាខ្ញុំត្រូវការជ្រើសរើស Hepatocytes របស់មនុស្សបរិច្ចាគចំនួន 3 នាក់សម្រាប់ការអាក់អន់ចិត្តអង់ស៊ីម?

ចម្លើយៈយោងទៅតាមការណែនាំអំពីអន្តរកម្មគ្រឿងញៀនយ៉ាងហោចណាស់ម្ចាស់ជំនួយបីគួរតែត្រូវបានប្រើហើយលទ្ធផលនៃការផ្តល់លទ្ធផលរបស់ម្ចាស់ជំនួយម្នាក់ៗគួរតែត្រូវបានវាយតម្លៃដោយឡែកពីគ្នា។ បន្ថែមពីលើការផលិតលទ្ធផលសំខាន់ៗដែលជាជម្រើសរបស់ម្ចាស់ជំនួយបីសម្រាប់ការពិសោធន៍ក៏សំខាន់ជាងសម្រាប់វាយតម្លៃអន្តរបុគ្គល - ការផ្លាស់ប្តូរបុគ្គល។ ប្រសិនបើលទ្ធផលពីអ្នកបរិច្ចាគយ៉ាងតិចមួយលើសពីកំរិតកំណត់ដែលបានកំណត់ទុកជាមុនបេក្ខជនថ្នាំអាចនឹងត្រូវបានអនុវត្តនិងអនុវត្តតាម - ត្រូវការវាយតម្លៃកើនឡើង។

សំណួរ: ហេតុអ្វីបានជាផ្តោតតែលើអង់ស៊ីមស៊ីអ៊ីភីនិងមិននៅលើអង់ស៊ីមអង់ហ្ស៊ីមអង់ស៊ីម?

ចម្លើយៈហេតុផលសម្រាប់ការផ្តោតលើការផ្តោតអារម្មណ៍លើការបញ្ចូលស៊ីម៉ងត៍គឺថាយន្តការនៃការបញ្ចូលស៊ីម៉ងត៍ត្រូវបានសិក្សាយ៉ាងច្បាស់។ និយាយម៉្យាងទៀតហេតុផលដែលមិនតម្រូវឱ្យមានការសិក្សាអំពីការអាក់អន់ចិត្ត UGTase គឺថាយន្តការនៅតែមិនទាន់ច្បាស់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយនេះមិនមានន័យថា UGTase នឹងមិនត្រូវបានបង្កើតឡើងទេ។ គោលការណ៍ណែនាំក៏បញ្ជាក់ថាមិនមានប្រព័ន្ធចាត់ចំណាត់ថ្នាក់ស្តង់ដារសម្រាប់អ្នកធ្វើឱ្យអ្នកធ្វើឬអ្នកដឹកអ្នកដឹកជញ្ជូននិងអង់ស៊ីមរំលាយអាហារដំណាក់កាលទី 2 ទេ។

សំណួរ: តើរយៈពេលប៉ុន្មានដែលអាចជួយឱ្យ Hepatocytes បឋមអាចរស់បានបន្ទាប់ពីការធ្វើចលនាបានហើយតើ Hepatocytes អាចត្រូវបានរក្សាដោយមានវប្បធម៌ប្រាស្រ័យទាក់ទងគ្នាប៉ុន្មានបន្ទាប់ពីការធ្វើឱ្យមានភាពអាក់អន់ចិត្ត?

