Inleiding totLevermicrosomenen S9 -fracties
Op het gebied van medicijnmetabolisme en farmacokinetiek is het cruciaal begrijpen van de ingewikkeldheden van levermicrosomen en S9 -fracties. Deze in vitro systemen zijn van groot belang in de vroege stadia van het ontdekken van geneesmiddelen, waardoor inzichten worden geboden in hoe nieuwe chemische entiteiten (NCE's) worden gemetaboliseerd door de lever. Het vermogen om metabole stabiliteit en potentiële geneesmiddelinteracties te voorspellen is van onschatbare waarde, waardoor tijd en middelen worden bespaard bij de ontwikkeling van nieuwe farmaceutische producten. Dit artikel duikt in de verschillen tussen levermicrosomen en S9 -fracties, het onderzoeken van hun samenstelling, functionaliteit, voordelen en beperkingen.Samenstelling en structuur van levermicrosomen
● Microsomen als onderdeel van het endoplasmatische reticulum
Levermicrosomen zijn blaasjes - zoals artefacten afgeleid van het endoplasmatische reticulum in eukaryotische cellen. Ze worden gevormd wanneer cellen worden afgebroken tijdens het homogenisatieproces, wat resulteert in de sedimentatie van het endoplasmatische reticulum. Deze subcellulaire fractie is verrijkt met membraan - gebonden enzymen en is van het grootste belang bij het bestuderen van het metabolisme van het medicijn, met name fase I -reacties.● Belangrijkste enzymen bij betrokken: cytochrome P450s en UGT's
De hoge concentratie van cytochroom P450 -enzymen (CYP's) in levermicrosomen is hun bepalende kenmerk. Deze enzymen spelen een cruciale rol in het oxidatieve metabolisme van een breed scala aan xenobiotica, waaronder medicijnen en milieutoxines. Ook aanwezig zijn uridinedifosfaat - Glucuronosyltransferasen (UGT's), die bijdragen aan de conjugatie en daaropvolgende eliminatie van metabolieten, waardoor een eerste stap wordt gemarkeerd naar het begrijpen van fase I en sommige fase II -reacties.Samenstelling en structuur van S9 -fracties
● S9 als een combinatie van microsomale en cytosolische breuken
De S9 -fractie, vaak aangeduid als de 9000G supernatant, is een subcellulaire component verkregen uit leverhomogenaten door differentiële centrifugatie. In tegenstelling tot microsomen die overwegend endoplasmatisch reticulum - gebonden enzymen bevatten, omvat de S9 -fractie zowel microsomale als cytosolische enzymen, met een meer uitgebreid enzymatisch profiel.● Enzymen aanwezig in S9 inclusief fase I en II
S9 -fracties bieden een rijker enzymatisch milieu, waarbij beide fase I -enzymen zoals CYP's en een reeks fase II -enzymen, zoals sulfotransferasen, glucuronosyltransferasen en glutathione - s - transferasen, ingekapsuleerd. Deze array zorgt voor meer uitgebreide metabole transformaties, waardoor de in vivo omgeving van de lever nauwkeuriger wordt gesimuleerd dan alleen microsomen.Functionaliteit: fase I en fase II -metabolisme
● Verschillen in enzymactiviteit tussen microsomen en S9
Het kernverschil ligt in de enzymatische reikwijdte. Levermicrosomen ondersteunen voornamelijk fase I metabole reacties, waarbij oxidatie, reductie en hydrolyse betrokken zijn. Deze reacties introduceren of blootleggen functionele groepen op de medicijnmoleculen, waardoor de weg wordt vrijgemaakt voor fase II -reacties. S9 -fracties daarentegen omvatten zowel fasen I als II, waardoor conjugatiereacties worden vergemakkelijkt die microsomen niet onafhankelijk kunnen presteren.● Het belang van fase I en II in het medicijnmetabolisme
De sequentiële aard van fase I en II -reacties onderstreept hun betekenis in het metabolisme van het geneesmiddel. Fase I -modificaties bereiden in het algemeen de verbindingen voor op fase II, waarbij typisch vervoeging inhoudt om de oplosbaarheid te verhogen, die in het uitscheidingsproces wordt geholpen. Het begrijpen van deze fasen is van vitaal belang voor het voorspellen van de biologische beschikbaarheid, werkzaamheid en potentiële toxiciteit van een medicijn.Toepassingen in onderzoek naar medicijnmetabolisme
● Gebruik in ADME -studies: absorptie, verdeling, metabolisme, eliminatie
Levermicrosomen en S9 -fracties zijn cruciaal in ADME -studies, die de absorptie, verdeling, metabolisme en eliminatie van kandidaten voor geneesmiddelen evalueren. Deze studies zijn van cruciaal belang bij het bepalen van het farmacokinetische profiel van geneesmiddelen, waardoor essentiële gegevens worden geboden die dosering, potentiële interacties en bijwerkingen informeren.● Vergelijkende studies: microsomen versus S9 bij het ontdekken van geneesmiddelen
Vergelijkende analyse tussen microsomen en S9 -fracties onthult dat hoewel beide hun gebruik hebben, S9 -fracties een meer holistische kijk op metabole stabiliteit bieden vanwege de opname van fase II -enzymen. Deze uitgebreide analyse helpt bij de identificatie van metabole routes die mogelijk niet duidelijk zijn bij het gebruik van levermicrosomen alleen.Voordelen van levermicrosomen
● Kosten - Effectiviteit en beschikbaarheid
