Meriv çawa ji bo Assay Comet Slides amade dike
EwComet Assay, Di heman demê de wekî yekjimar elektrophoresis jî tê zanîn, ji bo quweta DNA di hucreyên kesane de teknolojiyek hesas û berbiçav e. Amadekirina Bilind - QalîteyaSlide Comet AssayS gavek krîtîk e ku pêbawer û paşvexistina encamên Assayetê diyar dike. Vê gotarê armanc dike ku rêbernameyek berfireh peyda bike li ser amadekirina dirûşmên ji bo Comet Comet Em ê her pêngavek girîng biparêzin, ji hilbijartina hucreyê ji bo şîrovekirina daneyê, misogerkirina encamên çêtirîn gengaz.Danasîna Comet Assay û girîngiya wê
● View View of Comet Assay
Comet Assay, di dawiya salên 1980-an de pêşve çû, amûrek hêzdar e ji bo tespîtkirina dna strand di hucreyên eukaryotîk ên kesane de vedişêre. Ew di warên wekî ceribandina genotoxîkî de, epidemiolojiya molekulî, û biyomonitoravdêriya jîngehê tê bikar anîn. Prensîba Assayê Comet di nav hucreyan de di nav agarose de vedike, da ku ew ji bo şopandin û proteînan derxînin û dûv re mijara Elektrophoresisê derxînin. Wêneyê encam, mîna komek, dihêle ku zirarê DNA zirarê bide.● Serlêdanên DNNA DNN DNA
Assorên Comet bi taybetî di tespîtkirina zirara DNA de ji sedema ku ji hêla toksên hawirdorê, radyasyonê, û dermanxaneyê ve hatine nirxandin. Ew di heman demê de di nirxandina karanîna mekanîzmayên tamîrkirina DNA de di celebên hucreyên cûda de rolek bingehîn lîstin. Lekolînwanan ji bo xwendina kanserê, pîrbûn, û nexweşiyên din ên ku bi zirarê DNA ve girêdayî ne bikar tînin.● Di ceribandina genotoxîkî de girîng e
Girîngiya rêziknameyê û lêkolînê ya Assays Comet nayê fêm kirin. Ew ji bo naskirina pêkhateyên genotoxîkî yên potansiyel wekî amûrek pêşandana pêşîn a pêşîn xizmet dikin. Encamên ji van tezmînatan dikarin bandorê li biryarê bikin - çêkirina pêvajoyên di pêşveçûna derman û nirxandinên ewlehiya jîngehê de.Hilbijartina hucreyên guncan ji bo Comet Assay
● celebên hucreyên bikar anîn
Hilbijartina hucreyan dikare bi girîngî bandorê li encama encama komek comet bike. Hucreyên gelemperî têne bikar anîn lymfocytes, hucreyên buccal, û xetên hucreyên çandî yên cûda. Lekolînwanan bi gelemperî li ser bingeha armancên xwendinê û hêsankirina nimûneyan celebên hucreyan hilbijêrin.● fikir ji bo bijartina hucreyê
Dema hilbijartina hucreyan, faktorên wekî hebûna hucreyê, hişmendiya zirarê DNA, û têkildarî pirsa lêkolînê bifikirin. Mînakî, lîmfocytes bi hêsanî ji xwînê têne wergirtin û ji bo saziyên genotoxî hesas in, ji bo gelek lêkolînan ji wan re hilbijartinek hêja.● bandora encamên Assay
Origin û dewleta hucreyan dikare bandorê li asta bingehîn a DNA û bersiva hucreyê li dermankirinê bike. Ji ber vê yekê, hilbijartina hucreya domdar û protokolên destwerdanê ji bo wergirtina encamên pêbawer û rahijandî yên di encamên comet de girîng in.Amadekirina gelên Agarose
● celebên karanîna agarose
