„IPhase“ tirpalai, skirti tirti siRNR vaistą in vitro metabolizmo tyrimuose

„IPhase“ tirpalai, skirti tirti siRNR vaistą in vitro metabolizmo tyrimuose

Nukleorūgščių vaistai, atsižvelgiant į unikalias technologines savybes, pastaraisiais metais tapo naujų vaistų kūrimo dėmesiu. Nukleorūgščių vaistai apima mažą trikdančią RNR (siRNR), antisense oligonukleotidus (ASO), mikroRNR (miRNR), mažą aktyvinančią RNR (SARNA), pasiuntinio RNR (mRNR), aptamerai ir antikūnų - narkotikų konjugatai (ADC), yra genų terapijos formos. Tarp jų, siRNR vaistai, kaip taškas, atliekant nukleorūgščių vaistų tyrimus ir vystymąsi, buvo plačiai naudojami kuriant naujus vaistus dėl didelio genų nutildymo efektyvumo, kontroliuojamo šalutinio poveikio ir lengva sintezės. Tikimasi, kad jie bus perspektyviausi vaistai naujiems vaistams vystytis po mažų molekulių ir antikūnų vaistų.

1. 1. Mechanistinės įžvalgos apie siRNR narkotikų veiksmus

Maža trukdanti RNR (siRNR), dar vadinama RNR nutildymu, trumpa trikdančia RNR arba ne - koduojančia RNR, susideda iš trumpų dvigubų - surištų RNR molekulių, paprastai 21–25 bazinių porų. Po sintezės siRNR patenka į ląstelę per endocitozę. Dalis siRNR išeina iš lizosominio skilimo ir patenka į citoplazmą, kur ji yra įtraukta į RNR - sukeltą nutildymo kompleksą (RISC). RISC viduje siRNR atsipalaiduoja į dvi atskiras sruogas: „Sense Strand“ ir „Antisense“ sruogą. Sense sruoga yra greitai skaidoma citoplazmoje, o RISC, sujungta su antisense sruoga, yra suaktyvinta. Tada kompleksas selektyviai jungiasi prie tikslinės mRNR, palengvindamas jo skilimą ir vėlesnį skilimą. Dėl mRNR skaidymo tikslinio geno ekspresijos lygis žymiai sumažėja, galiausiai lemia genų nutildymą ir baltymų transliacijos slopinimą.

1. 2. SiRNR narkotikų metabolizmo tyrimų strategija

In vivo siRNR vaistai daugiausia metabolizuojami nuo nukleazių ir egzonukleazių, esančių plazmoje ir audiniuose, o ne pagal I ir II fazės metabolinius fermentus kepenyse. Po struktūrinių modifikacijų, šiuo metu parduodamų siRNR vaistų kraujyje sumažėjo metabolizmas. Paprastai didžiąją dalį siRNR vaistų greitai vartoja kepenys, o mažesnė dalis paskirstoma kitiems audiniams, kur vėliau juos metabolizuoja branduoliai kepenyse ar kituose audiniuose. In vivo metabolizmo tyrimams su siRNR vaistais, metaboliniai produktai paprastai nustatomi ir kiekybiškai analizuojami plazmoje, šlapime, išmatose ir tiksliniuose audiniuose (tokiuose kaip kepenys ar inkstai) iš gyvūnų modelių.

Tačiau ankstyvosiose vaistų kūrimo etapuose didelis junginių skaičius, išplėstiniai eksperimentiniai terminai ir didelės išlaidos, susijusios su in vivo tyrimais, kelia didelių iššūkių dideliems - masto junginių atrankai ir struktūriniam optimizavimui. Dėl to in vitro metabolizmo tyrimai yra ypač svarbūs ankstyvame siRNR vaistų vystymosi atrankos etape. Šie tyrimai suteikia pastebimų pranašumų, tokių kaip didelis pralaidumas ir trumpesni eksperimentiniai ciklai, kurie gali žymiai padidinti siRNR vaistų patikros efektyvumą.

1 lentelė: SiRNR vaistų metabolizmo tyrimų sistemos in vitro

1. 3. „IPhase“ atitinkami produktai