Levermicrosomen hebben de voorkeur voor hun kosten - Effectiviteit en wijdverbreide beschikbaarheid. De processen voor hun voorbereiding en gebruik zijn goed vastgesteld, waardoor ze een praktische keuze zijn voor veel laboratoria.● Compatibiliteit met hoge doorvoer en automatisering
De eenvoud van microsoombepalingen maakt ze vatbaar voor hoge doorvoer en automatisering, een essentiële functie voor het snel screenen van grote bibliotheken van verbindingen. Dit voordeel is cruciaal bij het stroomlijnen van de drugsontdekkingspijplijn, waardoor veelbelovende kandidaten vroege identificatie mogelijk zijn.Voordelen van lever S9 -fracties
● Uitgebreide metabole weergave
Met zowel fase I- als II -enzymen bieden S9 -fracties een completere beoordeling van het metabolische lot van een verbinding. Deze uitgebreide weergave is met name nuttig voor het identificeren van potentiële metabolieten vroeg in het ontwikkelingsproces van geneesmiddelen.● Opname van fase II -metabolisme en kostenoverwegingen
Het opnemen van fase II -enzymen betekent dat S9 -fracties inzicht kunnen geven in conjugatiereacties, waarbij wordt voorspeld hoe geneesmiddelen in het lichaam worden verwerkt. Hoewel ze voor bepaalde reacties extra cofactoren nodig hebben, bieden ze nog steeds een gunstig evenwicht tussen kosten en nut in hoge doorvoerinstellingen.Beperkingen van levermicrosomen
● Afwezigheid van cytosolische enzymen die de volledige gegevens van het metabolisme beïnvloeden
Een significante beperking van levermicrosomen is hun gebrek aan cytosolische enzymen, die essentieel zijn voor een volledig metabolisch beeld. Deze afwezigheid betekent dat sommige metabolieten over het hoofd kunnen worden gezien en kritische paden missen die belangrijk zijn voor het begrijpen van de veiligheid en werkzaamheid van geneesmiddelen.● Vereiste voor aanvullende systemen voor fase II -studie
Om fase II -reacties volledig te bestuderen, zijn aanvullende systemen of suppletie met externe enzymen/cofactoren nodig bij het gebruik van microsomen. Deze vereiste kan het ontwerp en de interpretatie van het assay ingewikkelder maken.Beperkingen van lever S9 -fracties
● Noodzaak van CO - Factoren en mogelijke enzymverdunning
Ondanks hun uitgebreide aard vereisen S9 -fracties vaak de toevoeging van cofactoren om bepaalde enzymatische activiteiten te ondersteunen. Deze behoefte kan variabiliteit en complexiteit in assays introduceren. Bovendien kan de verdunning van enzymen in S9 -fracties, vergeleken met geïsoleerde preparaten, de gevoeligheid van detectie voor sommige metabole reacties beïnvloeden.● Opslag- en voorbereidingsuitdagingen in vergelijking met microsomen
Bereiding en opslag van S9 -fracties kunnen uitdagender zijn dan voor microsomen. Goed onderhoud van enzymatische activiteit door zorgvuldige behandeling en opslag is cruciaal voor het verkrijgen van betrouwbare resultaten, waardoor het gebruik ervan in grote - onderzoek enigszins compliceert.Conclusie en aanbevelingen
● Samenvatting van de beste - Gebruik scenario's voor elke methode
Levermicrosomen en S9 -fracties hebben elk verschillende sterke en zwakke punten. Levermicrosomen kunnen het beste worden gebruikt wanneer kosten - Effectieve, snelle fase I -metabolisme -screening nodig is. S9 -fracties zijn daarentegen beter geschikt voor uitgebreide studies die inzichten vereisen in zowel fase I als II -metabolisme. Het selecteren van het juiste systeem hangt af van de specifieke vereisten van het onderzoek en de beschikbare bronnen.● Suggesties voor optimaal gebruik bij de ontwikkelingsprocessen van geneesmiddelen
Voor mensen in vroege fasen van geneesmiddelenontwikkeling kan het gebruik van hoge - kwaliteitslevermicrosomen van een gerenommeerde leverancier van levermicrosomen of fabrikant van levermicrosomen initiële screenings stroomlijnen. Naarmate onderzoek vordert, opnemenlever S9Fracties, mogelijk afkomstig uit een betrouwbare fabriek in de levermicrosomen, zullen een vollediger beeld geven van metabole stabiliteit, waardoor robuuste evaluatie van de kandidaat voor geneesmiddelen wordt gewaarborgd.● Inleiding totIPHASE
IPHase Biosciences is met hoofdkantoor in Noord -Wales, Pennsylvania, Iphase Biosciences, is een "gespecialiseerde, nieuwe en innovatieve" High - Tech Enterprise Integratie van onderzoek, ontwikkeling, productie, verkoop en technische diensten van innovatieve biologische reagentia. Door gebruik te maken van uitgebreide kennis en passie voor wetenschappelijk onderzoek, is ons wetenschappelijke team toegewijd om innovatieve biologische reagentia van kwaliteit aan wetenschappers wereldwijd te leveren en onderzoekers te helpen tijdens hun wetenschappelijke onderneming om hun onderzoeksdoelstellingen te helpen bereiken. Het nastreven van het R & D -ideaal van "innovatieve reagentia, onderzoek naar de toekomst", heeft Iphase meerdere R & D -faciliteiten, verkoopcentra, magazijnen en distributiepartners over de hele wereld opgericht.
Posttijd: 2024 - 11 - 26 16:50:02