Hilbijartina agarosê rast ji bo yekrêziya Comet Comet e. Agarosa Melting kêm tê tercîhkirin ji ber ku ew di dema pêvajoyê de zû zirarê dide DNA. High - Agarose Quality ji pêşkêşkerên navdar, wek yên ku ji wan re peydakerek pêbawer a Serhildêr an Comet Assay hilberîner, tê pêşniyar kirin.● HIYARN AGARSE AND PIRTKA PIRSNGEHA
Bi gelemperî, 1% hejmareke mezin a mele ya Agarose-ê tête bikar anîn. Agarose di bufferek guncan de belav bikin, wê germ bikin heya ku bi tevahî were mel kirin, û dûv re germahiya germê ya ku ji bo hucreya hucreyê ewle ye. Piştrast bike ku Agarose ji bubbles û dek û dolaban azad e da ku ji huneran di navbarê de hunermendan dûr bixe.● piştrastkirina kalîteya pirtirîn
Qalîteya gel a Agarose dikare bandor li ser hişmendî û paşvexistina Assay bike. Teknîkên birêkûpêk û amadekirina amadekar ji bo hilberîna gelek homojen bi taybetmendiyên domdar ên li seranserî dirûşmên cihêreng hene. Vê yekê piştrast dike ku pêkanîna komê û dîtbar yekalî ne.Hucreya sekinandina hucreyê û hucreyên di Agarose de
● Amadekirina rawestandina hucreyê
Dest bi bidestxistina yek guhdarî bikin - rawestandina hucreyê. Ji bo hucreyên çandî, ev tê de trypsinization, li pey neutralization û şuştinê. Ji bo hucreyên seretayî yên mîna lîmfocytes, centrifugation û resuspension di bufferek maqûl de hewce ne. Hemocytometer bikar bînin da ku hucreyek hucreyê bi qasî 1 x 10 ^ 5 hucreyên / ml peyda bikin.● Hucreyên tevnvîsê di Agarosa Melting ya kêm de
Hucreya hucreyê bi PRE - li ser rêjeya mestir a ku dîlgirtina yekalî ya hucreyan pêbawer dike Zû zûtirîn tevliheviyê li ser Pre - Slides Comet Comet Comet, ku dikare ji kargehek Comet Comet Assay an dabînkerek pêbawer bikire. Vebijêrkek bikar bînin da ku Agarose bi rengek wekhev belav bikin û pêşî lê bigirin.Hucreyên belavkirina li ser dirûşmeyan
Piştî ku agaros belav bibe, destûr bide ku dirûşmên li ser erdek sar an qada sarbûnê bişewitînin. Pêdivî ye ku ev pêngav bi bandor were kirin da ku nehêle ku Agarose ji sazkirina bi tundî were girtin, ku dikare li ser dîtbariya comets di dema analîzê de bandor bike.Lîza hucreyên li ser dirûşmeyan
Compositionareserkirina çareseriya Lysis
Soleşeya Lys bi gelemperî hûrguliyên xwê û paqijan, wek Nacl, edta, û Triton X - 100, ku bi bandorek hucre û proteînan derxînin dema ku DNA bêhnvedanê dûr bixin.● Procedureert û mercên Lys
Di çarçoveya Lys de dirûşmên li Lysesê bişkînin û bi kêmî ve 1 saetan li 4 ° C binpê bikin, her çend incubation bi gelemperî pir caran tercîh dikin. Piştrast bike ku tankê lîsansê tê veşartin da ku ji holê rabikin û nehiştin. Conditionsertên pêngava Lysayê ji bo rakirina pêkhateyên hucreyî bêyî ku DNA hilweşînin girîng in.● Girîngiya Lîza Hucreya bêkêmasî
Lîza bêkêmasî dikare bibe sedema pêkanîna comet û daneyên nebawer. Ji ber vê yekê, pêdivî ye ku protokola lîzê bi rengek berbiçav bişopîne, çareserkirina çareseriyê li hemû parçeyên dirûşmeyê têkeve û ew demên înkarkirinê ji bo astengkirina hucreya bêkêmasî bes e.Alkaline Rasting û Elektroproforesis
