ສົງໄສ

ຖາມ: ຂ້ອຍຄວນເລືອກ microsomes ແລະ hepatocytes ແນວໃດສໍາລັບການສຶກສາກ່ຽວກັບຄວາມທົນທານໃນການຄວບຄຸມທາດແຫຼວ? ຂ້ອຍສາມາດເລືອກເອົາພຽງແຕ່ຫນຶ່ງໃນນັ້ນເພື່ອປະຕິບັດຄວາມຮຽກຮ້ອງຕ້ອງການບໍ?

A: ໃນການສຶກສາທີ່ຢູ່ອາຫານ, ການເລືອກຂອງ microsomes ຕັບສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນຂື້ນກັບຄຸນລັກສະນະຂອງທາດຍ່ອຍຂອງທາດປະສົມ, ໃນຂະນະທີ່ຫນຶ່ງທີ່ມີອັດຕາສ່ວນທີ່ມີຄວາມສູງ. ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, microsomes ຕັບມັກ, ໂດຍສະເພາະໃນເວລາທີ່ໂມເລກຸນປະສົມແມ່ນນ້ໍາຫຼາຍ - ເສັ້ນທາງ metabolic ຕົ້ນຕໍແມ່ນເສັ້ນທາງ metabolic ຕົ້ນຕໍ (ໂດຍສະເພາະຜ່ານ CYP). hepatocytes ອາດຈະຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການທົດລອງເມື່ອມີຫຼັກຖານຂອງສອງເສັ້ນເປັນເສັ້ນທາງ metabolic, hydrolysis ຜູກເນື້ອເຍື່ອສູງຂອງ microsomes ຕັບ, ແລະການຍ່ອຍອາຫານໃນຕັບແຂງບໍ່ໄດ້ເຫັນໄດ້ຊັດເຈນ. ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວ, ລະບົບການເຜົາຜານອາຫານຫນຶ່ງສາມາດຖືກເລືອກໃຫ້ຕອບສະຫນອງຄວາມຕ້ອງການ; ຖ້າເງື່ອນໄຂໃນທຸກດ້ານທີ່ອະນຸຍາດ, ມັນແນ່ນອນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະເລືອກເອົາທັງສອງລະບົບໃນເວລາດຽວກັນ.

ຖາມ: ເປັນຫຍັງຈຶ່ງຈໍາເປັນຕ້ອງໃຊ້ hepatocytes ປະຖົມສໍາລັບການກະຕຸ້ນ iszyme?

A: iszyme ທີ່ກໍາລັງເຮັດເຊັ່ນນັ້ນ "ການແປພາສາ", "ການແປພາສາ - ການດັດແປງໂປຕີນ ສະນັ້ນ, ລະບົບການທົດສອບຄວນເປັນຈຸລັງຕັບ, ບໍ່ແມ່ນການປອມແປງຕັບຫຼືຕັບ S9.

ຖາມ: ເປັນຫຍັງຂ້ອຍຈໍາເປັນຕ້ອງເລືອກຮູບແບບວັກຕົ້ນປະຖົມມະນຸດ 3 ຫນ່ວຍສໍາລັບການກະຕຸ້ນ iszyme?

A: ອີງຕາມຄໍາແນະນໍາສໍາລັບການພົວພັນກັບຢາເສບຕິດ, ຢ່າງຫນ້ອຍສາມທຶນຄວນຈະຖືກນໍາໃຊ້, ແລະຜົນໄດ້ຮັບຂອງຜູ້ໃຫ້ແຕ່ລະຄົນຄວນປະເມີນຜົນຕ່າງຫາກ. ນອກເຫນືອຈາກການຜະລິດຜົນທີ່ສໍາຄັນທາງດ້ານສະຖິຕິ, ການເລືອກຂອງສາມຜູ້ໃຫ້ທຶນສໍາລັບການທົດລອງກໍ່ແມ່ນສິ່ງທີ່ສໍາຄັນກວ່າສໍາລັບການປະເມີນຄວາມແຕກຕ່າງ. ຖ້າຫາກວ່າຜົນໄດ້ຮັບຈາກຢ່າງຫນ້ອຍຫນຶ່ງຜູ້ໃຫ້ຫຼາຍກ່ວາລະດັບທີ່ກໍານົດໄວ້ລ່ວງຫນ້າ, ຜູ້ສະຫມັກຢາເສບຕິດອາດຈະເປັນທີ່ຍອມຮັບແລະປະຕິບັດຕາມການປະເມີນຜົນ.

ຖາມ: ເປັນຫຍັງຈຶ່ງເອົາໃຈໃສ່ພຽງແຕ່ Induction enzyme cym ແລະບໍ່ແມ່ນ induction enzyme ugt?

