कसरी कमेटर असामानको लागि स्लाइडहरू तयार गर्ने
दधूमकेतूएकल रूपमा पनि परिचित - सेल जेल इलेक्ट्रोपोनिसिस पनि व्यक्तिगत कोषहरूमा डीएनए क्षति मात्रामा संवेदनशील र बहुमुखी टेक्निक हो। उच्च तयारी गर्दै - गुणवत्ताधूमेल असामा स्लाइडएस एक महत्वपूर्ण कदम हो जुन विश्वसनीयता निर्धारण गर्दछ र अशान्ति नतिजाको परिणामस्वरूप। यो लेखले COMET Assay को लागी स्लाइड तयार गर्न एक विस्तृत गाईड प्रदान गर्ने लक्ष्य राखेको छ, विज्ञहरुबाट विज्ञहरुबाट अन्तर्दृष्टि अन्तर्दृष्टि। हामी प्रत्येक महत्वपूर्ण कदम कभर गर्नेछौं, सेल चयनबाट डाटाको व्याख्याबाट, तपाईंले उत्तम परिणामहरू प्राप्त गर्न उत्तम परिणामहरू प्राप्त गर्न सुनिश्चित गर्दछ।Charever Ansey र यसको महत्त्वको परिचय
● Comeet Assay को सिंहावलोकन
1 1980 s0 को दशकको अन्ततिर विकसित, डीएनएमा डीएनओएचर्याक्ट्रोल कोषहरूमा डीएनएच स्ट्यान्ड गर्नको लागि एक शक्तिशाली उपकरण हो। यो जग्गामा फराकिलो रूपमा प्रयोग गरिन्छ जस्तै समझौता टेक्स्टिंग, आणविक महामारीविज्ञान, र वातावरणीय बानमोनकीकरण। COMET Ast को सिद्धान्तले अगाजातका कक्षहरू एट्याडडि ing कोषहरू समावेश गर्दछ, तिनीहरूलाई झिल्ली र प्रोटीनहरू हटाउनका लागि झूट बोल्छ, र त्यसपछि इलेक्ट्रोफोफोशिस गर्न डीएनए प्रस्तुत गर्न। परिणामस्वरूप छवि, एक धूमेट मिल्दछ, DNA क्षति को मात्रा को लागी अनुमति दिन्छ।Dan dna dna मा अनुप्रयोगहरू पत्ता लगाउन
धूर्त नियमहरू विशेष गरी मूल्यवान विषाक्त पदार्थ, विकिरण, र फार्मास्यूटिकलहरूको कारण डीएनए क्षति पत्ता लगाउनमा मूल्यवान छन्। डीएनए स्क्वेइजहरूमा डीएनए मर्मत संयन्त्रको प्रभावकारिता मूल्या ating ्कन गर्न तिनीहरू पनि एक आवश्यक भूमिका खेल्छन्। अन्वेषकहरू क्यान्सर, बुढेसकालमा क्यान्सर, र अन्य रोगहरू डीएएनए क्षतिको साथ लिंक गरिएको छ।● जनटोटोक्सिकता परीक्षणमा महत्त्व
Comveets निर्वाचन को नियामक र अनुसन्धान महत्त्व बुझ्न सक्दैन। तिनीहरू सम्भावित जीनोटोक्सिक कम्पाउन्डहरू पहिचान गर्न आवश्यक प्रारम्भिक स्क्रीनिंग उपकरणको रूपमा सेवा गर्दछन्। यी सबै जानकारीले निर्णयलाई असर गर्न सक्छ जसले लागूऔषध विकास र वातावरणीय सुरक्षाको आकलनहरूमा प्रक्रियाहरू बनाउनेछ।कमर्मका लागि उपयुक्त कोषहरूको चयन
● सेलहरूको प्रकारहरू प्रयोग गरियो
कक्षहरूको छनौटले धूमकेतु अधायको नतीजालाई महत्त्वपूर्ण प्रभाव पार्न सक्छ। सामान्यतया प्रयोग गरिएको सेलहरूमा लिम्फोसाइट्स, समुद्री तट कोषहरू, र विभिन्न अनुकूल सेल लाइनहरू समावेश छन्। अक्सर अक्सर अध्ययनका उद्देश्यहरूमा आधारित सेल प्रकारहरू चयन गर्दछ र नमूनाहरू प्राप्त गर्न सजिलो।C सेल छनौटको लागि विचारहरू
