FAQ

प्रश्नः चयापचय स्थिरता अभ्यासासाठी मी मायक्रोसोम्स आणि हेपेटोसाइट्स कसे निवडावे? आवश्यकता पूर्ण करण्यासाठी मी त्यापैकी फक्त एक निवडू शकतो?

उत्तरः चयापचय स्थिरतेच्या अभ्यासामध्ये, यकृत मायक्रोसोम्स किंवा हेपेटोसाइट्सची निवड मुख्यत: संयुगेच्या चयापचय गुणधर्मांवर अवलंबून असते, ज्यामध्ये उच्च चयापचय दर असलेली एक निवडली जाते. सर्वसाधारणपणे, यकृत मायक्रोसोम्सला प्राधान्य दिले जाते, विशेषत: जेव्हा कंपाऊंड रेणू अधिक पाणी असतात - विद्रव्य आणि एक - फेज चयापचय हा मुख्य चयापचय मार्ग आहे (विशेषत: सीवायपी मार्गे). दोन - फेज चयापचय, मुख्य मार्ग म्हणून हायड्रॉलिसिस, यकृत मायक्रोसोम्समध्ये उच्च नॉनस्पेसिफिक प्रोटीन बंधनकारक आणि यकृत सूक्ष्मजंतूंमध्ये चयापचय स्पष्ट नाही. सहसा, गरजा पूर्ण करण्यासाठी एक चयापचय प्रणाली निवडली जाऊ शकते; जर सर्व बाबींच्या अटी परवानगी देत ​​असतील तर एकाच वेळी दोन्ही सिस्टम निवडणे निश्चितच चांगले आहे.

प्रश्नः एंजाइम इंडक्शन परखसाठी प्राथमिक हेपेटोसाइट्स वापरणे का आवश्यक आहे?

उ: सीवायपी एंजाइम - प्रेरित परख सक्रिय सीवायपी एंजाइम प्रोटीन मिळविण्यासाठी "ट्रान्सक्रिप्शन", "ट्रान्सलेशन" वरून "प्रोटीनच्या भाषांतर बदल" वर जाणे आवश्यक आहे. म्हणून, चाचणी प्रणाली यकृत पेशी असावी, यकृत मायक्रोसोम्स किंवा यकृत एस 9 नाही.

प्रश्नः एंजाइम इंडक्शन परखसाठी मला तीन देणगीदार मानवी प्राथमिक हेपेटोसाइट्स निवडण्याची आवश्यकता का आहे?

उत्तरः ड्रग परस्परसंवादाच्या मार्गदर्शक तत्त्वांच्या परिचयानुसार, कमीतकमी तीन देणगीदारांचा वापर केला पाहिजे आणि प्रत्येक देणगीदाराच्या प्रेरण परिणामाचे स्वतंत्रपणे मूल्यांकन केले पाहिजे. सांख्यिकीय दृष्टीने महत्त्वपूर्ण परिणाम देण्याव्यतिरिक्त, आंतर - वैयक्तिक भिन्नतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी प्रयोगासाठी तीन देणगीदारांची निवड देखील अधिक महत्त्वपूर्ण आहे. जर कमीतकमी एका देणगीदाराचा निकाल पूर्वनिर्धारित उंबरठ्यापेक्षा जास्त असेल तर, औषध उमेदवार अपरिवर्तनीय असू शकते आणि अनुसरण करू शकते - मूल्यांकन आवश्यक आहे.

प्रश्नः केवळ सीवायपी एंजाइम इंडक्शनवर लक्ष केंद्रित का करा आणि यूजीटी एंजाइम इंडक्शनवर नाही?

उत्तरः सायपेस इंडक्शनवर लक्ष केंद्रित करण्याचे कारण म्हणजे सायपेस इंडक्शनच्या यंत्रणेचा अधिक स्पष्टपणे अभ्यास केला गेला आहे. दुस words ्या शब्दांत, उगटेस इंडक्शनचा अभ्यास करण्याची आवश्यकता नसण्याचे कारण म्हणजे यंत्रणा अद्याप अस्पष्ट आहे; तथापि, याचा अर्थ असा नाही की UGTASE ला प्रेरित केले जाणार नाही. मार्गदर्शक तत्त्वांमध्ये असेही नमूद केले आहे की ट्रान्सपोर्टर्स आणि फेज II चयापचय एंजाइमच्या इंड्यूसर किंवा इनहिबिटरसाठी कोणतीही प्रमाणित वर्गीकरण प्रणाली नाही.