A: ເຫດຜົນສໍາລັບການສຸມໃສ່ການ indique cypase ແມ່ນວ່າກົນໄກຂອງການ induction cypase ໄດ້ຖືກສຶກສາຢ່າງຈະແຈ້ງກວ່າ. ໃນຄໍາສັບຕ່າງໆອື່ນໆ, ເຫດຜົນທີ່ບໍ່ຕ້ອງການການສຶກສາກ່ຽວກັບການກະຕຸ້ນຂອງ ugtase ແມ່ນວ່າກົນໄກຍັງບໍ່ຈະແຈ້ງ; ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ນີ້ບໍ່ໄດ້ຫມາຍຄວາມວ່າ ugtase ຈະບໍ່ຖືກກະຕຸ້ນ. ຄໍາແນະນໍາຍັງລະບຸວ່າບໍ່ມີລະບົບການຈັດປະເພດແບບມາດຕະຖານສໍາລັບນັກຜະລິດເຂົ້າຫນົມຫຼືຜູ້ຂົນສົ່ງຂອງຜູ້ຂົນສົ່ງແລະໄລຍະການ metabolism metabolism.

ຖາມ: ວັກປະຖົມສາມາດຢູ່ລອດໄດ້ດົນປານໃດຫຼັງຈາກການຟື້ນຟູຄືນໃຫມ່, ແລະ hepatocentes ຈະໄດ້ຮັບການຮັກສາໂດຍບໍ່ມີການຮັກສາວັດທະນະທໍາໂດຍບໍ່ມີການຮັກສາວັດທະນະທໍາຫລັງຈາກ resuscitation?

A: hepatocytes ປະຖົມ pasteurized ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍທົ່ວໄປສໍາລັບການ asyays assays assays. ຫຼັງຈາກການຟື້ນຕົວຂອງຈຸລັງ, ຈຸລັງຖືກໂຈະໃນແຜ່ນທີ່ແຜ່ຂະຫຍາຍສື່ກາງ, ປັບຕົວເຂົ້າກັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ເຫມາະສົມ, ແລະສ້າງວັດທະນະທໍາ - ແຜ່ນເຄືອບ; ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ຈຸລັງສາມາດປອກເປືອກໄດ້ພາຍໃນ 4 ~ 6 ຊົ່ວໂມງ. ຫຼັງຈາກທີ່ຢູ່ໃນຈຸລັງຕິດຢູ່ກັບກໍາແພງ, ສື່ກາງບໍາລຸງຮັກສາແມ່ນຖືກທົດແທນແລະຮັກສາໄວ້ເປັນເວລາ 18 ຊົ່ວໂມງເພື່ອຮັບປະກັນການຟື້ນຟູຂອງຈຸລັງ. ຕໍ່ໄປ, iszyme Induction Assay ສາມາດປະຕິບັດໄດ້ເພື່ອກວດພົບກິດຈະກໍາການຍ່ອຍອາທິດແລະລະດັບການກະຕຸ້ນ MRNA. ຈາກທັດສະນະຂອງວົງຈອນການທັງຫມົດ, hepatocytes ສາມາດຮັກສາໄດ້ສໍາລັບ 6 ~ 7 ມື້ຫຼັງຈາກຍຶດສາຍ. ເມື່ອເວລາຜ່ານໄປ, ສະຫະລັດ Adpe Walled Adere ຊຸດໂຊມລົງ, ແລະຈຸລັງຈະ detach ແລະໂຈະ.

ຖ້າ haptureyptes ທີ່ຍຶດຫມັ້ນບໍ່ໄດ້ຮັບການຢັ້ງຢືນວ່າ, ພວກເຮົາໄດ້ຮັບການຢັ້ງຢືນວ່າພວກເຂົາສາມາດຮັກສາໄດ້ໃນສະພາບທີ່ດີພາຍໃນ 4 ~ 6 ຊົ່ວໂມງ. ພວກເຮົາຍັງບໍ່ທັນໄດ້ປະຕິບັດການຢັ້ງຢືນເປັນໄລຍະເວລາດົນກວ່າເກົ່າ.

q: hepatococytes ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ໄດ້ທັງການ suspension ແລະຈຸລັງທີ່ຍຶດໄດ້ແມ່ນຂື້ນກັບສື່ວັດທະນະທໍາທີ່ແຕກຕ່າງກັນທີ່ໃຊ້?