ចម្លើយ: Hepatocytes បឋមដែលត្រូវបានប្រើជាទូទៅត្រូវបានប្រើសម្រាប់អង់ហ្ស៊ីមអភិវឌន៍។ បន្ទាប់ពីការជាសះស្បើយកោសិកាឡើងវិញកោសិកាត្រូវបានផ្អាកក្នុងចានចែកចាយដែលបានកែសំរួលទៅនឹងការផ្តោតអារម្មណ៍សមស្របនិងវប្បធម៌នៅកូឡាជែន - ចានលាប; បន្ទាប់មកកោសិកាអាចត្រូវបានបិទភ្ជាប់ក្នុងរយៈពេល 4 ~ 6 ម៉ោង។ បន្ទាប់ពីកោសិកាត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងជញ្ជាំងឧបករណ៍ថែទាំត្រូវបានជំនួសនិងរក្សារយៈពេល 18 ម៉ោងដើម្បីធានាបាននូវការស្តារអតិបរមានៃរដ្ឋកោសិកា។ បន្ទាប់ការអាក់អន់ចិត្តអង់ស៊ីមអាចត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីរកឃើញសកម្មភាពមៀរនិយមនិងកម្រិតនៃការបញ្ចូល MRNA ។ តាមទស្សនៈនៃវដ្តទាំងមូល Hepatocytes អាចត្រូវបានរក្សារយៈពេល 6 ~ 7 ថ្ងៃបន្ទាប់ពីជញ្ជាំងប្រកាន់ខ្ជាប់។ នៅពេលដែលពេលវេលាកន្លងផុតទៅការប្រកាន់ខ្ជាប់ជញ្ជាំងកោសិកាកាន់តែយ៉ាប់យ៉ឺនហើយកោសិកានឹងផ្តាច់និងផ្អាក។

ប្រសិនបើ HaPatocytes ដែលប្រកាន់ខ្ជាប់មិនមានវប្បធម៌ទេយើងបានផ្ទៀងផ្ទាត់ថាពួកគេអាចត្រូវបានរក្សានៅក្នុងរដ្ឋល្អក្នុងរយៈពេល 4 ~ 6 ម៉ោង។ យើងមិនទាន់បានអនុវត្តការផ្ទៀងផ្ទាត់រយៈពេលយូរនៅឡើយទេ។

សំណួរ: Hepatocytes អាចត្រូវបានប្រើទាំងការផ្អាកនិងកោសិកាដែលប្រកាន់ខ្ជាប់អាស្រ័យលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយវប្បធម៌ខុសគ្នាដែលបានប្រើ?

ចម្លើយៈកោសិកាភាគច្រើនពីជាលិការរឹងនិងសរីរាង្គត្រូវបានជញ្ជាំងប៉ុន្តែមិនមែនកោសិកាទាំងអស់ត្រូវបានជញ្ជាំងទេនៅពេលដែលមានវប្បធម៌ Vitro ។ មិនថាកោសិកាមានជញ្ជាំង - ប្រកាន់ខ្ជាប់ឬមិនអាស្រ័យលើស្ថានភាពកោសិកាដោយខ្លួនឯង។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះជញ្ជាំង - កោសិកាជាក់លាក់ត្រូវការផ្នែកវប្បធម៌ជាក់លាក់និងការគាំទ្រពិសេសមួយចំនួន។ សរុបសេចក្ដីមកអ្នកប្រកាន់ខ្ជាប់កោសិកាដែលអាចត្រូវបានប្រើជាកោសិកាផ្អាកប៉ុន្តែកោសិកាដែលមិនចាំបាច់ប្រើសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ដែលប្រាស្រ័យទាក់ទង។

សំណួរៈតើគុណសម្បត្តិ / គុណវិបត្តិអ្វីខ្លះនៃការប្រើប្រកាន់ខ្ជាប់ខ្ញីដែលប្រកាន់ខ្ជាប់នូវការព្យួរជំងឺរលាកថ្លើមដែលមានប្រាជ្ញា? តើអ្វីទៅជាលក្ខណៈវិនិច្ឆ័យនៃការសម្រេចចិត្ត?