कक्षहरू छनौट गर्दा, कारकहरू विचार गर्नुहोस् जस्तै सेल उपलब्धता, संवेदनशीलता डीएनए क्षति, र अनुसन्धान प्रश्न गर्न प्रासंगिकता। उदाहरण को लागी लिम्फोसाइट्स सजीलै र रगतबाट प्राप्त हुन्छ र जीनोटोक्सिक एजेन्टहरूको लागि संवेदनशील हुन्छ, तिनीहरूलाई धेरै अध्ययनका लागि उत्कृष्ट छनोट गर्दै।● अशान्ति परिणाममा प्रभाव
कोषहरूको मूल र राज्यले डीएनए क्षति र कोषको उपचारको डेमोरेट स्तरमा असर गर्न सक्छ। तसर्थ, COLTERSET PRINGES प्राप्त गर्नको लागि लगातार सेल चयन र ह्यान्डलिंग प्रोटोलहरू महत्वपूर्ण छन्।Agarize giel को तयारी
Ager प्रयोग गर्न Ageross को प्रकारहरु
दाँया अगाज छनौटलाई कोनटेटको अथाहको अखण्डताको लागि महत्त्वपूर्ण छ। कम पग्लिदै आंकडा Agarized मनपर्यो किनकि यसले प्रशोधनको क्रममा द्रुत रूपमा डिकर कम गर्दछ र कम गर्दछ। उच्च - प्रतिष्ठित आपूर्तिकर्ताहरूबाट गुणस्तर● Agoosizet एकाग्रता र तयारी चरणहरू
सामान्यतया, एक 1% कम पग्लि ائting ag ag Agarof एकाग्रता प्रयोग गरिन्छ। एक उपयुक्त बफरमा अगाडी विघटन गर्नुहोस्, पूर्ण रूपमा पग्लिए सम्म, र त्यसपछि तापमान गर्न सेल इम्बेडिंगको लागि सुरक्षित छ। सुनिश्चित गर्नुहोस् कि अगाज पोलबुले र मलबेबाट नि: शुल्क छ भने अधायमा कलाकृतिहरु लाई बेवास्ता गर्न।Chance hepplial gel gel गुणस्तर सुनिश्चित गर्दै
अगासजज जेलको गुणस्तरले अशान्तिको संवेदनशीलता र प्रजननता क्षमताको प्रभाव पार्न सक्छ। उचित ह्यान्डलिंग र तयारी प्रविधिहरू विभिन्न स्लाइडहरूमा लगातार सम्पत्तीहरूको साथ समग्र परेल उत्पादन गर्न आवश्यक छ। यसले सुनिश्चित गर्दछ कि Comvers 'गठन र दृश्य वर्दी छन्।Agarose मा सेल निलम्बन र इम्बेड कोषहरू
Cab सेल निलम्बना तयारी गर्दै
एकल प्राप्त गरेर सुरू गर्नुहोस् सेल निलम्बन। संस्कृत कोषहरूको लागि, यसमा ट्यूप्निनिफिकेज समावेश छ, पछि तटस्थ र धुने हुँदै। लिम्फोसाइट्स, सेन्ट्रीफुगेसन, सेन्ट्रीफुगेसन र उपयुक्त बफरमा प्राथमिक बफेर्गको लागि पुन: पुन: स्थापना आवश्यक छ। लगभग 1 x 10 ^ c सेलहरू / ML को एक सेल एकाग्रता सुनिश्चित गर्न हेमोसाइटमीटर प्रयोग गर्नुहोस्।● कम पग्लि arteount विन्दुमा एम्बेड गरिएका कोशिकाहरू
पूर्वको साथ सेल निलम्बन मिश्रण गर्नुहोस् - दुईवटा पग्लिदै गडबडी एक अनुपातमा कृषिको आवाजले कक्षहरूको एक समान वितरण सुनिश्चित गर्दछ। छिटो पाइपेट प्रिन्टमा मिश्रणको मिश्रण कोटि - लेपित कमसेट Aseay स्लाइडहरू, जुन एक कमटेट अंक स्लाइड कारखाना वा एक विश्वसनीय आपूर्तिकर्ताबाट किन्न सकिन्छ। Agerosip लाई सहजै फैलाउन र हावा बुलबुले रोक्नको लागि कभर्स्लिप प्रयोग गर्नुहोस्।● स्लाइडहरूमा सेलहरू फैलाउँदै