A: ຈຸລັງສ່ວນຫຼາຍຈາກເນື້ອເຍື່ອແຂງແລະອະໄວຍະວະຕ່າງໆມີກໍາແພງ, ແຕ່ບໍ່ແມ່ນຈຸລັງທັງຫມົດທີ່ມີຢູ່ໃນເວລາທີ່ມີວັດທະນະທໍາໃນ - vitro. ບໍ່ວ່າຈຸລັງແມ່ນກໍາແພງ - admengent ຫຼືບໍ່ແມ່ນຂື້ນກັບສະພາບຂອງຈຸລັງຕົວເອງ; ໃນເວລາດຽວກັນ, ກໍາແພງ - ຈຸລັງ adherent ຕ້ອງການຂະຫນາດກາງສະເພາະແລະບາງສ່ວນພິເສດ ໃນການສະຫລຸບ, ຈຸລັງທີ່ຕິດສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເປັນຈຸລັງທີ່ໂຈະ, ແຕ່ວ່າຈຸລັງ suspension ແມ່ນບໍ່ມີການນໍາໃຊ້ທີ່ຕິດຕາມ.

ຖາມ: ຂໍ້ດີ / ຂໍ້ເສຍປຽບຂອງການໃຊ້ hepatocentes suspension ຂອງ heptocentes ຕິດແມ່ນຫຍັງ? ເງື່ອນໄຂການຕັດສິນໃຈແມ່ນຫຍັງ?

A: ຫຼັງຈາກ hepatocytes ແມ່ນໂດດດ່ຽວ, ພວກເຂົາສາມາດໄດ້ຮັບການເອົາໃຈໃສ່ໃນການໂຈະຫຼືໃນກໍາແພງທີ່ຍຶດຫມັ້ນ. ກິດຈະກໍາຂອງ cytochrome p450 enzyme ປະມານ haptocentes ປະຖົມແມ່ນສອດຄ່ອງທີ່ສຸດກັບໃນການຂອງໃນ 4 ~ 6h, ຫຼັງຈາກນັ້ນຫຼຸດລົງຢ່າງໄວວາດ້ວຍເວລາທີ່ຍາວນານ. ເພາະສະນັ້ນ, hepatocytes suspension ແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍທົ່ວໄປສໍາລັບການສຶກສາສະຖຽນລະພາບຂອງການຍ່ອຍອາຫານຫຼືການສຶກສາທີ່ມີທາດແປ້ງ. ວັດສະດຸປະລິມານທີ່ມີຂະຫນາດປະຖົມວັດແທກໃນກໍາແພງທີ່ມີຢູ່ໃນກໍາແພງທີ່ມີຄວາມພຽງພໍໃນການຟື້ນຕົວຈາກຄວາມເສຍຫາຍເພື່ອຮັກສາຄຸນລັກສະນະທາງຊີວະພາບແລະກິດຈະກໍາໃນການຍ່ອຍອາຫານຂອງ hepatocytes ປົກກະຕິ. ເພາະສະນັ້ນ, ໂດຍທົ່ວໄປພວກມັນຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການສຶກສາ iszyme, ການສຶກສາ cytotoroxic ຢາເສບຕິດ, ຄວາມຫມັ້ນຄົງກ່ຽວກັບການຍ່ອຍອາທິດຂອງການຍ່ອຍອາຫານຊ້າຫຼືຜະລິດຕະພັນການສຶກສາ.

ປະຈຸບັນ, ພວກເຮົາບໍ່ໃຫ້ບໍລິການຊື້ສິນຄ້າ online ເວັບ. ຜະລິດຕະພັນທີ່ເພີ່ມເຂົ້າໃນກະຕ່າສິນຄ້າຫຼັງຈາກລົງທະບຽນແລະເຂົ້າສູ່ລະບົບແມ່ນສໍາລັບການອ້າງອີງເທົ່ານັ້ນ. ຖ້າທ່ານຕ້ອງການຊື້ຜະລິດຕະພັນຂອງພວກເຮົາ, ກະລຸນາຝາກຂໍ້ມູນຕິດຕໍ່ຂອງທ່ານຜ່ານຊ່ອງທາງຕິດຕໍ່ຂອງສະຫະລັດ, ແລະພວກເຮົາຈະຕິດຕໍ່ຫາທ່ານໃຫ້ສໍາເລັດບໍລິການຂອງພວກເຮົາ.

ຖາມ: ບໍ່ແມ່ນແນວໃດ?