● Amadekirina çareseriya alkaline
Solutionareseriya alkaline, bi gelemperî tevliheviyek naoh û EDTA, tê bikar anîn da ku DNA were rakirin. Amadekirina wê divê bi baldarî were kirin, piştrastkirina ph û molarity rast. Ji nû ve çareseriyê amade bikin da ku bandora xwe biparêze.● Girîngî û demên nexwendî yên Alkaline
Di çareseriya alkaline de dirûşmên incubate, bi gelemperî ji bo 20 - 40 hûrdeman, da ku destûrê bide DNA. Ev pêngav ji bo tespîtkirina single - Strand Breaks û Alkali - Malperên Labile. Li ser bingeha protokola xwe ya taybetî û celebê taybetî ya bêkêmasî ya çêtirîn xweşbîn bikin.Setup û Parametreyên Elektrophoresis
Tankên elektrophoresis bi bufferek elektrophoresis a alkaline sar saz bikin. Slides di tankê de bicîh bikin, ew piştrast kirin ku ew bi tevahî têne binav kirin. Voltaja domdar bicîh bikin (bi gelemperî li dora 25 v) ji bo 20 - 30 hûrdem. Conditionsertên elektrophoresis, di nav de voltaja û wext, divê xweşbîn bibin da ku çareseriya çêtirîn ya koçberiya DNA bidest bixin.Pêvajoya Nexşandî û Staining
● Amadekirina bufferasyona tunekirinê û karanîna
Piştî electrophoresis, ji diruşmeyan aciz bikin da ku bertek nîşan bidin û DNA bisekinin. Buçeyek neutîrasyona hevpar di bingeheke 7.5 de di bingeha tris de heye. Bi nermî di vê buffer de çend caran di vê buffer de bişikînin da ku hemî şopên çareseriya alkaline rakirin.Teknîkên Kişandin
Stain bi dna fluorescent-ê re bişewitînin - rengê bindest, wek ethidium bromide an sybr kesk. Bromide Ethidium, dema ku klasîk e, ji ber taybetmendiyên xwe yên mutagenîk hewce dike. Green Green bi hişmendiya bilind alternatîfek ewledar pêşkêşî dike. Di tariyê de ji bo demek guncan slides di çarçoveya stûnê de (bi gelemperî 15 - 30 hûrdem) di tariyê de.● Visualization of Comets DNA
Piştî stûnê, dirûşmên bi nermî bişon. Slides di bin mîkroskopê de lêve bikin. Qalîteya stûnê û çareseriya mîkroskopê ji bo wergirtina wêneyên zelal ên comets girîng e.Mîkroskopî û analîzên wêneyê
● hilbijartina mîkroskopê rast
Fluorescence mîkroskopek ku bi danîna fîlterê ya guncan ve hatî peyda kirin ji bo dîtina DNA ya zindî hewce ye. Mîkroskopek bi çareseriya bilind û pergala kamerayê hilbijêrin ku dikarin dîmenên berfireh ên comets bigirin.● Girtina bilind - Wêneyên Qalîteyê
Wêneyên bi kêmî ve 50 comets per slide da ku girîngiya statîstîkî piştrast bikin. Hê jî ronahî bikin û balê bikişînin da ku ji huneran dûr nekevin. Calibrasyona rastîn a mîhengên mîkroskopî û kamerayê dikare kalîteya wêneyê pir zêde bike.● Nermalava ji bo analîzên comet
Programsend bernameyên nermalavê ji bo analîzên comet hene, wek kometscore û casp. Van bernameyan wekî pîvanên mîna dirêjî, ziraviya tûj, û demek dirêj, ku ji bo quweta DNA-yê krîtîk in.Pirsgirêkên hevbeş çareser dike
Problemên hevbeş
