Penyelesaian Iphase untuk Penyelidikan Metabolisme Vitro Dadah SiRNA

Penyelesaian Iphase untuk Penyelidikan Metabolisme Vitro Dadah SiRNA

Ubat asid nukleik, kerana ciri -ciri teknologi unik mereka, telah menjadi tumpuan pembangunan dadah baru dalam beberapa tahun kebelakangan ini. Ubat asid nukleik termasuk RNA yang mengganggu kecil (siRNA), oligonukleotida antisense (ASO), microRNA (miRNA), RNA pengaktifan kecil (SARNA), RNA messenger (mRNA), aptamers, dan antibodi - konjugat dadah (ADC), adalah bentuk terapi gen. Antaranya, ubat -ubatan siRNA, sebagai hotspot dalam penyelidikan dan pembangunan dadah asid nukleik, telah digunakan secara meluas dalam pembangunan dadah baru kerana kecekapan gen yang tinggi, kesan sampingan yang dikawal, dan sintesis yang mudah. Mereka dijangka menjadi ubat yang paling menjanjikan untuk pembangunan dadah baru selepas molekul kecil dan ubat antibodi.

1. 1. Wawasan mekanistik ke dalam tindakan dadah siRNA

RNA yang mengganggu kecil (siRNA), juga disebut sebagai Silencing RNA, RNA mengganggu pendek, atau Non - pengekodan RNA, terdiri daripada molekul RNA yang pendek - biasanya 21-25 pasang asas panjang. Apabila sintesis, siRNA memasuki sel melalui endositosis. Sebilangan kecil siRNA melarikan diri degradasi lysosomal dan memasuki sitoplasma, di mana ia dimasukkan ke dalam RNA - Silencing Complex (RISC). Di dalam RISC, siRNA melegakan ke dalam dua helai tunggal: helai rasa dan helai antisense. Strand rasa cepat terdegradasi dalam sitoplasma, manakala RISC, terikat pada helai antisense, diaktifkan. Kompleks itu kemudian mengikat secara selektif ke mRNA sasaran, memudahkan belahan dan kemerosotan berikutnya. Hasil daripada kemerosotan mRNA, tahap ekspresi gen sasaran dikurangkan dengan ketara, akhirnya membawa kepada pembubaran gen dan perencatan terjemahan protein.

1. 2. Strategi Penyelidikan Metabolisme SiRNA

Dalam vivo, ubat siRNA terutamanya dimetabolisme oleh nukleus dan exonucleases yang terdapat dalam plasma dan tisu, dan bukannya oleh enzim metabolik Fasa I dan II di hati. Berikutan pengubahsuaian struktur, kini dipasarkan ubat -ubatan siRNA mempamerkan metabolisme yang dikurangkan dalam aliran darah. Biasanya, majoriti ubat siRNA cepat diambil oleh hati, dengan pecahan yang lebih kecil diedarkan kepada tisu lain, di mana ia kemudiannya dimetabolisme oleh nukleas di hati atau tisu lain. Untuk kajian metabolisme vivo ubat siRNA, produk metabolik biasanya dikenalpasti dan dianalisis secara kuantitatif dalam plasma, air kencing, najis, dan tisu sasaran (seperti hati atau buah pinggang) dari model haiwan.

Walau bagaimanapun, semasa peringkat awal pembangunan dadah, sebilangan besar sebatian, garis masa eksperimen yang diperluaskan, dan kos yang tinggi yang berkaitan dengan kajian vivo menimbulkan cabaran yang signifikan untuk pemeriksaan kompaun skala besar dan pengoptimuman struktur. Akibatnya, kajian metabolisme in vitro sangat penting semasa fasa pemeriksaan awal pembangunan dadah siRNA. Kajian -kajian ini menawarkan kelebihan yang ketara, seperti throughput yang tinggi dan kitaran eksperimen yang lebih pendek, yang dapat meningkatkan kecekapan pemeriksaan dadah siRNA.

Jadual 1: Sistem penyelidikan metabolisme in vitro untuk ubat siRNA

1. 3. Iphase produk yang berkaitan