A: ຖ້າຜູ້ສະຫມັກໃຊ້ຢາເສບຕິດທີ່ບໍ່ແມ່ນ - ໂດຍສະເພາະກັບໂປຣຕີນ miconsomom, ຜົນໄດ້ຮັບໃນຕົວກໍານົດການປ່ຽນແປງ. ໃນຂະນະທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງທາດໂປຼຕີນເພີ່ມຂື້ນ, ຄຸນຄ່າຂອງ KM ຈະເພີ່ມຂື້ນ, ເຊິ່ງເປັນຜົນກະທົບໃນລະດັບທີ່ຄາດຄະເນໄວ້ໃນລະດັບຕ່ໍາ. ນອກຈາກນີ້, ການຜູກມັດຂອງຜູ້ສະຫມັກຢາເສບຕິດໃນການຊ່ວຍເຫຼືອໃນ microsomes ສາມາດສົ່ງຜົນໃຫ້ມີການປ່ຽນແປງຂະຫນາດໃຫຍ່ໃນຜົນໄດ້ຮັບຈາກຫ້ອງທົດລອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະລະບົບຕ່າງໆ.

ຖາມ: ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກພຣະຄໍາພີທີ່ແນະນໍາໃນປື້ມຄູ່ມືການສິດສອນຂອງຊຸດພະຍາດ micromos, ມັນຍັງມີຄວາມຈໍາເປັນທີ່ຈະເຮັດໃຫ້ພວກເຂົາເຈືອຈາງໃຫ້ພວກເຂົາເຂົ້າໃນລະບົບ?

A: ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງເຈືອຈາງ microsomes hepatic ກ່ອນ; ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຈຸນລະພາກ Hepatic ແມ່ນ 20 ມລກແມ່ນ 20 ມລກແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ microsoMes ຂອງຕັບອັກເສບໃນລະບົບທົດສອບແມ່ນ 0.1 - ເຊິ່ງ ml, ເຊິ່ງສາມາດເພີ່ມສັດສ່ວນໄດ້.

ຖາມ: ຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງຈຸລັງທີ່ແນະນໍາສໍາລັບການທົດສອບຄວາມຫມັ້ນຄົງໃນການຄວບຄຸມທາດແປ້ງຂອງ hepatocytes ຕົ້ນຕໍແມ່ນຫຍັງ? ແມ່ນການຄິດໄລ່ການເກັບກູ້ກໍ່ຄືກັນກັບ microsomes ຕັບ?

A: ຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງຈຸລັງທີ່ແນະນໍາສໍາລັບຄວາມຫມັ້ນຄົງໃນລະບົບທາດແປ້ງຂະຫນາດໃຫຍ່ແມ່ນ 0.5 ຫາ 2 × 10⁶ ຈຸລັງ / ມລ, ແລະການຄິດໄລ່ການເກັບກູ້ແລະການປຸງແຕ່ງຜົນຂອງຜົນຂອງຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງໂຣກເຍື່ອຫຸ້ມສະຫມອງອັກເສບ hepatic ແມ່ນສອດຄ່ອງ.

ຖາມ: ສ່ວນປະກອບສໍາຄັນໃນ pbs ຂອງທ່ານແມ່ນຫຍັງ? ມັນມີ KCL ແລະ NACL ບໍ?

A: ສ່ວນປະກອບຫຼັກຂອງ buffer pbs ຂອງພວກເຮົາແມ່ນ k₂HPO₄ ແລະ kh₂PO₄, ແລະບໍ່ມີ KCL ແລະ NACL.

ຖາມ: ຈຸດປະສົງຂອງຟອສເຟດ Buffers ແມ່ນຫຍັງ? ເປັນຫຍັງທ່ານຕ້ອງການ phosphate?

A: phosphate buffers ໄດ້ຖືກຄັດເລືອກເພື່ອຈຸດປະສົງຂອງພວກເຂົາໃນການປະຕິບັດສະພາບແວດລ້ອມດ້ານວິທະຍຸ, ແລະຟອສເຟດແມ່ນຫນຶ່ງໃນຄູ່ປ້ອງກັນທີ່ສໍາຄັນທີ່ສຸດສໍາລັບຮັກສາສະພາບແວດລ້ອມຂອງຮ່າງກາຍ.

ຖາມ: ການຕັ້ງຄ່າປົກກະຕິສໍາລັບ Enzyme - Iduced Conptration ແມ່ນຫຍັງ? ມີວິທີແກ້ໄຂຖ້າວ່າການລະລາຍຂອງລະບົບທີ່ຈະໄດ້ຮັບການທົດສອບແມ່ນຜູ້ທຸກຍາກບໍ?