प्रश्नः पुनरुत्थानानंतर अनुयायी प्राथमिक हेपेटोसाइट्स किती काळ टिकून राहू शकतात आणि पुनरुत्थानानंतर हेपेटोसाइट्सचे पालन न करता किती काळ टिकवून ठेवले जाऊ शकते?

उत्तरः पास्चराइज्ड प्राथमिक हेपेटोसाइट्स सामान्यत: सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य इंडक्शन अ‍ॅसेजसाठी वापरले जातात. सेल पुनर्प्राप्तीनंतर, पेशी प्लेटच्या प्रसार माध्यमामध्ये निलंबित केल्या जातात, योग्य एकाग्रतेमध्ये समायोजित केल्या जातात आणि कोलेजेनमध्ये सुसंस्कृत असतात - लेपित प्लेट्स; मग पेशी 4 ~ 6 तासांच्या आत पास्चराइझ होऊ शकतात. पेशी भिंतीशी जोडल्यानंतर, सेल स्थितीची जास्तीत जास्त जीर्णोद्धार सुनिश्चित करण्यासाठी देखभाल माध्यम पुनर्स्थित केले जाते आणि 18 तासासाठी देखभाल केली जाते. पुढे, चयापचय क्रियाकलाप आणि एमआरएनए इंडक्शन लेव्हल शोधण्यासाठी एंजाइम इंडक्शन परख करता येते. संपूर्ण चक्राच्या दृष्टीकोनातून, हेपेटोसाइट्स भिंत पालनानंतर 6 ~ 7 दिवसांपर्यंत राखल्या जाऊ शकतात. जसजशी वेळ जाईल तसतसे सेलची भिंत पालन स्थिती खराब होते आणि पेशी अलग ठेवतील आणि निलंबित करतील.

जर अनुयायी हेपेटोसाइट्स सुसंस्कृत नसतील तर आम्ही सत्यापित केले आहे की ते 4 ~ 6 तासांच्या आत चांगल्या स्थितीत राखले जाऊ शकतात. आम्ही अद्याप दीर्घ कालावधीसाठी पडताळणी केलेली नाही.

प्रश्नः वापरल्या जाणार्‍या वेगवेगळ्या संस्कृती माध्यमांवर अवलंबून हेपेटोसाइट्स निलंबन आणि अनुयायी पेशी म्हणून वापरले जाऊ शकतात?

उत्तरः घन ऊतक आणि अवयवांमधील बहुतेक पेशी भिंती असतात, परंतु - विट्रोमध्ये सुसंस्कृत असताना सर्व पेशी भिंती नसतात. पेशी भिंत आहेत की नाही हे अनुयायी आहे की नाही हे स्वतः पेशींच्या स्थितीवर अवलंबून आहे; त्याच वेळी, भिंत - अनुयायी पेशींना विशिष्ट संस्कृती मध्यम आवश्यक आहे आणि काही विशेष प्रो - सेल आसंजन पदार्थ (उदा. रॅम्नोजेलिनोजेन, लॅमिनिन, फायब्रोनेक्टिन, सीरम एक्सपेंशन फॅक्टर) जे सेल संलग्नकाच्या प्रक्रियेत भाग घेऊ शकतात. निष्कर्षानुसार, अनुयायी पेशी निलंबन पेशी म्हणून वापरल्या जाऊ शकतात, परंतु निलंबन पेशी अनुयायी वापरासाठी उपलब्ध नसतात.

प्रश्नः अनुयायी भिंत श्लोक निलंबन हेपेटोसाइट्स वापरण्याचे फायदे/तोटे काय आहेत? निर्णयाचे निकष काय आहेत?

उत्तरः हेपेटोसाइट्स वेगळ्या झाल्यानंतर, ते निलंबनात किंवा अनुयायी भिंतीमध्ये सुसंस्कृत होऊ शकतात. निलंबन सुसंस्कृत प्राथमिक हेपेटोसाइट्सपासून साइटोक्रोम पी 450 एंजाइमची क्रियाकलाप पहिल्या 4 ~ 6 एचसाठी - व्हिव्होच्या तुलनेत सर्वात सुसंगत आहे, नंतर काळाच्या वाढीसह वेगाने कमी होतो. म्हणूनच, निलंबन हेपेटोसाइट्स सामान्यत: चयापचय स्थिरता अभ्यासासाठी किंवा मेटाबोलिट प्रोफाइलिंग अभ्यासासाठी वापरले जातात. अनुयायी भिंतीमध्ये सुसंस्कृत प्राथमिक हेपेटोसाइट्समध्ये जैविक वैशिष्ट्ये आणि सामान्य हेपॅटोसाइट्सची चयापचय क्रियाकलाप राखण्यासाठी नुकसानातून बरे होण्यासाठी पुरेसा वेळ असतो. म्हणूनच, ते सामान्यत: सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य इंडक्शन अभ्यास, औषध सायटोटोक्सिसिटी अभ्यास, हळू चयापचय औषधांची चयापचय स्थिरता किंवा उत्पादन अनुमान अभ्यासासाठी वापरले जातात.

