Compet шинжилгээнд слайдыг хэрхэн бэлтгэх вэ
Тухайлах ялгац гишүүнCOMET шинжилгээ, бас нэг - гар утасны гель электрофорез, бие даасан эсийн хохирлыг илэрхийлэхэд мэдрэмтгий, олон талт техник юм. Өндөр бэлтгэх - чанарCOMT ASSAY слайдs нь шалгалтын үр дүнгийн найдвартай байдал, нөхөн үржихүйн байдлыг тодорхойлдог чухал алхам юм. Энэ зүйл нь Хїхшинуудын нэгдсэн, трестестад хийлэлтийн талаархи зүйлийг бэлчелондуулж байгаа тухай мэдээллийг ашиглан уран зөгнөх, нэгдсэн зүйлийг ойлгуулах зорилготой юм. Бид Concucial алхам бүрийг Нүдний сонголтоос бүртгэх болно.Сүүлт одоогийн шинжилгээ, түүний ач холбогчид
● Compet шинжилгээний тойм
COMET шинжилгээ, 1980-аад оны сүүлээр боловсруулсан нь ДНХ-ийн эрч хүчийг илрүүлэх хүчирхэг хэрэгсэл юм. Энэ нь генотоксиомици, молекулын эпидемиологи, байгаль орчны болон байгаль орчны биомонитор гэх мэт салбарт ашиглагддаг. Сүүлт одны зарчим нь Agarose-ийн зарчимд оролцож, мембранз, уураг, уураг, Үүссэн зураг нь сүүлт одтой төстэй, ДНХ-ийн хохирлыг бууруулах боломжийг олгодог.● ДНХ-ийн хохирлыг илрүүлэх програмууд
Сүүлт одууд нь байгаль орчны хорт бодис, цацраг, эмийн эмчилгээний улмаас ДНХ-ийн хохирлыг олж илрүүлэхэд онцгой ач холбогдолтой юм. Тэд бас Нэхэмжлэх механизмын төрөл бүрийн эсийн үр дүнг үнэлэхэд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. Судлаачид COMET-ийн шинжилгээг ашиглан хорт хавдар, хөгшрөлт, ДНХ-ийн хохирол, бусад өвчнийг суралцахад COMET шинжилгээ хийдэг.● генотоксицийн тест хийх ач холбогдол
Сэтгэгдлийн шинжилгээний зохицуулалт, судалгааны ач холбогдол нь дутуу үнэлэгдэх боломжгүй юм. Тэд нэр томъёо нь боломжит генотоксик нийлбэрийг тодорхойлоход чухал урьдчилсан үзлэгээр үйлчилдэг. Эдгээр шалгалтын үр дүн нь шийдвэр гаргахад нөлөөлж чадна.Тохирох эсийн тохирох нүднүүдийг сонгох
● ашигласан эсийн төрөл
Эсийн сонголт нь сүүлт одны шинжилгээний үр дүнд мэдэгдэхүйц нөлөөлдөг. Нэмдэг ашигласан эсүүд нь лимфоцит, балчир эс, янз бүрийн соёлтой эсийн шугамуудыг агуулдаг. Судлаачид ихэвчлэн судалгааны зорилт дээр суурилсан эсийн төрлийг сонгодог бөгөөд дээж авахад хялбар байдаг.● эсийн сонголтыг харгалзан үзэх
Нүдийг сонгохдоо эсийн бэлэн байдал, ДНХ-ийн эвдрэл гэх мэт хүчин зүйлүүд, судалгааны асуултанд хандах, судалгааны асуултанд хамаарах. Жишээлбэл, лимфоцитууд нь цуснаас амархан олж авдаг бөгөөд генотоксик агентууд, олон судалгаанд мэдрэмтгий байдаг.● Ассан үр дүнд нөлөөлөх
Нүдний гарал үүсэл ба төлөв байдал нь ДНХ-ийн хохирол, эсийн эмчилгээний хариу урвалыг болон эсийн эмчилгээний хариу урвалын түвшинд нөлөөлж болно. Тиймээс, тууштай эсийн сонголт ба харьцах протоколууд нь найдвартай, нөхөн үржихүйн үр дүнг олж авахад чухал ач холбогдолтой юм.Агарзе гель бэлтгэх
● Агарозын төрлийг ашиглах