एक पटक अगाडी फैलियो भने स्लाइडहरूलाई चिसो गर्न र चिसो सतह वा फ्रिज गरिएको क्षेत्र मा सुदृढीकरण गर्न अनुमति दिनुहोस्। यो चरणले कृषिलाई असमानकरण गर्नबाट रोक्न कुशलतासाथ कुशलतासाथ लिनुपर्दछ, जुन विश्लेषणको बखत धूमकेतुलाई असर गर्न सक्छ।स्लाइडहरूमा कोषहरूको लिसिस
● लिसिस समाधान कम्पोजिसन
लिटिस समाधानमा सामान्यतया साल्दछ र डिटर्जन्टहरू, जस्तै नाकल, र ट्रमिन एक्स - 100, कटाइज गरिएका टुक्राहरू हटाउनुहोस् र डीएमईट्रेस र प्रोटीनहरू हटाउनुहोस्।● लिसिस प्रक्रिया र सर्तहरू
लिसिस समाधानमा स्लाइडहरू विच्छेदनहरू बिग्रिनुहोस् र कम्तिमा 1 घण्टाको लागि इन्सुबेट, यद्यपि राति इक्वेसनलाई प्राय: रुचाइन्छ। वाष्पीकरण ट्या tank ्कलाई वाष्पीकरण र दूषित हुनबाट जोगाउन कभर गरिएको छ। लिसिस चरणको सर्तहरू डीएनएलाई अपमान नगरेसम्म सेलुलरहरूको सेलुलरहरूको पारन्य काटीहरू हटाउने महत्वपूर्ण छन्।● पूर्ण सेल लिसिस को महत्व
अयोग्य lyise ले खराब कोटेट गठन र अविश्वसनीय डाटाको परिणाम दिन्छ। तसर्थ, लाइसिस प्रोटोकल सावधानीपूर्वक अनुसरण गर्न आवश्यक छ, समाधान स्लाइडका सबै भागहरू प्रवेश गर्ने र त्यो इक्वेसन समयहरू पूर्ण सेल अवरोधका लागि पर्याप्त छ।क्षारीय अनावश्यक र इलेक्ट्रोफोर्डिस सर्तहरू
Al क्षय समाधान तयारी गर्दै
क्षारीयण समाधान, प्राय: नाओह र एडटाको मिश्रण, डीएनए अनलाइन गर्न प्रयोग गरिन्छ। यसको तयारी ध्यानपूर्वक गर्नु पर्छ, सहि पीएच र गिल्ला सुनिश्चित गर्दै। ताजा रूपमा यसको प्रभावकारिता कायम गर्न समाधान तयारी गर्नुहोस्।● क्षालिन अनावश्यक महत्त्व र समय
क्षारीयल समाधानमा इन्द्बेट स्लाइडहरू, सामान्यतया 20 - minutes0 मिनेट, डीएनएनए स्ट्राइन्डलाई अनावश्यक गर्न अनुमति दिन। यो चरण एकल पत्ता लगाउनका लागि महत्वपूर्ण छ तपाईंको विशिष्ट प्रोटोकल र सेल प्रकारको आधारमा अनावश्यक समय अप्टिमाइज गर्नुहोस्।Plance इलेक्टोल्फोर्शिस सेटअप र प्यारामिटरहरू
चिसो क्षारीयन इलेक्ट्रोफेरिज बफरको साथ इलेक्ट्रोफोरिस ट्या tank ्क सेट अप गर्नुहोस्। स्लाइडहरूलाई ट्या the ्कमा राख्नुहोस्, सुनिश्चित गर्दै तिनीहरू पूर्ण रूपमा डुबेका छन्। 20 बर्षसम्म एक सुतुर भोल्टेज लागू गर्नुहोस् (सामान्यतया 2 p v) 300 मिनेट। व्युत्पन्न सर्तहरू, भोल्टेज र समय सहित, DNA प्रवासको उत्तम रिजोलुसन हासिल गर्न अनुकूलित हुनुपर्दछ।तटस्थ र दाग प्रक्रिया
● तटस्थ बफर तयारी र प्रयोग