सध्या आम्ही वेबपृष्ठ ऑनलाइन खरेदी सेवा प्रदान करत नाही. नोंदणी आणि लॉगिन नंतर शॉपिंग कार्टमध्ये जोडलेली उत्पादने केवळ संदर्भासाठी आहेत. आपल्याला आमची उत्पादने खरेदी करण्याची आवश्यकता असल्यास, कृपया संपर्क आमच्या चॅनेलद्वारे आपली संपर्क माहिती सोडा आणि आम्ही आमच्या सेवा पूर्ण करण्यासाठी वेळेत आपल्याशी संपर्क साधू.

प्रश्न non विशिष्ट प्रोटीन बंधनकारक चाचणी परिणामावर कसा परिणाम होतो?

एक drug जर औषध उमेदवार विशेषत: मायक्रोसोमल प्रोटीनशी नॉन - बांधले तर याचा परिणाम बदललेल्या गतिज पॅरामीटर्समध्ये होतो. प्रथिने एकाग्रता वाढत असताना, केएम मूल्य वाढते, परिणामी कमी गृहीत धरून अंतर्भूत क्लीयरन्स होते. तसेच, मायक्रोसोम्समधील औषधाच्या उमेदवाराच्या प्रथिनेंना बंधनकारक केल्यामुळे भिन्न प्रयोगशाळा आणि भिन्न प्रणालींच्या परिणामामध्ये मोठ्या प्रमाणात फरक येऊ शकतो.

क्यू Phase फेज I किंवा फेज II चयापचय स्थिरता किटच्या सूचना मॅन्युअलमध्ये यकृत मायक्रोसोमल प्रोटीनची शिफारस केलेली एकाग्रता 0.1 मिलीग्राम/एमएल - 1 मिलीग्राम/एमएल आहे, याचा अर्थ असा आहे की यकृत मायक्रोसोम्स वापरताना अद्याप सिस्टममध्ये जोडण्यापूर्वी त्यांना सौम्य करणे अद्याप आवश्यक आहे?

एक: प्रथम हिपॅटिक मायक्रोसोम्स सौम्य करण्याची आवश्यकता नाही; किटमध्ये यकृताच्या मायक्रोसोम्सची एकाग्रता 20 मिलीग्राम/एमएल आहे आणि चाचणी प्रणालीमध्ये यकृताच्या मायक्रोसोम्सची अंतिम एकाग्रता 0.1 - 1 मिलीग्राम/एमएल आहे, जी प्रमाणानुसार जोडली जाऊ शकते.

प्रश्न प्राथमिक हेपेटोसाइट्सच्या चयापचय स्थिरतेच्या चाचणीसाठी सेल घनता काय आहे? यकृत मायक्रोसोम्ससाठी क्लीयरन्स गणना समान आहे का?

ए rimal प्राथमिक हेपेटोसाइट चयापचय स्थिरता परखसाठी शिफारस केलेली सेल घनता 0.5 ते 2 × 10 आहे⁶ पेशी/एमएल, आणि क्लीयरन्स गणना आणि यकृताच्या मायक्रोसोमल चयापचय स्थिरता परखच्या परिणामाची प्रक्रिया सुसंगत आहे.

प्रश्न your आपल्या पीबीएस बफरमधील मुख्य घटक कोणते आहेत? त्यात केसीएल आणि एनएसीएल आहे?

A आम्हाला आमच्या पीबीएस बफरचे मुख्य घटक के आहेत₂एचपीओ₄ आणि केएच₂PO₄, आणि केसीएल आणि एनएसीएलपासून मुक्त आहेत.

प्रश्न Foh फॉस्फेट बफरचा हेतू काय आहे? आपल्याला फॉस्फेटची आवश्यकता का आहे?

ए ers फॉस्फेट बफर शारिरीक वातावरणाची नक्कल करण्याच्या त्यांच्या उद्देशाने निवडले जातात आणि शरीराच्या द्रव वातावरणाची देखभाल करण्यासाठी फॉस्फेट सर्वात महत्वाच्या बफर जोड्यांपैकी एक आहे.

प्रश्न Enzy एंजाइमसाठी नेहमीची सेटिंग काय आहे - प्रेरित रिसेप्टर एकाग्रता? सिस्टमची विद्रव्यता चाचणी घ्यावी तर काही उपाय आहे का?