Баруун Агарозыг сонгох нь сүүлт одны шинжилгээний бүрэн бүтэн байдлын хувьд чухал юм. Бага хайлтын цэг acarose-ийг хурдан боловсруулж, боловсруулах явцад ДНХ-ийн эвдрэлийг эрс багасгаж, багасч байна. Өндөр - Итгэмжлэгдсэн командын слайдын слайдын слайд эсвэл COMET-ийн слайдын слайд, нэр хүндтэй ханган нийлүүлэгчдээс.● Агарзын концентраци ба бэлтгэлийн алхамууд
Ихэвчлэн, 1% бага хайлах цэг агуулсан агууламжийн агууламжийг ашигладаг. Agarose-ийг тохиромжтой буферт уусгана, бүрэн хайлж, дараа нь салгаж, эсхүл эсийг суулгасан температурт хөргөнө. Ховороз нь бөмбөлөг, хог хаягдлаас зайлсхийхийн тулд agarose, хог хаягдалгүй байх.● Оновчтой гель чанарыг хангах
Агарзе графикийн чанар нь шинжилгээний мэдрэмж, нөхөн үржихүйн нөлөөллийг нөлөөлж чаддаг. Зөв зохицуулалттай, бэлтгэлийн техник нь янз бүрийн слайдуудтай тууштай шинж чанартай нэгэн төрлийн шинж чанарыг бий болгох зайлшгүй шаардлагатай. Энэ нь сүүлт одууд "хэлбэр, дүрслэлийг дүрэмт хувцастай болгодог.Agarose дахь эсийн түдгэлзүүлэлт, суулгасан эсүүд
● Нүдний түдгэлзүүлэлтийг бэлтгэх
Ганцхан хэсгийг олж эхлэх - Нүдний түдгэлзүүлэлт. Соёл соёлын хувьд Лимфоцит, центрифукаци, центрифугар, төвлөрсөн, сэхээн амьдруулах, тохирох буферт хийх шаардлагатай. Ойролцоогоор 1 x 10 ^ 5 эс / мл-ийн эсийн концентрацийг баталгаажуулахын тулд гемоцитометр ашиглана уу.● Бага хайлтын цэгийн аган дээр эсийн эсүүд оруулах
Эсийн түдгэлзүүлэлтийг урьдчилан сэргийлэх - Нүдний жигд хуваарилалтыг баталгаажуулдаг харьцаатай харьцуулахад Preen Deared Point Mounted Point Mounted Point Poard acare. Холимогийг хурдан дамжуулах нь Pre - COMET TEMET-ийн слайд слайдыг хурдан худалдаж авах боломжтой. Агарозыг жигд тарааж, агаарын бөмбөлгийг жигд тархахаас сэргийлж COVERLIP ашиглана уу.● Слайд дээр эсийг тараах
Агаароз тархсаны дараа слайдыг хөргөнө, хүйтэн гадаргуу эсвэл хөргөлттэй газар нутгийг хатаана. Энэ алхамыг тэгш бус байдлаар тохируулахгүй байхын тулд энэ алхамыг үр дүнтэй болгоход үр дүнтэй байх ёстой.Слайд дээрх эсийн лизис
● лизизийн шийдлийн найрлага
Лизизийн уусмал нь ихэвчлэн NACL, EDTA, EDTO, EDTON, EDTON, EDTON, SERBANES, Membranes болон Probeins-ийг үр дүнтэй, мембран, уураг арилгаж,● лизиз журам, нөхцөл
LISSISCE-ийн шийдэлд слайдыг суулгаж, дор хаяж 1 цагийн турш 4 ° C-ээс доошгүй удаа өсгөвөрлөнө. Лизиз сав нь ууршилт, бохирдолоос зайлсхийхийн тулд хамарна. Лизистийн нөхцөл байдал нь ДНХ-ийг доройтуулахгүйгээр үүрэн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг арилгахад чухал ач холбогдолтой юм.● Бүрэн эсийн лизисийн ач холбогдол
Бүрэн бус лизиз нь хожуу сүүлт сүүлт, найдваргүй өгөгдөл үүсгэж болно. Тиймээс лизис протоколыг дагаж мөрдөх нь зайлшгүй шаардлагатай бөгөөд энэ нь слайдын бүх хэсгүүдийг нээх нь слайд, эсхүл эсийг бүрэн эс тооцоход хангалттай юм.Шүлтлэг, электрофорезийн нөхцөл байдал
● Шүлтлэг шийдлийг бэлтгэх
Шүлтлэг уусмал, ихэнхдээ NAOH, EDTA-гийн холимог, edta-гийн холимог, ДНХ-ийг тайлахад ашигладаг. Түүний бэлтгэл ажлыг сайтар боловсруулж, зөв PH ба MALLIATION-ийг баталгаажуулах ёстой. Үр дүнтэй байдлыг хадгалахын тулд шийдлийг шинээр бэлтгэ.● Шүлтлэг нь ач холбогдол, цаг хугацааг арилгадаг