ចម្លើយៈបន្ទាប់ពី Hepatocytes ដាច់ឆ្ងាយពួកគេអាចត្រូវបានគេដាំដុះក្នុងការផ្អាកឬនៅក្នុងជញ្ជាំងដែលប្រៀនប្រដៅ។ សកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីម Cybychrome P45 ពីការព្យួរបឋមបឋមដែលមានវប្បធម៌គឺស្របគ្នាបំផុតជាមួយនឹង Vivo សម្រាប់ 4 ~ 6 បន្ទាប់មកថយចុះយ៉ាងឆាប់រហ័សជាមួយនឹងការពន្យារពេលយូរ។ ដូច្នេះការផ្អាក HePatocytes ជាទូទៅត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសិក្សាស្ថិរភាពមេតាប៉ូលីសឬការសិក្សាអំពីការធ្វើត្រាប់តាមមេតាប៉ូលីស។ លោក Hepatocytes បឋមដែលមានវប្បធម៌ប្រកាន់ខ្ជាប់នូវពេលវេលាដែលអ្នកប្រកាន់ខ្ជាប់មានពេលវេលាគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីជាសះស្បើយពីការខូចខាតដើម្បីរក្សាចរិតជីវសាស្រ្តនិងសកម្មភាពមេតាប៉ូលីសនៃជំងឺរលាកថ្លើមធម្មតា។ ហេតុដូច្នេះហើយជាទូទៅពួកគេត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសិក្សាអង់ស៊ីមដែលមានជាតិថ្នាំស៊ីតូហ្ស៊ីមគ្រឿងញៀនស្ថេរភាពមេតាប៉ូលីសនៃថ្នាំរំលងគ្រឿងញៀនយឺតឬការសិក្សាដែលមានជំងឺ។

បច្ចុប្បន្ននេះយើងមិនផ្តល់សេវាកម្មទិញគេហទំព័រតាមអ៊ិនធរណេតទេ។ ផលិតផលដែលបានបន្ថែមទៅក្នុងរទេះដើរទិញឥវ៉ាន់បន្ទាប់ពីចុះឈ្មោះហើយការចូលគឺមានលក្ខណៈយោងតែប៉ុណ្ណោះ។ ប្រសិនបើអ្នកត្រូវការទិញផលិតផលរបស់យើងសូមទុកព័ត៌មានទំនាក់ទំនងរបស់អ្នកតាមរយៈបណ្តាញទំនាក់ទំនងរបស់យើងហើយយើងនឹងទាក់ទងអ្នកឱ្យទាន់ពេលវេលាដើម្បីបញ្ចប់សេវាកម្មរបស់យើង។

សំណួរៈតើការភ្ជាប់ប្រូតេអ៊ីនដែលមិនមានលទ្ធផលយ៉ាងដូចម្តេចបានប៉ះពាល់ដល់លទ្ធផលតេស្ត?

ចម្លើយៈប្រសិនបើបេក្ខជនគ្រឿងញៀនចងភ្ជាប់មិនមែន - ពិសេសទៅប្រូតេអ៊ីនមីក្រូទស្សន៍លទ្ធផលនេះត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរប៉ារ៉ាម៉ែត្ររបស់ Kinetic ។ នៅពេលដែលការផ្តោតអារម្មណ៍ប្រូតេអ៊ីនកើនឡើងនោះតម្លៃគីឡូម៉ែត្រកើនឡើងតម្លៃកើនឡើងដែលបណ្តាលឱ្យមានភាពច្បាស់លាស់នៃការបោសសំអាតខាងក្នុងទាប។ ដូចគ្នានេះផងដែរការចងបេក្ខជនគ្រឿងញៀនទៅប្រូតេអ៊ីននៅក្នុង MIXESEs អាចបណ្តាលឱ្យមានការប្រែប្រួលធំ ៗ នៅក្នុងលទ្ធផលនៃមន្ទីរពិសោធន៍ផ្សេងៗគ្នានិងប្រព័ន្ធផ្សេងៗគ្នា។

សំណួរៈការប្រមូលផ្តុំនៃប្រូតេអ៊ីនដែលបានណែនាំថ្លាក្នុងសៀវភៅណែនាំស្តីពីការដឹកនាំនៃដំណាក់កាលទី 1 i ឬដំណាក់កាលទី 1 MG / ML 1 MG / ML មានន័យថានៅពេលប្រើ mainte នេះមុនពេលបន្ថែមវាទៅប្រព័ន្ធនេះ?