A: aszyme asyay ຕ້ອງໄດ້ຕັ້ງຄ່າກັບ 3 ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ, ລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ມີປະສິດຕິຜົນສູງສຸດກ່ວາຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງເລືອດທີ່ມີປະສິດຕິຜົນສູງກວ່າມະນຸດ. ຖ້າຫາກວ່າການລະລາຍໃນໄລຍະທີ່ມີນ້ໍາຫນັກແມ່ນຜູ້ທຸກຍາກ, ສານລະລາຍອິນຊີສາມາດຖືກເລືອກເປັນສານລະອຽດຂອງມັນ, ເຊັ່ນ: E.G. DMSO, ແຕ່ຈໍານວນເງິນຂອງສານລະລາຍທີ່ເພີ່ມເຂົ້າໃນລະບົບຕ້ອງໄດ້ຮັບການຄວບຄຸມ.

ຖາມ: ໃນການສຶກສາຄວາມອົດທົນໃນການສຶກສາກ່ຽວກັບການທົດສອບຄວາມສາມາດ, ມັນຈໍາເປັນທີ່ຈະໃຊ້ສອງລະບົບທົດສອບ, Microsoft ຕັບອັກເສບແລະ hepatocytes ຕົ້ນຕໍ, ສໍາລັບການທົດສອບ?

A: microsoomes hepatic ແມ່ນຕົວອັກສອນທີ່ມີເນື້ອເຍື່ອຂະຫນາດໃຫຍ່ທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍຕົນເອງ. hepatocytes ປະຖົມ (Phcs) ແມ່ນ hepatocytes ທີ່ໄດ້ຮັບການເອົາໃຈໃສ່ໂດຍກົງຫຼັງຈາກທີ່ມີຄວາມໂດດດ່ຽວໂດຍກົງກັບຫນ້າທີ່ຂອງຕັບ, ໂດຍສະເພາະການຮັກສາລະດັບການຍ່ອຍອາຫານ, ໂດຍສະເພາະການຮັກສາລະດັບ enzyme ທີ່ສອດຄ່ອງກັບຜູ້ທີ່ຢູ່ໃນ vivo. ໃນການສຶກສາຄວາມຫມັ້ນຄົງໃນການສຶກສາ, ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງພິຈາລະນາຄ່າໃຊ້ຈ່າຍ, ແລະລະບົບທົດສອບສອງຢ່າງສາມາດເລືອກໄດ້ສໍາລັບການທົດສອບໃນເວລາດຽວກັນ; ຫຼືລະບົບການທົດສອບທີ່ເຫມາະສົມສາມາດເລືອກໄດ້ຕາມຄຸນສົມບັດໃນການຍ່ອຍອາຫານຂອງສານປະສົມ, ແລະຫຼັກການແມ່ນວ່າລະບົບໃດທີ່ມີອັດຕາການເຜົາຜານທີ່ສູງ. ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, microsomes ຕັບແມ່ນເປັນທາງເລືອກທີ່ດີທີ່ສຸດໃນເວລາທີ່ໂມເລກຸນທີ່ມີນໍ້າຫຼາຍ - ເສັ້ນທາງ metabolic ຕົ້ນຕໍແມ່ນເສັ້ນທາງ metabolic ຕົ້ນຕໍ (ໂດຍສະເພາະຜ່ານ CYP); ໃນເວລາທີ່ສອງ - ເສັ້ນທາງຕົ້ນຕໍແມ່ນເສັ້ນທາງຕົ້ນຕໍ, hydrolysis ແມ່ນຈຸດປະສົງຂອງການຍ່ອຍອາຫານຕົ້ນຕໍ, ແລະການທົດສອບທາດແຫຼວແມ່ນບໍ່ສາມາດດໍາເນີນການໄດ້ໂດຍໃຊ້ hepatocytes ປະຖົມ.

ຖາມ: ແມ່ນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Microsoft ທີ່ກວດກາໃນການທົດສອບຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງທາດພະຍາກອນບໍ? ຜົນກະທົບຂອງການສູງເກີນໄປຫຼືຕໍ່າເກີນໄປບໍ?

A: ໃນການທົດສອບຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງທາດໂປຼຕີນ, ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວ, ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວ, ການເລືອກໂປຣຕີນທີ່ຄວນເລືອກເອົາຫຼາຍປານໃດທີ່ມີທາດໂປຼຕີນຈາກຄຸນສົມບັດ. ສູງເກີນໄປທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກ miclesom ຈະນໍາໄປສູ່ການທີ່ບໍ່ແມ່ນ - ການຜູກມັດສະເພາະຂອງຢາກັບທາດໂປຼຕີນຈາກ microsomal; ໃນຂະນະທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕໍ່າເກີນໄປອາດຈະເຮັດໃຫ້ການເຜົາຜານຢາເສບຕິດທີ່ບໍ່ສໍາຄັນຂອງຢາ.