ए ers एंजाइम इंडक्शन परख 3 वेगवेगळ्या एकाग्रतेसह सेट करणे आवश्यक आहे, एकाग्रता पातळी मानवांमध्ये अपेक्षित प्रभावी रक्तातील औषधांच्या एकाग्रतेची पूर्तता करणे आवश्यक आहे आणि मानवांमध्ये सरासरी प्रभावी रक्तातील एकाग्रतेपेक्षा कमीतकमी एक प्रमाण जास्त प्रमाणात निवडले जाते. जलीय टप्प्यातील विद्रव्यता खराब असल्यास, सेंद्रिय दिवाळखोर नसलेला त्याचा दिवाळखोर नसलेला म्हणून निवडला जाऊ शकतो, उदा. डीएमएसओ, परंतु सिस्टममध्ये जोडलेल्या सेंद्रिय सॉल्व्हेंटची मात्रा नियंत्रित करणे आवश्यक आहे.

प्रश्न car चयापचय स्थिरतेच्या अभ्यासामध्ये, चाचणीसाठी यकृत मायक्रोसोम्स आणि प्राथमिक हेपेटोसाइट्स, दोन चाचणी प्रणाली वापरणे आवश्यक आहे काय?

एक  यकृतिक मायक्रोसोम्स जवळजवळ गोलाकार पडदा वेसिकल असतात - सेल्फने तयार केलेल्या स्ट्रक्चर्स सारख्या - होमोजेनिझेशन आणि यकृताच्या ऊतींचे विभेदक सेंट्रीफ्यूगेशन दरम्यान प्राप्त झालेल्या खंडित एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलमचे फ्यूजन आणि सीवायपी 450 एंजाइम आणि काही बायफासिक एंजाइम असतात, उदा. प्राइमरी हेपेटोसाइट्स (पीएचसी) हे पशु प्राण्यांच्या थेट अलगावानंतर लगेचच सुसंस्कृत हेपेटोसाइट्स असतात, जे मुळात यकृताची चयापचय कार्ये राखतात, विशेषत: व्हिव्होमधील सुसंगत एंजाइम पातळी अधिक चांगले जतन करतात. चयापचय स्थिरता अभ्यासामध्ये, किंमतीचा विचार करण्याची आवश्यकता नाही आणि एकाच वेळी चाचणीसाठी दोन चाचणी प्रणाली निवडल्या जाऊ शकतात; किंवा कंपाऊंडच्या चयापचय गुणधर्मांनुसार योग्य चाचणी प्रणाली निवडली जाऊ शकते आणि तत्त्व म्हणजे कोणत्या सिस्टममध्ये उच्च चयापचय दर आहे. सर्वसाधारणपणे, जेव्हा कंपाऊंड रेणू अधिक पाणी असतात तेव्हा यकृत मायक्रोसोम्स ही सर्वोत्तम निवड असते आणि एक - फेज चयापचय हा मुख्य चयापचय मार्ग आहे (विशेषत: सीवायपी मार्गे); जेव्हा दोन - फेज चयापचय हा मुख्य मार्ग आहे, तेव्हा हायड्रॉलिसिस हा मुख्य चयापचय मार्ग आहे, यकृत मायक्रोसोम्समध्ये विशिष्ट प्रथिने बंधनकारक नसतो आणि यकृत मायक्रोसोम्समध्ये चयापचय स्पष्ट नाही, तर प्राथमिक हेपेटोसाइट्सचा वापर करून चाचणी घेतली जाऊ शकते.

प्रश्न che चयापचय स्थिरता चाचणीमध्ये मायक्रोसोम्सची एकाग्रता तपासली जाते? खूप उच्च किंवा खूप कमी परिणाम काय आहे?

ए We मेटाबोलिक स्थिरता चाचणीमध्ये, प्रथिने एकाग्रता चयापचय दरावर देखील परिणाम करेल, सामान्यत: 0.1 मिलीग्राम/एमएल ~ 1 मिलीग्राम/एमएलच्या मायक्रोसोमल प्रोटीन एकाग्रता निवडा, कंपाऊंडच्या स्वत: च्या चयापचय गुणधर्मांनुसार प्रथिने एकाग्रता किती निवडली जावी. मायक्रोसोमल प्रोटीनच्या एकाग्रतेमुळे सूक्ष्म प्रथिने नसलेल्या औषधाचे विशिष्ट बंधन नसतात; मायक्रोसोमल प्रोटीनच्या एकाग्रतेमुळे औषधाची क्षुल्लक चयापचय होऊ शकते.