ចម្លើយៈ មិនចាំបាច់ពនលាយអតិសុខុមទស្សន៍ដែលមានរាងពងក្រពើជាមុនទេ។ ការផ្តោតអារម្មណ៍នៃអតិសុខុមទស្សន៍ដែលមានលក្ខណៈនៅក្នុងឧបករណ៍គឺ 20 មីលីក្រាម / មីលីលីត្រនិងការផ្តោតអារម្មណ៍ចុងក្រោយនៃមីក្រូទស្សន៍ដែលមាននៅក្នុងប្រព័ន្ធសាកល្បងគឺ 0.1 - 1 មីលីក្រាម / មីក្រឹមដែលអាចបន្ថែមសមាមាត្របានសមាមាត្រ។

សំណួរៈតើដង់ស៊ីតេកោសិកាដែលត្រូវបានណែនាំសម្រាប់ការធ្វើតេស្តិ៍ស្ថេរភាពមេតាប៉ូលីសនៃ Hepatocytes ចម្បងយ៉ាងដូចម្តេច? តើការគណនាការបោសសំអាតគឺដូចគ្នានឹងមីក្រូធារាសាស្រ្តដែរឬទេ?

ចម្លើយ: ដង់ស៊ីតេកោសិកាដែលបានណែនាំសម្រាប់ការធ្វើឱ្យមានស្ថេរភាពមេតាប៉ូលីសមធ្យមរបស់ Hepatocyte គឺ 0.5 ទៅ 2 × 10⁶ កោសិកា / មីនីនិងការគណនាការបោសសំអាតនិងដំណើរការនៃលទ្ធផលនៃការរំលាយអាហារមិចសាស្ដ្រអតិសុខុមលេដែលមានលក្ខណៈអតិសុខុមទស្សន៍ដែលមានភាពស្ថិតស្ថេរគឺមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នា។

សំណួរៈតើគ្រឿងផ្សំសំខាន់អ្វីខ្លះនៅក្នុងសតិបណ្ដោះអាសន្ន PBS របស់អ្នក? តើវាមាន kcl និង nacl ទេ?

ចៈសមាសធាតុសំខាន់នៃសតិបណ្ដោះអាសន្ន PBS របស់យើងគឺ K₂អេសភីភី₄ និងខ₂PO₄ហើយមិនមាន kcl និង NACL ។

សំណួរៈតើអ្វីទៅជាគោលបំណងនៃសតិបណ្ដោះអាសន្នផូស្វ័រ? ហេតុអ្វីបានជាអ្នកត្រូវការផូស្វាត?

ចម្លើយៈក្រុមបញ្ញាផូផូភតត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់គោលបំណងនៃការធ្វើត្រាប់តាមបរិស្ថានសរីរវិទ្យាហើយផូស្វាតគឺជាគូសតិបណ្ដោះអាសន្នដ៏សំខាន់បំផុតមួយសម្រាប់រក្សាបរិយាកាសវត្ថុធាតុរាវរបស់រាងកាយ។

សំណួរៈតើអ្វីទៅជាការកំណត់ធម្មតាសម្រាប់អង់ស៊ីម - កំហាប់ការទទួល? តើមានដំណោះស្រាយណាមួយទេប្រសិនបើភាពរលាយនៃប្រព័ន្ធដែលត្រូវធ្វើតេស្តគឺអន់?

ចម្លើយៈការអះអាងរបស់អង់ស៊ីមត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយមានការប្រមូលផ្តុំ 3 ផ្សេងគ្នាកម្រិតនៃការផ្តោតអារម្មណ៍ត្រូវការការផ្តោតអារម្មណ៍លើការរំពឹងទុករបស់មនុស្សហើយការប្រមូលផ្តុំខ្ពស់បំផុតត្រូវបានជ្រើសរើសយ៉ាងហោចណាស់មួយលំដាប់នៃការបង្កើតថ្នាំឈាមដែលមានប្រសិទ្ធិភាពជាមធ្យមចំពោះមនុស្ស។ ប្រសិនបើភាពរលាយនៃដំណាក់កាល aqueous គឺក្រីក្រ, សារធាតុរំលាយសរីរាង្គមួយអាចត្រូវបានជ្រើសរើសជាសារធាតុរំលាយរបស់ខ្លួន, ឧ។ DMSO ប៉ុន្តែចំនួនសារធាតុរំលាយសរីរាង្គបានបន្ថែមទៅប្រព័ន្ធចាំបាច់ត្រូវគ្រប់គ្រង។

សំណួរៈនៅក្នុងការសិក្សាអំពីស្ថិរភាពមេតាប៉ូលីសតើចាំបាច់ត្រូវប្រើប្រព័ន្ធតេស្តពីរដែរប្រព័ន្ធប្រលងថ្លើមនិងថ្លើមថ្លើមសម្រាប់ការសាកល្បង?