इलेक्ट्रोफोशिज पछि, प्रतिक्रिया रोक्नको लागि स्लाइडहरूलाई रोक्नुहोस् र डीएनए स्थिर छ। एक साधारण तटस्थ बफरले ph .5..5 को पीएचएस बेस समावेश गर्दछ। थोरै रूपमा यस बफरमा स्लाइडहरू तल स्लाइडहरू धेरै चोटि एल्कलीन समाधानको सबै ट्रेसहरू हटाउनका लागि।● दाग दिने प्रविधि
एक फ्लोरसन्ट डीएनएको साथ तटस्थ भलाइ - घन स्लाइडहरू - बाध्यकारी र ye ्ग, जस्तै एथलियम Bromide वा Shrbr हरियो। इथियोडियम ब्रोमइड, जबकि क्लासिक, यसको म्यूगोनिक गुणहरूको कारण सावधानीपूर्वक ह्यान्डलिंग आवश्यक छ। SCRBL हरियोले उच्च संवेदनशीलताका साथ सुरक्षित वैकल्पिक प्रस्ताव गर्दछ। एक उपयुक्त समय को लागी स्लिप समाधानमा स्लाइडहरू गणना गर्नुहोस् (सामान्यतया 1 - minutes0 मिनेट) अन्धकारमा।DNA धूमकेतुको दृश्य
दागपछि, स्लाइडहरूले थोरै दाग हटाउन बिस्तारै कुल्ला। एक फ्लूस माइक्रोस्कोप मुनि स्लाइड जाँच गर्नुहोस्। दाग र माइक्रोस्कोपको क्वालिटीको गुणवत्ताहरू धूमकेतुहरूको खाली छविहरू प्राप्त गर्नका लागि महत्त्वपूर्ण छन्।माइक्रोस्कोप र छवि विश्लेषण
● सही माइक्रोस्कोप छनौट गर्दै
एक उपयुक्त फिल्टर सेटको साथ सुसज्जित एक फ्लोरूक्भाविक माइक्रोस्कोपले दाग डीएनए भिजुअल गर्न आवश्यक छ। उच्च रिजोलुसन र क्यामेराको साथ माइक्रोस्कोप र क्यामेरा प्रणालीको धूपहरूको विस्तृत छविहरू क्याप्चर गर्न सक्षम छ।● उच्च क्याप्चर - गुणस्तर छविहरू
कम्तिमा 500 भन्दा कम मिटरहरू वाईडहरू प्रति स्लाइड स्थिरतापूर्ण महत्वको लागि स्लाइड गर्नुहोस्। पार्टिफ्रेक्सबाट बच्न रोशनी र फोकस सुनिश्चित गर्नुहोस्। माइक्रोस्कोप र क्यामेरा सेटिंग्सको उचित क्यालिब्रेसन छवि गुणवत्तालाई बढावा दिन्छ।● Someet विश्लेषण को लागी सफ्टवेयर
धेरै सफ्टवेयर प्रोग्रामहरू धूमकेतु विश्लेषणका लागि उपलब्ध छन्, जस्तै रुपाइक्टोर र CASP। यी कार्यक्रमहरू टेल लम्बाई, पुच्छर तीव्रता, र पुच्छर क्षणको लागि नक्कल गर्नेहरू जस्ता प्यारामिटरहरू मापन गर्छन्, जुन DNA क्षति मात्रामा आलोचनात्मक हुन्छन्।साझा विषयहरूको समस्या निवारण
● साधारण समस्याहरू
Chants Assay मा साझा मुद्दाहरु मा उच्च पृष्ठभूमि फ्लोरफोर्भाविक, कम कोटेट गठन, र स्लाइड बीचको असंगत परिणामहरू समावेश गर्दछ। यी समस्याहरू विभिन्न स्रोतहरूबाट रोक्न सकिन्छ, गरीब कक्ष ह्यान्डलिंग, सबपेटिमल जेल तयारी, र गलत लिसिस वा इलेक्टोफोशियस सर्तहरू सहित।● समाधान र रोकथाम उपायहरू
उच्च पृष्ठभूमि फ्लूफोर्जीलाई कम गर्न, सबै अभ्याक्टरहरू र जेलहरू दूषित पदार्थहरूबाट मुक्त छन् भन्ने कुरा सुनिश्चित गर्नुहोस्। कम कोटेट गठन को लागी, प्रमाणित गर्नुहोस् कि सेल व्यवहार्यता उच्च छ, र leiss सर्तहरू अप्टिमाल हुन्। लगातार स्लाइड तयारी र पूर्ण प्रोटोकल पालना कुञ्जी रोकथाम उपायहरू हुन्।Spress पुन: उत्पादन र शुद्धता सुनिश्चित गर्दै