Шүлтлэгийн уусмал дахь слайдыг нь ихэвчлэн 20 - 40 - 40 минутанд ашиглахыг зөвшөөрдөг бөгөөд ДНХ-д хэллэгийг ашиглахыг зөвшөөрдөг. Энэ алхам нь дангаараа илрүүлэхэд чухал ач холбогдолтой юм. - Strand Controws ба Alkali - Шугамын сайтууд. Тодорхой протокол, эсийн төрлөөс хамааран хайхрамжгүй хугацааг оновчтой болгох.● Электрофорезийн тохиргоо ба параметрүүд
Электрофорезисийн савыг хүйтэн шүлтлэг электрофоресын буфертэй тохируулна уу. Слайдыг саванд хийнэ, тэдгээрийг бүрэн живүүлнэ. Тогтвортой хүчдэлийг ашиглах (ихэвчлэн 25 v) 20 - 30 минутанд түрхэнэ. ДНХ-ийн шилжилт хөдөлгөөнийг багтаасан хамгийн хүчдэл, цаг хугацаа, цаг хугацаа, цаг хугацааг багтаасан болно.Саармагжуулалт, будалт үйл явц
● Саармагжуулах буфер бэлтгэл, ашиглах
Электрофорезийн дараа слайдыг саармагж, ДНХ-ийг тогтворжуулахын тулд слайдуудыг саармагжуулж байна. Нийтлэг төвийг сахисан буфер нь PH-ийн 7.5 дахь PH-д tris бааз агуулдаг. Шүлтлэг шийдлийн бүх ул мөрийг арилгахын тулд энэ буферийг хэд хэдэн удаа зайлж угаана.● Толбо хийх арга техник
Төвийг саармагжуулсан слайдыг флюресцент ДНХ-ээр дамжуулан толботойгоор толбо. Etidium bromide, сонгодог байх үед мутагенийн шинж чанараас шалтгаалан болгоомжтой харьцах шаардлагатай. Sybr ногоон нь өндөр мэдрэмжтэй илүү аюулгүй хувилбарыг санал болгодог. Харанхуйд тохирох цаг хугацаа (ихэвчлэн 15 - 30 минут 30 минут 30 минут) -ийг будсан уусмалд оруулаарай.● ДНХ-ийн сүүлцээг дүрслэх
Толбо хийсний дараа илүүдэл толбыг зайлуулахын тулд гулсалтыг зөөлөн зайлж угаана. Флюресцентийн микроскопын дор слайдыг шалгаж үзээрэй. Толбо чанарын чанар, микроскопын тогтоол нь оддын тодорхой зургийг олж авахад чухал ач холбогдолтой юм.Microscopy ба зургийн дүн шинжилгээ
● Зөв микроскопыг сонгох
Fluetescence Microscope-ийг зохих шүүлтүүрээр тоноглогдсон. Өндөр нарийвчлалтай, Сүүлт тоглолтын нарийвчилсан зургийг авах боломжтой микроскопыг сонго.● Өндөр түвшинд хүрч - чанарын зураг
Статистик ач холбогдол бүхий хамгийн багадаа 50 ширхэг зургийг авах. Илүү гэрэлтүүлгийг ч бай, анхаарлаа төвлөрүүл. Микроскоп ба камерын тохиргоог зохих тохируулгаа нь зургийн чанарыг сайжруулж чадна.● Compet шинжилгээнд зориулсан програм хангамж
Competcore болон CASP гэх мэт комэт дүн шинжилгээ хийх боломжтой хэд хэдэн програм хангамжийн програмууд боломжтой. Эдгээр програмууд нь сүүлний урт, сүүлний урт, сүүлний эрч хүч, сүүлний эрч хүч, сүүлний эрч хүчийг агуулдаг.Нийтлэг асуудлыг шийдвэрлэх
● нийтлэг асуудал
COMET шинжилгээний нийтлэг асуудлууд нь өндөр түвшний флюресцент, намуухан хэлбэр, слайдуудын хоорондох үр дүнг багтаасан болно. Эдгээр асуудлууд нь янз бүрийн эх сурвалжаас үүдэлтэй, эсвэл suboptimal Gel-ийн бэлдмэл, uctoptimal Gel эсвэл remishoress-ийн нөхцөл байдал.● Шийдэл, урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээ
Өндөр арын флюресцентийг бууруулах, бүх урвалж, гель нь бохирдуулагч, гель нь бохирдуулагчаас ангид байх болно. Сүүлт сүүлний формацын хувьд эсийн амьдрах чадвар өндөр, лизисийн нөхцөл байдал өндөр, лизисийн нөхцөл байдал нь оновчтой эсэхийг шалгана уу. Тогтмол слайд бэлтгэсэн бэлтгэл, нарийвчилсан протокол наалдамхай нь урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээ юм.● Нөхөн үржихүйн болон нарийвчлалыг хангах
Сэтгэгдлийн шинжилгээнд нөхөн үржихүйн байдалд хүрэх нь хатуу протокол стандартчилалт, алхам тутамд тогтмол баталгаажуулалт шаарддаг. Тоног төхөөрөмжийг тогтмол тохируулах, өндөр - чанарын урвалж, нарийвчлалтай нөхцөл байдлыг хангах, нарийвчлалтай нөхцөл байдлын талаархи дэлгэрэнгүй мэдээллийг хадгалах.Мэдээллийн тайлбар, тайлан үр дүн
● Compet сүүлний параметрүүдийг дүн шинжилгээ хийх
ДНХ-ийн эвдрэлийг тооцоолох гол параметрүүд нь сүүлний уртыг тусгасан бөгөөд сүүлний уртыг илэрхийлдэг бөгөөд сүүлний хэмжээ, сүүлний хэмжээг илэрхийлдэг. Оливын сүүлний мөч, нийлмэл хэмжилтийг ихэвчлэн ашигладаг.● Мэдээллийн тайланд байгаа статистикийн талаархи мэдээлэл
Нарийвчилсан статистикийн дүн шинжилгээ нь өгөгдлийн тайлбарт зайлшгүй шаардлагатай. ДНХ-ийн Хохирлын түвшинг өөр өөр дээжийн бүлгүүдийн хоорондох. Олон тооны слайд, туршилтаас өгөгдөл, туршилтын талаарх мэдээллийг өөрчлөх боломжтой.● олдворуудыг танилцуулах, тайлбарлах
График, хүснэгтийг ашиглан товчлуур, хүснэгт, хүснэгтийг ашиглан түлхүүрийн олдворуудыг дүрслэн харуул. ДНХ-ийн хохирлын түвшинг ажиглаж, суралцаж буй биологийн системд нөлөөлж болзошгүй нөлөөллийн үр дагаврыг ярилц.Дүгнэлт: Өндөр түвшинд хүрэх - Чанарын COMES TSSAY слайдууд
Preparing high-quality comet assay slides involves careful consideration of cell selection, agarose gel preparation, lysis conditions, electrophoresis, staining, and image analysis. Алхам бүрийг найдвартай оновчтой болгож, нарийвчлалтай, нарийвчлалтай, үр дүнтэй үр дүнг хангахын тулд нарийвчлалтай, стандартчлагдсан байх ёстой. Нэр хүндтэй сүүлт одтой слайд слайд нийлүүлэгчид, үйлдвэрлэгчид, үйлдвэрлэгчид таны шинжилгээгээр өндөр түвшинд сайжруулж чаддаг. - Ангийн материал, техникийн дэмжлэг.● тухайIPheaseБиоскитрууд
Хойд үрэл, Пенсейк хотод байрлуулсан Идеши эмэгтэй байх нь байгалийн ухаан, шинэ - бичиг болоод Борлологийн дахин оффис, техникийн үйлчилгээ. Шинжлэх ухааны судлах, санхүүгийн хувьд 50 гаруй мэргэжилтнүүдийн эрдэм шинжилгээний эрдэм шинжилгээний ажилтнуудын эрдэм шинжилгээний эрдэм шинжилгээний биологийн давтагчдад суралцагчдад зориулсан, судалгааны ажилд туслах мэргэжилтнүүдэд туслах мэргэжилтнүүдэд оролцогчдын туршид суралцагчдад тусалдаг. "Шинэлэг урвал, ирээдүйг судалж үзсэн", ирээдүйд, Европ, Европын төв, Борлуулалтын төвүүд, Борлуулалтын төвүүд, Барилгын төвүүд, Бариль, Зүүн Азийн түншүүд, Борлуулалтын төвүүд, Борлуулалтын төвүүд, Барныг, Барныг, Барныг, Зүүн Азийн эзэдБичлэгийн цаг: 2024 - 2024 - 08 - 28 14:05:25