Pirsgirêkên hevbeş di Assays Comet de fluorescence ya bilind, damezrandina comet kêm, û encamên nekêşbar ên di navbera dirûşmeyan de hene. Van pirsgirêkan dikarin ji çavkaniyên cihêreng, di nav de destwerdana hucreya belengaz, amadekirina gelê ya suboptimal, û Lysrên çewt û electrophoresis.● çareseriyê û tedbîrên pêşîlêgirtinê
Ji bo mitiation fluorescence ya bilind, piştrast bikin ku hemî reagent û gel ji konteyneran azad in. Ji bo avakirina kêmbûna kêm, verast bikin ku vînasiya hucreyê bilind e, û şertên lyszê xweş e. Amadekirina dirûşmeya domdar û adeta protokola ya bêkêmasî tedbîrên pêşîlêgirtinê yên girîng e.● DESTPKIRINA REFROUCTY R RZAN
Gihîştina ku di encamên Comet Comet de nûvekirin hewce dike ku protokola protokola hişk û erêkirina birêkûpêk ya her pêngavê bigire. Bi rêkûpêk alavên calibrate, bilind bikar bînin - reagentên kalîteyê bikar bînin, û tomarên berfireh ên hemî şertên ezmûnî biparêzin da ku rastiyê piştrast bikin.Encamên şîrovekirin û encamên ragihandinê
● Parametreyên Tail Comet analîzkirin
Parametreyên sereke yên ji bo quweta DNA dirêjahiya tîrêjê, ya ku di asta koçberiya DNA de nîşan dide, û ziraviya tavê nîşan dide, ku dna di tifingê de nîşan dide. Momentêwaza zeytûnê, pîvanek berhevok, bi gelemperî tête bikar anîn.Di raporkirina daneyê de fikrên statîstîkî
Ji bo şîroveya daneyê analîzên statîstîkî yên rast girîng e. Testên statîstîkî yên guncandî bikar bînin da ku astên zirarê yên DNA di navbera komên nimûneyên cûda de berhev bikin. Piştrast bike ku daneyên ji gelek dirûşm û ezmûnan ji bo guheztina guhastinê têne hesibandin.● Lêpirsînkirin û Danûstandinan
Encamên xwe bi awayek zelal û berbiçav pêşkêş bikin, ku graf û tabloyan bikar bînin da ku lêgerînên kilît bikin. Nîqaş bikin ku encamên astên zirarê yên DNA hatine dîtin û bandora potansiyela li ser pergala biyolojîk di bin xwendinê de.Encamname: Destkeftina High - Slides Comet Comet Comes
Amadekirina Bilind - Slides Comet Comet Comes Comes Commely Infally Indication Pêdivî ye ku her gav bi rengek berbiçav û standard were standin û standard bikin ku encamên pêbawer û nûvekirin. Bi Hevkariyên Comet Comet Cometable Supplierers û Hilberîner dikarin bi peydakirina bilindbûna bilindbûnê kalîteya we bilind bikin - Materyalên Grade û Piştgiriya Teknîkî.● AboutIphaseBiosciences
Serokatiya li North Wales, Pennsylvania, Pennsylvania, Pispor, roman, û nûjen "Bilind e" High. Tech Enterprise Integrating Lêkolîn, Pêşveçûn, Hilber, Firotin, û Karûbarên Teknîkî yên Reagentên Biyolojîk ên Nûjen. Ji bo lêkolîna zanistî, tîmê me yê zanistî, tîmê me yê zanistî, ji zêdetirî 50 pisporên mecrîd ên ku ji bo zanyariyên li seranserê zanyariyên li seranserê zanyariyên li seranserê zanyariyên li seranserê zanyariyê têne hesibandin. Li ser "Reagentên nûjen ên ku di pêşerojê de" Reşên nûjen, li Dewletên Yekbûyî, navendên firotanê, navendên firotanê, sazûmanên firotanê, sazûmanên danûstendinê, li welatên Asyayî yên rojhilatê hatine damezirandin.Demjimêra paşîn: 2024 - 08 - 28 14:05:21