CONTERT Assays मा प्रावधान प्राप्त गर्दै प्रत्येक चरणको नियमित प्रमाणीकरण आवश्यक पर्दछ। नियमित रूपमा क्यालिब्रेट उपकरण, उच्च प्रयोग गर्नुहोस् गुणवत्ता अभ्यासलाई, र सटीकता सुनिश्चित गर्न सबै प्रयोगात्मक अवस्थाहरूको विस्तृत रेकर्डहरू कायम राख्नुहोस्।डाटा व्याख्या र परिणाम रिपोर्ट
Acclessechesse टेल प्यारामिटरहरूको विश्लेषण गर्दै
DNA क्षति मात्रामा कुञ्जी प्यारामिटरहरूले टेल लम्बाईमा डेल लम्बाइमा, जसले डीएनए प्रवासको सीमा प्रतिबिम्बित गर्दछ, जसले पुच्छरमा डीएनए डेलको मात्रालाई जनाउँदछ। जैतुन टेल पल, एक समग्र मापन पनि सामान्यतया प्रयोग गरिएको छ।● डाटा रिपोर्टिंगमा सांख्यिकीय विचारहरू
डाटाको व्याख्याका लागि सही सांख्यिकीय विश्लेषण आवश्यक छ। उपयुक्त नमूना समूहहरू बीचको डीएनएस क्षति स्तर तुलना गर्न उपयुक्त सांख्यिकीय परीक्षणहरू प्रयोग गर्नुहोस्। सुनिश्चित गर्नुहोस् कि बहु स्लाइडहरू र प्रयोगहरूबाट डाटा पोइन्ट गर्न पोइन्ट गर्न पोख्त छन्।● वर्तमान र व्याख्या
मुख्य खोजहरू वर्णन गर्न ग्राफ र संक्षिप्त तरीकाले तपाईंको नतीजा प्रस्तुत गर्नुहोस्। डीएनए डीएनएको प्रभावको बारेमा छलफल गर्नुहोस् र अध्ययन अन्तर्गत जैविक प्रणालीमा सम्भावित प्रभाव अवलोकन गरियो।निष्कर्ष: उच्च प्राप्ति गर्दै - गुणस्तर Colormet asay स्लाइड
उच्च तयारी गर्दै - गुणवत्ता वेतन स्लाइडले सेल चयन, लिसिस सर्तहरू, दाग, दाग र छवि विश्लेषणको होसियारी र छवि विश्लेषणको होसियारी र छवि विश्लेषणमा। प्रत्येक चरणलाई सावधानीपूर्वक अनुकूलित र प्रजननशील परिणामहरू सुनिश्चित गर्न सावधानीपूर्वक अनुकूलन र मानकीकृत हुनुपर्दछ। प्रतिस्पर्धी धूर्त अफिसर स्लाइड आपूर्तिकर्ताहरू र निर्माताहरूले उच्च प्रदान गरेर तपाईंको अहंकारको गुणस्तर बढाउन सक्दछन् र क्लेर सामग्री र प्राविधिक समर्थन।● को बारेपुलुसेबायोसाइज
उत्तर वेल्स, पेन्सिलभेनिया, मल्जेपी जैतै उपन्यास, र नवीन "उच्च -" विशेष, उत्पादन, र प्राविधिक सेवाहरू एक "विशेष, उत्पादन, र प्राविधिक सेवाहरू एक हो। वैज्ञानिक अनुसन्धानको लागि उत्कृष्ट ज्ञान र उत्सुकताका लागि उत्कृष्ट अनुभवी जनसंख्याको उत्परिवर्तिएका विज्ञहरू उनीहरूको अनुसन्धान उद्देश्य प्राप्त गर्न सहयोगीहरूलाई गुणस्तरीय नवीकरणीय रोगहरू प्रदान गर्न प्रतिबद्ध छन्। भविष्यको अनुसन्धान गर्नु "नवीन रीकारहरू अनुसन्धान गर्दै r & D आदर्शलाई पछ्याउँदै 12,00,000 भन्दा बढी वर्ग मिटरहरू कभर गर्दै।समय: 2024 - 08 28 25 14:25