ចម្លើយៈមីក្រូទស្សន៍ដែលមានរាងពងក្រពើគឺជិតស្វិតដៃដូចជាសំណង់ដែលបានបង្កើតឡើងដោយខ្លួនឯង។ Hepatocytes បឋមគឺជាតំបន់ Hepatocytes ដែលមានវប្បធម៌ភ្លាមៗបន្ទាប់ពីភាពឯកោរបស់សត្វលូនដែលរក្សាមុខងារមេតាប៉ូលីសជាពិសេសការថែរក្សាកម្រិតអង់ស៊ីមល្អប្រសើរជាងមុនជាមួយនឹងកម្រិតអង់ស៊ីមដែលនៅវីវី។ នៅក្នុងការសិក្សាអំពីស្ថិរភាពមេតាប៉ូលីសមិនចាំបាច់ពិចារណាលើការចំណាយទេហើយប្រព័ន្ធតេស្តពីរអាចត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការធ្វើតេស្តក្នុងពេលតែមួយ។ ឬប្រព័ន្ធសាកល្បងសមស្របអាចត្រូវបានជ្រើសរើសដោយយោងទៅតាមលក្ខណៈសម្បត្តិមេតាប៉ូលីសនៃបរិវេណហើយគោលការណ៍គឺថាប្រព័ន្ធណាដែលមានអត្រាមេតាប៉ូលីសខ្ពស់ត្រូវបានជ្រើសរើស។ ជាទូទៅមីក្រូសារីជាជំងឺថ្លើមគឺជាជម្រើសដ៏ល្អបំផុតនៅពេលដែលម៉ូលេគុលបរិវេណមានទឹកច្រើន - រលាយហើយមួយ - មេតាប៉ូលីសដំណាក់កាលគឺជាផ្លូវមេតាប៉ូលីសសំខាន់ (ជាពិសេសតាមរយៈ Cyp); នៅពេលដែលពីរ - មេតាប៉ូឡូញដំណាក់កាលគឺផ្លូវដ៏សំខាន់ hydrolyis គឺជាផ្លូវមេតាប៉ូលីសដ៏សំខាន់នៅក្នុង mailin ថ្លើមគឺខ្ពស់ណាស់ហើយមិនច្បាស់នៅក្នុង mailperes នេះការធ្វើតេស្តនេះអាចត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើ Hepatocytes បឋមអាចត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើ Hepatocytes បឋមអាចប្រើបាន។

សំណួរៈតើការផ្តោតអារម្មណ៍នៃមីក្រូហ្វូនដែលបានពិនិត្យក្នុងការធ្វើតេស្តស្ថិរភាពមេតាប៉ូលីសដែរឬទេ? តើអ្វីទៅជាផលប៉ះពាល់ខ្ពស់ពេកឬទាបពេក?

ចម្លើយ: ក្នុងការធ្វើតេស្តិ៍ស្ថេរភាពមេតាប៉ូលីសក៏នឹងជះឥទ្ធិពលដល់អត្រារំលាយអាហារជាធម្មតាជ្រើសរើសការផ្តោតអារម្មណ៍ប្រូតេអ៊ីនមីក្រូទស្សន៍ 0.1 Mg / ML 1 មីលីក្រាម / ម។ ល។ កំហាប់នៃប្រូតេអ៊ីនមីក្រូហិរញ្ញវត្ថុខ្ពស់ពេកនឹងនាំឱ្យមានការចាត់ចែងមិនជាក់លាក់នៃថ្នាំប្រូតេអ៊ីនមីក្រូ។ ខណៈពេលដែលការផ្តោតអារម្មណ៍នៃប្រូតេអ៊ីនមីក្រូហិរញ្ញវត្ថុអាចនាំឱ្យមានការរំលាយអាហារមិនសំខាន់នៃថ្នាំ។